Transplantation von humanen neuralen Vorläuferzellen in das Gehirn von Mäusen

Sichern Sie eine anästhesierte Maus in einem stereotaktischen Rahmen.

Tragen Sie eine Augensalbe auf, um ein Austrocknen der Hornhaut zu verhindern.

Rasieren Sie die Kopfhaut und desinfizieren Sie die Haut.

Setze die Ohrbügel ein, um den Schädel zu stabilisieren.

Machen Sie dann einen Schnitt in der Mittellinie, um den Schädel freizulegen.

Bohren Sie ein Loch durch den Schädel an der Zielkoordinate.

Laden Sie eine Spritze mit genetisch veränderten menschlichen neuralen Vorläuferzellen oder NPCs, die Luciferase exprimieren, und einem fluoreszierenden Protein zur Visualisierung.

Richten Sie die Spritze auf die Zielstelle aus und senken Sie die Nadel auf die gewünschte Tiefe ab.

Tragen Sie Gewebekleber um die Nadel auf, um ein Austreten von Zellen zu verhindern.

Injizieren Sie die Zellen langsam, um eine gleichmäßige Verteilung zu gewährleisten.

Halten Sie die Nadel kurz an Ort und Stelle, um einen Rückfluss der Zellsuspension zu verhindern.

Ziehen Sie zum Schluss die Nadel langsam zurück und schließen Sie den Schnitt.

Das Mausmodell mit transplantierten NPCs ist nun bereit für die Visualisierung.

Transportieren Sie das Tier von der Induktionskammer zum stereotaktischen Rahmen und halten Sie die Narkose mit einer Gesichtsmaske aufrecht.

Tragen Sie Augengleitmittel auf, um ein Austrocknen der Augen zu verhindern. Rasieren Sie die Kopfhaut der Maus mit einem Elektrorasierer und desinfizieren Sie die Haut mit 5-prozentiger Betadin-Lösung mit Wattestäbchen. Befestigen Sie den Mauskopf und führen Sie die Ohrbügel in den äußeren Gang ein.

Bohren Sie mit einem chirurgischen Zahnbohrer ein Loch mit einem Durchmesser von zwei bis drei Millimetern durch den Schädel. Suspendieren Sie die vorbereiteten Zellen wieder in das Röhrchen und ziehen Sie zwei Mikroliter Zellsuspension in eine Spritze. Platzieren Sie die Spritze über der Zielstelle und bewegen Sie die Nadel langsam an die Oberfläche der Dura und berechnen Sie die Tiefenkoordinaten.