In vitro Aufzeichnung von Theta-Oszillationen im Hippocampus der Maus

Beginnen Sie mit einem isolierten Maus-Hippocampus in einem Aufnahme-Setup.

Senken Sie das lokale Feldpotential oder die LFP-Elektrode auf die Oberfläche des Hippocampus. Diese Elektrode kann extrazelluläre Spannungsänderungen erkennen, die auf die Aktivität neuronaler Netzwerke hinweisen.

Setzen Sie die Elektrode ein und beobachten Sie die Spannungsänderungen.

Führen Sie weiter in die untere Schicht ein und beobachten Sie die Aktivität des rhythmischen neuronalen Netzwerks, die als Theta-Oszillationen bekannt ist.

Positionieren Sie eine zweite Elektrode in einem Abstand von der ersten innerhalb derselben Schicht, um Theta-Schwingungen über einen breiteren Bereich aufzuzeichnen.

Überwachen Sie die Synchronisation von Theta-Schwingungen über beträchtliche Entfernungen. Dies zeigt die Konnektivität des neuronalen Netzwerks.

Um Theta-Oszillationen durch verschiedene Hippocampus-Schichten aufzuzeichnen, beginnen Sie damit, die zweite Elektrode in der oberen Schicht zu platzieren.

Senken Sie die Elektrode allmählich durch verschiedene Schichten ab.

Erfassen und beobachten Sie die Umkehrung des Schwingungsmusters, das die einzigartige neuronale Zusammensetzung und Funktion jeder Schicht des Hippocampus widerspiegelt.

Senken Sie bei diesem Verfahren die LFP-Elektrode auf die Oberfläche des Hippocampus ab. Schieben Sie die LFP-Elektrode durch die Pyramidenschicht und beobachten Sie die Zunahme der extrazellulären Spike-Aktivität. Es wird eine Entladung einer einzelnen Einheit aus einzelnen Neuronen nachgewiesen.

Senken Sie die Elektrode weiter ab und beachten Sie, dass die Stacheln wieder zu verblassen beginnen, wenn die Spitze in das Radiatum übergeht. Es ist zu beobachten, dass eine deutlich sichtbare Netzwerkschwingung im Theta-Frequenzbereich sichtbar wird, die mit zunehmender Absenkung des Aufnahmeortes durch das Radiatum die maximale Amplitude erreicht.

Um die räumlichen Eigenschaften spontaner Theta-Oszillationen in der CA1-Region zu testen, platzieren Sie eine zweite LFP-Elektrode an einer CA1-Stelle und beobachten Sie, wie sich die CA1-Theta-Oszillationen über große Entfernungen synchronisieren.

Um die Eigenschaften von Theta-Oszillationen über Hippocampus-Schichten zu testen, belassen Sie eine Referenzelektrode an einer CA1-Radiatumstelle. Von knapp oberhalb des Stratum oriens aus senkt man eine zweite Elektrode in die pyramidale Zellschicht und durch das Radiatum ab. Beobachten Sie eine allmähliche Inversion des LFP-Signals über die Pyramidenschicht.