Name: Eine einfache Vorrichtung, um schnell vorbereiten Whole Mounts des Mausdarm (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-10-27T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 49 s
Description: Lernen Sie eine einfache Methode zur schnellen Präparation von Whole Mounts des Mäusedarms. Diese Technik ermöglicht histologische und immunhistochemische Analysen zur Charakterisierung intestinaler Tumorgenese.

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Die Entwicklung des Geräts begann mit einem etwas anderen Schnittprototyp, der im Mausclub des Imperial Cancer Research Fund (ICRF) von Bass Hassan demonstriert wurde, danach gab es mehrere Diskussionen mit Rob Rudling und Nikki Mandir in der Containment-Einrichtung in der ICRF Clare Hall. Jo Kitau von der mechanischen Werkstatt am ICRF konstruierte die ersten Versionen und Andy Lucas entwarf und perfektionierte das endgültige Modell in der CRUK-Werkstatt in Oxford.

Die verschiedenen experimentellen Verfahren und die humane Sterbehilfe werden von der gastgebenden Einrichtungen Ethikkommission und von den zuständigen Aufsichtsbehörden genehmigt. Sterbehilfe ist in der Regel unter Verwendung von CO 2 Ersticken durch Genickbruch folgte erreicht. 1. Vorrichtung <ol><li> Maschine der Hauptteil des Bodens der Vorrichtung von aus einem festen Block aus hochdichtem Acetyl-Harz, wie in diesem Manuskript beschrieben. An jedem Ende zu erstellen 3 mm hoch erhöhten Streifen, und ein Teil Maschine aus diesen 2,5 mm Haine, um die Stangen zu nehmen (siehe Abbildung 2 und Abbildung 3). </li><li> Machen Stangen aus einem 2,4 mm Durchmesser aus Edelstahl mit abgerundeten Enden. HINWEIS: Der Hauptrahmen des Deckels wurde aus Duralumin Platte gefräst. Eine begrenzte Anzahl von fertigen Vorrichtungen sind von Dr. Goodlad erhältlich. </li></ol> 2. Verwendung des Geräts <ol><li> Sezieren den Dünndarm und Dickdarm aus der Bauchhöhle mit einer Schereund behandschuhten Fingern. Entfernen Sie das Mesenterium, indem Sie sie mit einer gebogenen Pinzette und leichtes Ziehen sie weg aus dem Darm. </li><li> Spülen Sie den Darm mit kalter phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS, pH 7,4) mit einer Pipettenspitze Gilson-Typ, der sich an seinem breiteren Ende geschnitten worden war, so dass er auf ein 10 oder 20 ml Luer-Fitting-Kunststoffspritze passen. </li><li> Legen Sie den Dünndarm (SB) auf einem Blatt Papier Handtuch und teilen sich in drei gleiche Abschnitte in der Länge (proximalen, mittleren und distalen - SB1, SB2 und SB3) mit einer Schere. Entfernen Sie den Blinddarm und legen Sie den Doppelpunkt. </li><li> Machen Sie mehrere sehr kleine Schnitte in das Darmsegmente mit einer Schere, damit die Flüssigkeit entweichen und legen Sie ein Blatt Papier Handtuch über den Darm und sanft laufen mit dem Finger über die Vorbereitungen zu verdrängen die Flüssigkeit und trocken tupfen. </li><li> Heben Sie die Abschnitte und legen Sie die Edelstahlstäbe, die zuvor durch Eintauchen in ein Becherglas mit phosphatgepufferter Kochsalzlösung benetzt wurden. HINWEIS: Der Darm kann sein,umgewandelt, wenn dies gewünscht (innen nach außen gedreht). </li><li> Beschriften Sie ein Stück Karton oder Filterpapier auf Maß geschnitten, um in die Basis des Geräts passen. Bleistift ist am besten, da sie unbeeinflusst von nahezu allen Lösungen ist. Autopsy Datum, experimentellen Code und Tieridentifikationsnummer vorgeschlagen. </li><li> Legen Sie die Karte oder Filterpapier in die Basis des Geräts. Setzen Sie die Stangen und Darm in die Schlitze in der Basis des Gerätes. Sicherzustellen, dass das proximale Ende der Segmente in einer standardisierten Weise positioniert. Die proximalen Enden sollten in der Nähe der Karte Etiketten sein. </li><li> Legen Sie das Oberteil des Gerätes über die Basis. Mit den abgewinkelten Bars, ein Skalpell zu führen, um die Abschnitte längs geschnitten. HINWEIS: Es ist hilfreich, wenn das Gewebe vorsichtig und mit einem Finger gehalten werden, um sicherzustellen, dass sie nicht mit dem Messer zu bewegen. </li><li> Entfernen Sie das Oberteil des Gerätes. Das Filterpapier und Gewebe vorsichtig entfernen (immer noch auf ihre Stäbe). HINWEIS: Ein Stück steifen Karte unter dem fil platziertter Papier Hebehilfe. </li><li> Leicht feucht (mit einer behandschuhten Fingerspitze in PBS getaucht) der Segmente. Rollen Sie die Stange, von Seite zu Seite zu öffnen, die gut und breitete sie flach. Das Gewebe wird dann auf das Filterpapier haftet. </li><li> Visuell untersuchen die Vorbereitungen für alle makroskopischen Veränderungen. </li><li> Übertragen des Gewebes auf das Filterpapier haftet in eine flache Wanne (oder Sandwichbox) enthaltenden Fixiermittels. HINWEIS: Nachdem das Gewebe hält sich an das Filterpapier oder auf die Karte wird es bleiben, fest angebracht. Eine Vielzahl von Fixierungsmitteln kann verwendet werden, um die Herstellung zu bewahren. Es wird empfohlen, Carnoy-Flüssigkeit sollte für die Untersuchung von Darmzellwucherungen 6, die die ideale Fixierung für den besten Zellproliferation Verfahren verwendet wird; jedoch Formalin oder viele andere Fixierungsmittel verwendet werden, wenn andere Endpunkte erforderlich sind. </li><li> Nach der Fixierung (in der Regel 3 h), übertragen Sie die Präparate in 70% Ethanol. Die Proben können dann gelagert, bis sie benötigt werden. Die Vorbereitungen cen face eine untersucht und / oder für die Herstellung von histologischen Proben für H &amp; E oder andere histologische Färbetechniken Immunhistochemie und / oder in situ-Hybridisierung verwendet werden. HINWEIS: Längerer Fixierung kann immunhistochemische Reaktivität und / oder in situ Hybridisierung Reaktivität zu reduzieren. Polypropylen-Sandwich-Boxen sind ideal für die Speicherung einer großen Anzahl der Zubereitungen. </li><li> Bei Bedarf die fixierten Gewebe aus den verschiedenen Darmabschnitten kann in &quot;Rouladen&quot; gemacht und mit dem gesamten Bereich der histologischen Methoden 6 einschließlich der oben beschriebenen gefärbt werden. Um einen &quot;Swiss roll&quot; machen die Darmsegmente werden aus dem Filterpapier gerollt um einen Cocktail-Stick oder einem Zahnstocher, mit einer entomologischen Stift gesichert und für Wachs Einbetten 6 verarbeitet entfernt. </li><li> Falls erforderlich, beflecken den Großgewebe mit Methylenblau zu abweichenden Kryptenherden 7 visualisieren. </li><li> Note die festen Zubereitungen, die aufFreizeit. </li></ol>

