JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 2:35 Min. • July 8th, 2025
Nehmen wir die kleine interferierende RNA oder siRNA, eine Art von RNA, die am Gen-Silencing beteiligt ist.
Fügen Sie kugelförmige Lipidvesikel hinzu, die Liposomen genannt werden.
Das Liposom kapselt die siRNA ein und schützt sie so vor dem Abbau.
Geben Sie siRNA-Liposomen-Komplexe in eine Kulturvertiefung, die neurale Stammzellen enthält. Bewahren Sie einen Brunnen als Kontrolle auf und inkubieren Sie.
Das Liposom verschmilzt mit der Zellmembran und setzt die siRNA frei.
Die siRNA bindet an den RNA-induzierten Silencing-Komplex (RISC), bei dem ein Strang entfernt wird.
Der verbleibende Strang zielt auf die mRNA ab, die für die Zelldifferenzierung verantwortlich ist, was zu deren Abbau führt.
Geben Sie ein geeignetes Differenzierungsmedium in die Vertiefungen.
In der Kontrollvertiefung fördern die Wachstumsfaktoren und andere Nährstoffe im Medium die Differenzierung von neuralen Stammzellen zu Osteoblasten.
Mit geeigneten Färbetechniken werden Osteoblasten-spezifische Marker auf den Zellen angefärbt und der Zellkern mit einem blauen Fluoreszenzfarbstoff angefärbt.
Das Fehlen von Osteoblasten-spezifischen Markern in den genstummgeschalteten Zellen deutet auf ihre Unfähigkeit zur Di
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