Name: Ein Modell der chronischen Nährstoff Infusion in der Ratte (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-08-14T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 18 s
Description: Erfahren Sie die chronische Nährstoffinfusion bei Ratten zur Untersuchung von Glukose- und Lipidwirkungen auf den Stoffwechsel. Dieses Modell ermöglicht kontrollierte Studien zur metabolischen Gesundheit.

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Diese Arbeit wurde von den National Institutes of Health (R01DK58096 zu Vincent Poitout) unterstützt. Vincent Poitout hält den Canada Research Chair in Diabetes und Bauchspeicheldrüsenkrebs Beta-Zell-Funktion. Bader Zarrouki erhielt Post-Doc-Stipendien von Merck und Eli Lilly. Ghislaine Fontes wurde von einem Post-Doc-Stipendium der Canadian Diabetes Association unterstützt.

Überblick: Das Verfahren besteht aus Katheterisiervorrichtung das Recht Halsschlagader und linken Halsschlagader unter Vollnarkose; ermöglicht eine 7-tägige Erholungsphase; Verbinden der Katheter an die Pumpen mit einem dreh-und Gegengewicht, das das Tier ermöglicht, sich frei zu bewegen in den Käfig; und Infusion Glucose und / oder Intralipid (a Sojaöl-Emulsion, die eine Mischung von etwa 80% erzeugt unsaturated/20% gesättigte Fettsäuren, wenn sie mit Heparin 9 infundiert) für 72 Stunden. 1. Kanülierung der rechten Vena jugularis und die linke Halsschlagader <ol><li> Sterilisieren chirurgischen Instrumenten. Kanülierung Schläuche müssen auch kalt sterilisiert unter Verwendung eines flüssigen Sterilisierungsmittel (2,6% Glutaraldehyd) vor dem Eingriff. Tauchen Sie den Schlauch in einem Autoklaven Behälter für 16-24 Std. Spülen und gründlich mit sterilem destilliertem Wasser, um alle Spuren von Glutaraldehyd vor Gebrauch zu entfernen. </li><li> Wiegen die Ratte zu berechnenMedikamentendosierungen: Carprofen 5 mg / kg: Verdünnung 1/10 = Körpergewicht (g) x 0,001 ml SC (Analgetikum) Glycopyrrolat 0,01 mg / kg: Verdünnung 1/10 = BW (g) X 0,0012 ml SC (Anticholinergika) </li><li> Anesthetize die Ratte mit Isofluran und Sauerstoff. </li><li> Legen Sie die Ratte auf den Bauch. Shave den Bereich hinter den Ohren an der Basis der Schultern. Legen Sie die Ratte auf seinem Rücken. Rasur die Region unter dem Hals bis zu den Vorderpfoten. </li><li> Prep die chirurgische Website mit Chlorhexidin, Alkohol und Jod. Verwalten Drogen. </li><li> Übertragen Sie die Ratte auf dem OP-Feld. </li><li> Unter aseptischen Bedingungen canulate das Recht Halsschlagader und die linke Halsschlagader mit einem PE-50 Kanüle an einer 1 ml Spritze mit 5 U heparinisierter Kochsalzlösung gefüllt. Spülen Sie die Kanülen mit 50 U Heparin-Kochsalzlösung zu vermeiden, während der Erholungsphase Blutgerinnung. Verwenden abgestumpft 23G Nadeln. Schließen Sie jede Kanüle mit einer 23G Nadel. </li><li> Nach der Operation, schneiden etwa 2,5 mm aus derunteren Schneidezähne und Ort der Ratte in einer Infusion Jacke um die Kanülen aus gefressen zu verhindern. </li><li> Geben Sauerstoff (1 L / min für 10 min) zu evakuieren Isofluran. </li><li> Legen Sie die Ratte in einem Käfig beheizt, bis es vollständig wach ist. </li><li> Operate vier Ratten auf einen pro Infusion Zustand verwenden (Tabelle 1). </li></ol> 2. Postoperative Pflege (Post-chirurgischen Behandlung und Anschluss der Katheter) <ol><li> Wiegen Sie die Ratten an Tag 1 und Tag 2 nach der Operation. </li><li> Verwalten Glycopyrrolat (BW (g) x 0,00048 ml) SC zweimal am Tag 1 nach der Operation und einmal am Tag 2 nach der Operation. </li><li> Zusätzliche unterstützende Behandlungen verabreicht, wenn nötig: Flüssigkeiten, Heizkissen, nass Ernährung, Sauerstoff-Therapie, Analgetika, Anticholinergika. </li><li> Am 7. Tag nach der Operation, wiegen die Ratten, die Flussraten für Infusion berechnen. </li><li> Schließen Sie jede Ratte eine Infusion System mit einem Haltegurt und schwenkbar auf einem Käfig Grill oben (Abbildung 1) montiert.