Intrauterine Injektion von Krebszellen: Eine Technik zur Verabreichung von Krebszellen zur Etablierung eines Mausmodells für intraperitoneales Eierstockkrebs

Die intrauterine Zellinjektion ermöglicht die Abgabe von Zellen von Interesse in die Gebärmutterhöhle eines Empfängertieres. Bereiten Sie zunächst eine anästhesierte, immungeschwächte Nacktmaus in der richtigen Seitenlage vor. Machen Sie einen chirurgischen Schnitt und präparieren Sie den Bauchmuskel, um seine Bauchhöhle freizulegen.

Lokalisiere eines der Gebärmutterhörner. Diese röhrenförmigen Strukturen sind analog zu zwei unterschiedlichen Gebärmuttergängen, die sich von den Eileitern auf beiden Seiten erstrecken und in einen einzigen Gebärmutterhals münden.

Als nächstes klemmst du das vordere und hintere Ende des Horns zur Segmentierung. Injizieren Sie nun langsam die Suspension der Eierstockkrebszellen in das segmentierte Uteruslumen, um eine effiziente Abgabe der Zellen zu gewährleisten.

Anschließend wird das Gebärmutterhorn wieder in die Bauchhöhle eingeführt und der chirurgische Schnitt vernäht. Lassen Sie die Maus in einem Käfig wiederfinden.

Innerhalb weniger Tage nach der Injektion entwickeln sich an der Injektionsstelle Tumore, die metastasieren und in verschiedenen Geweben oder Organen der Bauchhöhle zu Sekundärtumoren metastasieren.

Um dieses Verfahren zu beginnen, betäuben Sie eine 7 bis 8 Wochen alte athyme Nacktmaus mit 2% Isofluran. Überprüfen Sie dann, ob es vollständig betäubt ist, indem Sie seinen Fußballen einklemmen. Legen Sie dann das Tier auf die rechte Seite auf ein steriles Mullkissen, mit dem Kopf vom Versuchsleiter weg. Tragen Sie Salbe auf beide Augen auf, um Trockenheit unter Narkose zu vermeiden.

Führen Sie anschließend den Kopf des Tieres schnell in ein Nasenkegelsystem ein, das mit einem Isofluran-Verdampfer verbunden ist. Desinfizieren Sie die rechte Seite des Bauches mit Alkoholpads, gefolgt von Jod. Legen Sie dann das sterile OP-Abdecktuch darüber. Machen Sie mit einer sterilen chirurgischen Schere und Pinzette einen 1 bis 2 Zentimeter großen Hautschnitt im unteren linken Quadranten der Maus.

Heben Sie danach den Muskel an und machen Sie einen Schnitt, um das Bauchfell zu erreichen. Präparieren Sie anschließend den schrägen Muskel, um die Bauchhöhle freizulegen. Lokalisieren Sie dann das linke Gebärmutterhorn. Mit einem sterilen Hämostaten klemmen Sie sowohl die vordere als auch die hintere Seite des Horns fest.

Platzieren Sie die vordere Klemme direkt unter dem Eileiter und die hintere Klemme direkt über dem Gebärmutterhals. Lassen Sie den zweiten Experimentator an dieser Stelle die Zellsuspension injizieren, indem er die Zellen, die die Nadel enthalten, in einem 45-Grad-Winkel senkrecht zum Horn platziert. Injizieren Sie dann langsam 50 Mikroliter Zellsuspension in das Lumen des Gebärmutterhorns. Lösen Sie als Nächstes die vordere Klemme, gefolgt von der hinteren Klemme.

Setzen Sie danach das Gebärmutterhorn wieder in die Bauchhöhle ein. Verschließen Sie das Bauchfell mit einer synthetischen, resorbierbaren Naht. Verschließen Sie dann die Haut mit einem Gewebekleber.

Wenn Sie fertig sind, nehmen Sie die Maus aus dem Nasenkonus und setzen Sie sie wieder in ihren Käfig ein. Stellen Sie sicher, dass das Tier wach und aktiv ist, bevor Sie es unbeaufsichtigt lassen. Geben Sie Ibuprofen in den ersten 48 Stunden nach der Operation in das Trinkwasser.

• Mouse Ovary – The egg-producing reproductive organ in female mice.
• Hemostat – A surgical tool used to control bleeding.
• Cell Injection – The process of inserting cells into a certain tissue or organ.
• Uterine Carcinoma – A type of cancer that affects the uterus.
• Oviducts - Tubes that link the ovaries to the uterus in female mammals.
• Uterine Horn - Part of the uterus in various animals, extending laterally to the Fallopian tubes.
• Forceps – A handheld hinged instrument used for grasping and holding objects.

• Introduce Mouse Ovary - Mouse ovaries produces eggs needed for reproduction (e.g., mouse ovary).
• Key Concepts - Summarizing principles like cell injection, and controlling bleeding (e.g., hemostat).
• Explain Underlying Mechanism - Brief overview of uterine carcinoma, a type of cancer affecting the uterus.
• Connect to Experiment - Link the background to the surgical study carried out on mice's ovary.

• What is cell injection and how is it done in mouse ovary?
• How are hemostats utilized in this surgical process?
• How does the uterine carcinoma affect mouse's reproductive system?

• Practical Applications – Mice surgeries provide vital information for human health (e.g., uterine carcinoma).
• Industry Impact - Could be useful to develop new treatments for humans (e.g., cell injection).
• Societal Importance - Aid understanding of human reproductive system (e.g., oviducts).
• Link to Scientific Advancements - Development in surgical methods and techniques for treatment (e.g., forceps).