Digestiones enzimáticas restricción

Enzimas de restricción o endonucleasas reconocen y cortan el ADN en una secuencia específica. Estas enzimas se producen naturalmente en bacterias como una defensa contra bacteriófagos – virus que infectan bacterias. Bacteriano enzimas de restricción cortan el DNA de bacteriófagos invasores dejando el ADN genómico bacteriano ileso debido a la adición de grupos metilo.

Este video explica los principios básicos de las enzimas de restricción incluyendo: cómo se nombran las enzimas de restricción y los tipos de sitios de reconocimiento y proyecciones que existen. También es un procedimiento generalizado paso a paso de cómo configurar un repertorio de restricción incluyendo los componentes necesarios, el orden en el que la mezcla debe ser montada, y la temperatura de incubación típico y tiempo. Se menciona la importancia de enzimas inactivadoras de restricción para evitar que la actividad estrella. También se ofrecen consejos para realizar resúmenes de enzimas múltiples y uso de controles en las reacciones de la digestión.