</li><li> Spülen Sie die Kanülen mit 5 U heparinisierter Kochsalzlösung, um Gerinnsel zu entfernen. Spülen Sie die Kanülen noch einmal mit 50 U Heparin-Kochsalzlösung zu verhindern Blutgerinnung. </li><li> Lassen Sie die Ratten an die Leine gewöhnen und schwenken für mindestens 24 Stunden vor Beginn der Infusion. </li></ol> 3. Aufguss <ol><li> Unentschieden 0,15 ml Blut aus der Halsschlagader jeder Ratte und messen Blutzucker. Spülen Sie die Vena Kanülen. Mit 50 U Heparin-Kochsalzlösung Gerinnung in beiden Kanülen jeder Ratte zu verhindern. </li><li> Bringen der Blutprobe mit einem 0,5 ml Röhrchen mit 2% EDTA. Zentrifuge bei 10.000 rpm für 2 min und frieren das Plasma bei -20 ° C. </li><li> Füllen Sie zwei 60 ml Spritzen für jede der Infusion nachfolgend aufgeführten Bedingungen. Platz 1 Spritze auf der vorderen Position der Pumpe und Spritze Platz 2 auf der Rückseite Position der Pumpe. </li><li> Registriert jedes Paar von Lösungen zusammen mit y-Anschlüsse und CO-EX T22 Schläuche, die sterilisiert worden. Legen Sie die Spritzen auf einem Harvard 33Dual Spritzenpumpe. </li><li> Ändern Sie den Käfig unten und entfernen Sie alle Lebensmittel aus dem Käfig Grill oben. </li><li> Wiegen Sie 150 g Standard-Chow und auf den Käfig Grill oben. </li><li> Verbinden Sie die Spritzen an der Schwenk auf den Käfig Grill. Spülen Sie die Spritze richtig, um eingeschlossene Luft aus den Leitungen zu entfernen. </li><li> Berechnen Sie die Infusion Flussraten mit dem Körpergewicht, die Sie vor dem Anschließen die Ratte auf die Infusion System gemacht. Die Preise sind mit einer Microsoft Excel-Datei, die Glucoseinfusionsrate (GIR) in ml / h wandelt berechnet. </li><li> Stellen Sie die Pumpe auf Flussraten für 60 ml Spritzen verabreichen nach den Angaben des Herstellers Einstellungen. Geben Sie den Preis für 1 Spritze (vorne Spritze) und die Rate für Spritze 2 (zurück Spritze). </li><li> Starten Sie die Pumpe. </li></ol> 4. Überwachung <ol><li> Nach dem Starten der Pumpe zu überprüfen, dass es keine undichten aus der Schwenk-oder aus den Kanülen und Infusion Schläuche nicht verdreht ist. Überprüfen Sie auch, dass es keine Luftblasen inder Schlauch. </li><li> Nach 3 Stunden nach der Infusion, eine Blutprobe nehmen, um den Blutzucker zu überwachen. Wiederholung nach 6, 24, 48 und 72 Stunden nach der Infusion. Als Vorsichtsmaßnahme wird glycemia auch nach 30, 34, 54 und 60 h der Infusion überwacht. Blutzucker messen mit einem Tropfen Vollblut unter Verwendung eines tragbaren Glukosemonitor werden. Dies begrenzt die Menge des Blutes während der Infusion entnommen und vermeidet daher wesentlich zu verändern Blutvolumen und / oder Hämatokrit. </li><li> Die Rate für Spritze 1 basiert auf Blutzucker-Werte geändert, um den Blutzucker bei 220-250 mg / dl zu halten. Die Rate für Spritze 2 nicht während der 72 Stunden nach der Infusion zu ändern, weil freie Fettsäuren bei 1 mmol / L. gehalten werden </li><li> Infusion Bedingungen gekoppelt sind, so dass das Volumen für die Kontrolltiere erhielten entspricht dem Volumen der Versuchstiere (Tabelle 1) empfangen wird. </li><li> Nach 24 Stunden nach der Infusion, ändern Sie den Käfig unten und wiegen das Essen noch im Käfig Grill. Bringen Sie das Teil uneaten to den Käfig Grill. Wiederholen Sie nach 48 Stunden. </li><li> Refill Spritzen täglich während der 72 Stunden nach der Infusion benötigt. </li><li> Während der Infusion, beachten Sie immer die Ratte auf Anzeichen von Entzündungen oder Beschwerden. Verwalten entsprechender Pflege, wenn nötig. </li></ol> 5. Post-Infusion Sterbehilfe <ol><li class="jove_content"> Nach 72 Stunden der Infusion sind narkotisierten Ratten intravenös mit 0,5 ml einer Ketamin / Xylazin-Cocktail (182 mg / kg Ketamin und 11,6 mg / kg Xylazin 1:2 verdünnt mit 0,9% NaCl). </li><li class="jove_content"> Die Zehen-Pinch-Reflex verwendet, um das Niveau der Anästhesie zu überprüfen. Weitere Betäubungsmittel verabreicht wird, wie gebraucht. </li><li class="jove_content"> Wenn die Ratten anästhesiert, wird die Bauchhöhle mit einer chirurgischen Schere geöffnet. Die Ratte wird durch Ziehen 10-15 ml Blut in einer Spritze aus der Aorta oder der Vena Cava ausgeblutet. </li></ol>

