JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:55 Min. • May 29th, 2025
Nehmen wir eine anästhesierte transgene Maus mit Glaukom, einer Erkrankung, die den Sehnerv schädigt und zum Verlust des Sehvermögens führt.
Die Mikroglia, residente Immunzellen in der Netzhaut des Auges, exprimieren ein Fluorophor-markiertes Protein zur Visualisierung.
Ruhende Mikroglia weisen eine verzweigte Morphologie mit verzweigten Vorsprüngen auf. Eine durch das Glaukom induzierte Nervenschädigung aktiviert Mikroglia, die eine amöboide Form mit weniger Vorsprüngen annehmen.
Platzieren Sie die Maus auf einer Ophthalmoskop-Plattform und richten Sie die Objektivlinse auf ein Auge aus.
Die Augen sind mit Kontaktlinsen bedeckt, um Trockenheit zu minimieren, und die Pupillen sind erweitert, um das Bildfeld zu erweitern.
Visualisieren Sie die Netzhaut mit Infrarotbeleuchtung, die Gewebeschäden reduziert.
Identifizieren Sie den Kopf des Sehnervs, an dem die Axone der retinalen Ganglienzellen zusammenlaufen, um den Nerv zu bilden.
Verwenden Sie retinale Blutgefäße als Orientierungspunkte, um die Brennebene zu bestimmen.
Wechseln Sie in den Fluoreszenzmodus, um die Mikroglia abzubilden, die als hell fluoreszierende Flecken erscheinen, und bewerten Sie das Vorhandensein aktivierter Mikroglia,
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