<ol><li>Poitout, V., Robertson, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucolipotoxicity%3A+fuel+excess+and+beta-cell+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Endocr.+Rev%22%5BJournal%5D)">Glucolipotoxicity: fuel excess and beta-cell dysfunction.</a> Endocr. Rev. 29, 351-366 (2008).</li>
<li>Poitout, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucolipotoxicity+of+the+pancreatic+beta+cell%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim.+Biophys.+Acta%22%5BJournal%5D)">Glucolipotoxicity of the pancreatic beta cell.</a> Biochim. Biophys. Acta. 1801, 289-298 (2010).</li>
<li>Unger, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minireview%3A+weapons+of+lean+body+mass+destruction%3A+the+role+of+ectopic+lipids+in+the+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Minireview: weapons of lean body mass destruction: the role of ectopic lipids in the metabolic syndrome.</a> Endocrinology. 144, 5159-5165 (2003).</li>
<li>Harmon, J. S., Gleason, C. E., Tanaka, Y., Poitout, V., Robertson, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antecedent+hyperglycemia%2C+not+hyperlipidemia%2C+is+associated+with+increased+islet+triacylglycerol+content+and+decreased+insulin+gene+mRNA+level+in+Zucker+diabetic+fatty+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Antecedent hyperglycemia, not hyperlipidemia, is associated with increased islet triacylglycerol content and decreased insulin gene mRNA level in Zucker diabetic fatty rats.</a> Diabetes. 50, 2481-2486 (2001).</li>
<li>Bachar, E., Ariav, Y., Cerasi, E., Kaiser, N., Leibowitz, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+nitric+oxide+synthase+protects+the+pancreatic+beta+cell+from+glucolipotoxicity-induced+endoplasmic+reticulum+stress+and+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Neuronal nitric oxide synthase protects the pancreatic beta cell from glucolipotoxicity-induced endoplasmic reticulum stress and apoptosis.</a> Diabetologia. 53, 2177-2187 (2010).</li>
<li>Peyot, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beta-cell+failure+in+diet-induced+obese+mice+stratified+according+to+body+weight+gain%3A+secretory+dysfunction+and+altered+islet+lipid+metabolism+without+steatosis+or+reduced+beta-cell+mass%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Beta-cell failure in diet-induced obese mice stratified according to body weight gain: secretory dysfunction and altered islet lipid metabolism without steatosis or reduced beta-cell mass.</a> Diabetes. 59, 2178-2187 (2010).</li>
<li>Hagman, D. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclical+and+alternating+infusions+of+glucose+and+intralipid+in+rats+inhibit+insulin+gene+expression+and+Pdx-1+binding+in+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Cyclical and alternating infusions of glucose and intralipid in rats inhibit insulin gene expression and Pdx-1 binding in islets.</a> Diabetes. 57, 424-431 (2008).</li>
<li>Fontes, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucolipotoxicity+age-dependently+impairs+beta+cell+function+in+rats+despite+a+marked+increase+in+beta+cell+mass%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Glucolipotoxicity age-dependently impairs beta cell function in rats despite a marked increase in beta cell mass.</a> Diabetologia. 53, 2369-2379 (2010).</li>
<li>Stein, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essentiality+of+circulating+fatty+acids+for+glucose-stimulated+insulin+secretion+in+the+fasted+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Essentiality of circulating fatty acids for glucose-stimulated insulin secretion in the fasted rat.</a> J. Clin. Invest. 97, 2728-2735 (1996).</li>
<li>Leahy, J. L., Cooper, H. E., Weir, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+insulin+secretion+associated+with+near+normoglycemia.+Study+in+normal+rats+with+96-h+in+vivo+glucose+infusions%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Impaired insulin secretion associated with near normoglycemia. Study in normal rats with 96-h in vivo glucose infusions.</a> Diabetes. 36, 459-464 (1987).</li>
<li>Hager, S. R., Jochen, A. L., Kalkhoff, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+resistance+in+normal+rats+infused+with+glucose+for+72+h%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Insulin resistance in normal rats infused with glucose for 72 h.</a> The American Journal of Physiology. 260, 353-362 (1991).</li>
<li>Laybutt, D. R., Chisholm, D. J., Kraegen, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+adaptations+in+muscle+and+adipose+tissue+in+response+to+chronic+systemic+glucose+oversupply+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Specific adaptations in muscle and adipose tissue in response to chronic systemic glucose oversupply in rats.</a> The American Journal of Physiology. 273, E1-E9 (1997).</li>
<li>Jonas, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+glucose+stimulates+early+response+gene+c-Myc+expression+in+rat+pancreatic+beta+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">High glucose stimulates early response gene c-Myc expression in rat pancreatic beta cells.</a> The Journal of Biological Chemistry. 276, 35375-35381 (2001).</li>
<li>Tang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose-induced+beta+cell+dysfunction+in+vivo+in+rats%3A+link+between+oxidative+stress+and+endoplasmic+reticulum+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Glucose-induced beta cell dysfunction in vivo in rats: link between oxidative stress and endoplasmic reticulum stress.</a> Diabetologia. 55, 1366-1379 (2012).</li>
<li>Alonso, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose+infusion+in+mice%3A+a+new+model+to+induce+beta-cell+replication%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Glucose infusion in mice: a new model to induce beta-cell replication.</a> Diabetes. 56, 1792-1801 (2007).</li>
<li>Magnan, C., Gilbert, M., Kahn, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+free+fatty+acid+infusion+in+rats+results+in+insulin+resistance+but+no+alteration+in+insulin-responsive+glucose+transporter+levels+in+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Lipids%22%5BJournal%5D)">Chronic free fatty acid infusion in rats results in insulin resistance but no alteration in insulin-responsive glucose transporter levels in skeletal muscle.</a> Lipids. 31, 1141-1149 (1996).</li>
<li>Goh, T. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid-induced+beta-cell+dysfunction+in+vivo+in+models+of+progressive+beta-cell+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">Lipid-induced beta-cell dysfunction in vivo in models of progressive beta-cell failure.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 292, 549-560 (2007).</li>
<li>Pascoe, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Free+fatty+acids+block+glucose-induced+beta-cell+proliferation+in+mice+by+inducing+cell+cycle+inhibitors+p16+and+p18%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Free fatty acids block glucose-induced beta-cell proliferation in mice by inducing cell cycle inhibitors p16 and p18.</a> Diabetes. 61, 632-641 (2012).</li>
<li>Bell, C. G., Walley, A. J., Froguel, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genetics+of+human+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Genetics%22%5BJournal%5D)">The genetics of human obesity.</a> Nature Reviews. Genetics. 6, 221-234 (2005).</li>
<li>Fontes, G., Hagman, D. K., Latour, M. G., Semache, M., Poitout, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+preservation+of+insulin+gene+expression+by+a+glucagon-like+peptide+1+agonist+or+a+dipeptidyl+peptidase+4+inhibitor+in+an+in+vivo+model+of+glucolipotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Res.+Clin.+Pract%22%5BJournal%5D)">Lack of preservation of insulin gene expression by a glucagon-like peptide 1 agonist or a dipeptidyl peptidase 4 inhibitor in an in vivo model of glucolipotoxicity.</a> Diabetes Res. Clin. Pract. 87, 322-328 (2010).</li>
<li>Crawford, P. A., Schaffer, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+stress+in+the+myocardium%3A+Adaptations+of+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+and+Cellular+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Metabolic stress in the myocardium: Adaptations of gene expression.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. , (2012).</li>
<li>Kewalramani, G., Bilan, P. J., Klip, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+insulin+resistance%3A+assault+by+lipids%2C+cytokines+and+local+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Clin.+Nutr.+Metab+Care%22%5BJournal%5D)">Muscle insulin resistance: assault by lipids, cytokines and local macrophages.</a> Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab Care. 13, 382-390 (2010).</li>
<li>Cusi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+obesity+and+lipotoxicity+in+the+development+of+nonalcoholic+steatohepatitis%3A+pathophysiology+and+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Role of obesity and lipotoxicity in the development of nonalcoholic steatohepatitis: pathophysiology and clinical implications.</a> Gastroenterology. 142, 711-725 (2012).</li>
</ol>

Vincent Poitout ist Mitbegründer und erhielt Forschungsaufträge aus Bêtagenex Inc., eine vertragliche Forschungsorganisation, die die Infusion-Modell in diesem Artikel als kommerzielle Dienstleistung vorgestellt bietet.

Obwohl eine Reihe von früheren Studien chronische Infusion von Glukose (z. B. 10-15) oder Lipide (zB 16,17) bei Nagetieren, um unser Wissen beschäftigt haben die kombinierte Infusion von beiden Kraftstoffen nur bei Mäusen 18 gemeldet. Die chronische Infusion hier vorgestellte Modell bietet mehrere Vorteile, um die Auswirkungen auf die Nährstoff-Überschuss auf einer Vielzahl von biologischen Funktionen in Ratten untersucht werden. Erstens, es werden aber keine genetisch ...

, Chronisch erhöhte Spiegel von Glucose und Lipide im Kreislauf vorgeschlagen worden sind, um zu der Pathogenese von Typ 2 Diabetes durch Veränderung der Funktion verschiedener Organe bei der Aufrechterhaltung der Homöostase einschließlich Glucose gebracht beitragen, aber nicht beschränkt auf, bewertet die pankreatischen beta-Zellen ( in 1). Die Glukotoxizität Hypothese postuliert, dass chronische Hyperglykämie die Beta-Zell-Defekt, die zu Hyperglykämie gab in den ersten Platz, wodurch ein Teufelskreis und einen Beitrag zu einer Verschlechterung der Blutzuckereinstellung bei Typ-2-Diabetes-Patienten verschlimmert. Ebenso schlägt die glucolipotoxicity Hypothese, dass die gleichzeitige Erhebungen von Glucose-und Lipid-Ebenen, wie es oft bei Typ-2-Diabetes beobachtet, nachteilig auf die Beta-Zellen sind. Die Entschlüsselung der zellulären und molekularen Mechanismen der schädlichen Wirkungen von Nährstoffen auf chronisch erhöhten Pankreas-Beta-Zell-Funktion ist der Schlüssel zum understanding der Pathogenese von Typ 2 Diabetes 1. Zu diesem Zweck wurde eine Vielzahl von Untersuchungen, die Mechanismen der chronischen Nährstoff überschüssige ex vivo in isolierten Langerhans-Inseln oder in vitro in klonalen, Insulin-sezernierenden Zelllinien untersucht. Allerdings ist die Übersetzung der Erkenntnisse in diesen Modellsystemen auf den gesamten Organismus erhalten komplex, insbesondere weil die Konzentrationen von Fettsäuren in kultivierten Zellen oder Inselzellen verwendet selten passen die zirkulierenden Spiegel in der Nähe der Beta-Zellen in vivo 2. Auf der anderen Seite haben die Mechanismen der Beta-Zell-Versagen in Reaktion auf einen Nährstoffmangel Überschuss in Tiermodellen von Diabetes untersucht worden, wie der Zucker Diabetic Fatty Ratte 3,4, die Wüstenrennmaus Psammomys obesus 5 und die fettreiche Ernährung beispielhaft fed Maus 6. Diese Modelle lassen sich jedoch durch intrinsische Stoffwechselstörungen aus und sind nicht leicht zugänglich Manipulationen des Blutzuckersund / oder Lipid-Ebenen in einer kontrollierten und weniger chronische Einstellung. Um der Lage sein, zu ändern zirkulierenden Nährstoffgehalt in einem Zeitrahmen von Tagen in sonst normalen Tieren haben wir eine chronische Infusion Modell in normalen Ratten, die uns um die Auswirkungen von Lipiden und Glukose untersuchen, allein oder in Kombination ermöglicht entwickelt, auf die physiologischen Parameter und Funktion 7,8.

<table><tbody><tr><td>Kochsalzlösung 0,9 %</td><td>BD</td><td>JB1324</td><td></td></tr><tr><td>Dextrose 70 %,</td> <td>McKesson</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Intralipid 20 %,</td> <td>Fresenius Kabi</td><td>JB6023</td><td></td></tr><tr><td>Metricide (Glutaraldehyd 2,6 %)</td><td>Metrex</td><td>11-1401</td><td></td></tr><tr><td>Heparin-Natrium 10.000 USP u/ml</td><td>PPC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Carprofen</td><td>Metacam</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glycopyrrolat</td><td>Sandoz</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Abbott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Chlohexidin 2%</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Alkohol 70%</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Jod</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PE-50</td><td>BD</td><td>427411</td><td></td></tr><tr><td>CO-EX T22</td><td>Instech Solomon</td><td>BCOEX-T22</td><td></td></tr><tr><td>Steckverbinder 22G</td><td>Instech Solomon</td><td>SC22/15</td><td></td></tr><tr><td>Drehgelenk 22G</td><td>Instech Solomon</td><td>375/22PS</td><td></td></tr><tr><td>Y-Verbinder 22G</td><td>Instech Solomon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gegengewicht und Arm</td><td>Instech Solomon</td><td>CM375BP</td><td></td></tr><tr><td>23 G stumpfe Nadeln</td><td>Instech Solomon</td><td>LS23</td><td></td></tr><tr><td>23 G Kanülierstifte</td><td>Instech Solomon</td><td>SP23/12</td><td></td></tr><tr><td>Tethers (12 Zoll)</td><td>Lomir</td><td>RT12D</td><td></td></tr><tr><td>Infusionsmäntel </td><td>Lomir</td><td>RJ01, RJ02, RJ03, RJ04</td><td></td></tr><tr><td>(SM-XL)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tether Befestigungsstück</td><td>Lomir</td><td>RS T1</td><td></td></tr><tr><td>60 ml Spritze</td><td>BD</td><td>309653</td><td></td></tr><tr><td>1 ml Spritze</td><td>BD</td><td>309602</td><td></td></tr></tbody></table>

ein modell der chronischen nährstoff infusion in der ratte

A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat

Die chronische Exposition gegenüber übermäßiger Mengen an Nährstoffen wird postuliert, dass die Funktion mehrerer Organe und Gewebe zu beeinträchtigen und den für die Entwicklung der vielen Komplikationen, die mit Adipositas und des metabolischen Syndroms, einschließlich Diabetes Typ 2 beitragen. Um die Mechanismen, durch die hohe Konzentrationen von Glukose und Fettsäuren auf die Pankreas-beta-Zellen und die Sekretion von Insulin zu untersuchen, haben wir eine chronische Infusion von Nährstoffen in der Ratte etabliert. Das Verfahren besteht aus Katheterisierung der rechten Jugularvene und die linke Halsschlagader unter Vollnarkose, so dass eine 7-tägige Erholungsphase; Verbinden der Katheter an die Pumpen mit einer Lenk-und Gegengewicht, das den Tieren erlaubt, sich frei in den Käfig und Infusion Glukose und / oder Intralipid (a Sojaöl-Emulsion, die eine Mischung von etwa 80% unsaturated/20% gesättigte Fettsäuren erzeugt, wenn mit Heparin infundiert) für 72 Stunden. Dieses Modell bietet mehrere advantages, einschließlich der Möglichkeit, fein modulieren die Zielwerte der zirkulierenden Glukose und Fettsäuren; die Möglichkeit, zusammen mit diesen infundiert pharmakologischen Verbindungen und der relativ kurzen Zeitrahmen, um diätetische Modelle gegenüber. Es kann verwendet werden, um die Mechanismen der Nährstoff Dysfunktion bei verschiedenen Organe zu untersuchen und um die Wirksamkeit von Wirkstoffen in diesem Zusammenhang zu testen.

Aus einer Serie von 42 Ratten, die operiert wurden 5 Ratten während der postoperativen Phase verloren und 1 Ratte wurde während der Infusion verloren, was einer Erfolgsquote von 86%. Das durchschnittliche Körpergewicht der 37 Ratten, die schließlich infundiert wurden war 608 ± 5 g vor der Operation und 588 ± 6 g zu Beginn der Infusion (Mittelwert ± SE, n = 37, p &lt;0,0001 durch gepaarte t-Test). . Folgende repräsentative Ergebnisse wurden in 2 Gruppen Infusion erhalten: Saline (SAL) und Glucose + Intralipid (GLU + IL) ...

Ein Protokoll für chronische Infusion von Glukose und Intralipid in Ratten beschrieben. Dieses Modell kann verwendet werden, um die Auswirkungen der Nährstoff Überschuß auf Organfunktion und physiologischen Parametern zu untersuchen.

Ein Modell der chronischen Nährstoff Infusion in der Ratte

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to  affect the function of several organs and tissues and to contribute to the  ...

Das allgemeine Ziel dieses Verfahrens besteht darin, die Vena jugularis und die Arteria carotis von Ratten zu katheterisieren, um Glukose und Lipide zu infundieren und damit ein Modell für chronischen Nährstoffüberschuss zu schaffen. Dies wird erreicht, indem zunächst unter Vollnarkose die Vena jugularis und die Arteria carotis katheterisiert werden. Nach dem Eingriff erhält die Ratte sechs Tage zur Erholung.Dann werden die Katheter über eine Leitung und ein Drehstück, die an der Käfigoberseite befestigt sind, mit Infusionspumpen verbunden. Schließlich wird die Ratte mit Glukose- und Lipidlösungen infundiert. Letztendlich können Ergebnisse erhalten werden, die die Auswirkungen eines chronischen Nährstoffüberschusses auf die Glukosehomöostase zeigen.Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber anderen Modellen, beispielsweise genetischen Modellen, besteht darin, dass man die frühen Veränderungen der Betazellfunktion als Reaktion auf einen Nährstoffüberschuss untersuchen kann. Ein weiterer Vorteil ist die Möglichkeit, die Konzentrationen von Glukose und Intralipid beziehungsweise Lipiden im Blutkreislauf gezielt zu modulieren. Derzeit verwenden wir diese Technik, um Veränderungen der Be

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Dieses Video zeigt die intraduodenale Kanülierung in einem Rattenmodell. Nach der Betäubung der Ratte wird der Zwölffingerdarm lokalisiert und eine kleine Punktion erstellt. Eine J-förmige Kanüle mit abgeschrägter Spitze wird vorsichtig eingeführt und gesichert und der Schnitt verschlossen. Das kanülierte Rattenmodell ermöglicht die intraintestinale Infusion für immunpathologische Studien.

Intraduodenale Kanülierung in einem Rattenmodell für immunpathologische Studien

Ein zweistufiges Verfahren zur chronischen Niereninsuffizienz (CNI) in der Lewis-Ratte etablieren durch chirurgisches Entfernen 5/6th der renalen Masse beschrieben. Kombination des chirurgischen Eingriffs, führt NOS-Hemmung und ein High-Salz-Diät zu einem Modell ähnlich menschlichen CKD, sodass Studie von kausalen Mechanismen und Entwicklung neuartiger therapeutischer Interventionen.

5/6th Nephrektomie in Kombination mit hohen Salz-Diät-und Stickstoffmonoxid-Synthase-Hemmung zu Chronic Kidney Disease in der Lewis-Ratte induzieren

Dieses Protokoll beschreibt ein zentral katheterisiertes Mausmodell für anhaltende kritische Erkrankungen. Wir kombinieren die Zäkalligatur und die Punktionsmethode zur Induktion einer Sepsis mit der Verwendung eines zentralen Venenzugangs für die Verabreichung von Flüssigkeiten, Medikamenten und Nährstoffen, um das klinische Umfeld des Menschen nachzuahmen.

Die Verwendung eines zentralen Venenkatheter für Flüssigkeiten, Drugs und Nährstoffverwaltung in einem Maus-Modell der Critical Illness

Dieses Protokoll beschreibt die Verwendung einer sehr schmackhaften Cafeteria-Diät im westlichen Stil, um Überernährung und Adipositas bei Nagetieren zu modellieren. Hier bieten wir einen detaillierten Überblick über die Lebensmittelauswahl, -zubereitung und -messung und erläutern methodische Faktoren, die zur Erzeugung eines robusten und reproduzierbaren Phänotyps beitragen.

Palatable Western-Stil Cafeteria Diät als zuverlässige Methode zur Modellierung Diät-induzierte Adipositas bei Nagetieren

Der Zugang zur Langzeitinfusion in der oberen Mesenterialarterie (SMA) von Ratten ist ein chirurgischer Eingriff, der aus der Kanülierung eines proximalen Astes der SMA besteht. Die Kanüle tritt aus der Bauchwunde aus und wird durch den subkutanen Raum zurück zur interskapulären Falte getunnelt.

Den Dünndarm der Ratte ins Visier nehmen: Langzeitinfusion in die Arteria mesenterica superior

Chronische Pankreatitis (CP) ist eine Krankheit, die durch Entzündungen und Fibrose der Bauchspeicheldrüse gekennzeichnet ist, die oft mit hartnäckigen Bauchschmerzen verbunden sind. Dieser Artikel konzentriert sich auf die Verfeinerung der Technik, um ein Mausmodell von CP durch Gallengangsinfusion mit 2,4,6-Trinitrobenzolsulfonsäure (TNBS) zu erzeugen.

Ein Mausmodell für chronische Pankreatitis mittels Gallengangs-TNBS-Infusion

In dieser Arbeit werden die morphometrischen Reaktionen und Trainingsleistungsergebnisse eines HIIT-Protokolls (High-Intensity Interval Training) in einem Sprague-Dawley-Rattenmodell für ernährungsinduzierte Adipositas vorgestellt. Der Zweck dieses Protokolls war es, die Trainingsintensität zu maximieren und die physiologischen Reaktionen auf HIIT bei schlanken und fettleibigen Ratten zu bestimmen.

Ein chronisches hochintensives Intervalltraining und ein ernährungsbedingtes Adipositas-Modell zur Maximierung der Trainingsanstrengung und zur Induktion physiologischer Veränderungen bei Ratten

Dieses Protokoll beschreibt ein Ratten-basiertes Darmtransplantationsmodell mit Ileostomie zur zeitlichen Beurteilung der medikamentösen Intervention bei der Abstoßung von Transplantaten.

Ein Modell zur Abstoßung von Rattentransplantaten bei der Darmtransplantation mit exteriorisierter Ileostomie zur Beurteilung der Längsschnittprognose

Diese Studie bietet eine reproduzierbare und standardisierte Methode, um adipöse Rattenmodelle zu etablieren, die eine einfache Adipositas aufweisen, die häufig durch eine fettige Bauchspeicheldrüse gekennzeichnet ist. Es enthält auch detaillierte Protokolle für die Probenahme von Pankreasgewebe und die Immunhistochemie.

Entwicklung und Validierung einer Methodik zur Etablierung von adipösen Rattenmodellen mit typischer Fettbauchspeicheldrüse

Dieser Artikel präsentiert ein ischämisches CKD-Modell unter Verwendung einer einseitigen nierenen IRI mit kontralateraler Nephrektomie, die einen Tag vor der Probenentnahme durchgeführt wird; dieses Protokoll ermöglicht eine serumbasierte funktionelle Beurteilung, ein hohes Überleben und reproduzierbare CKD-Pathologie nach 28 und 42 Tagen und bietet eine vielseitige Plattform für mechanistische und interventionelle Studien.

Mausmodell des Übergangs von akuter zu chronischer Nierenerkrankung, induziert durch Nierenischämie/Reperfusionsverletzung

Erfahren Sie die chronische Nährstoffinfusion bei Ratten zur Untersuchung von Glukose- und Lipidwirkungen auf den Stoffwechsel. Dieses Modell ermöglicht kontrollierte Studien zur metabolischen Gesundheit.

Ein Modell der chronischen Nährstoff Infusion in der Ratte

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