<ol><li>Goodlad, R. A. Cancer Handbook. Alison, M. R. , John Wiley and Sons, Ltd. 243-262 (2007).</li>
<li>Ward, J. M., Treuting, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+intestinal+epithelial+carcinogenesis%3A+pathology+and+preclinical+models%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Pathol%22%5BJournal%5D)">Rodent intestinal epithelial carcinogenesis: pathology and preclinical models.</a> Toxicol Pathol. 42, 148-161 (2014).</li>
<li>Sundberg, J. P., Hogenesch, H., Nikitin, A. Y., Treuting, P. M., Ward, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Training+mouse+pathologists%3A+ten+years+of+workshops+on+the+Pathology+of+Mouse+Models+of+Human+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Pathol%22%5BJournal%5D)">Training mouse pathologists: ten years of workshops on the Pathology of Mouse Models of Human Disease.</a> Toxicol Pathol. 40, 823-825 (2012).</li>
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<li>Rudling, R., Hassan, A. B., Kitau, J., Mandir, N., Goodlad, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+device+to+rapidly+prepare+whole+mounts+of+murine+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Prolif%22%5BJournal%5D)">A simple device to rapidly prepare whole mounts of murine intestine.</a> Cell Prolif. 39, 415-420 (2006).</li>
<li>Alferez, D., Goodlad, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((To+best+measure+cell+proliferation+in+samples+from+the+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Prolif%22%5BJournal%5D)">To best measure cell proliferation in samples from the intestine.</a> Cell Prolif. 40, 231-240 (2007).</li>
<li>Park, H. S., Goodlad, R. A., Wright, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+incidence+of+aberrant+crypt+foci+and+colonic+carcinoma+in+dimethylhydrazine-treated+rats+varies+in+a+site-specific+manner+and+depends+on+tumor+histology%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">The incidence of aberrant crypt foci and colonic carcinoma in dimethylhydrazine-treated rats varies in a site-specific manner and depends on tumor histology.</a> Cancer Res. 57, 4507-4510 (1997).</li>
<li>Park, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+epidermal+growth+factor+and+dimethylhydrazine+on+crypt+size%2C+cell+proliferation%2C+and+crypt+fission+in+the+rat+colon.+Cell+proliferation+and+crypt+fission+are+controlled+independently%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Effects of epidermal growth factor and dimethylhydrazine on crypt size, cell proliferation, and crypt fission in the rat colon. Cell proliferation and crypt fission are controlled independently.</a> Am J Pathol. 151, 843-852 (1997).</li>
<li>Femia, A. P., Dolara, P., Caderni, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucin-depleted+foci+%28MDF%29+in+the+colon+of+rats+treated+with+azoxymethane+%28AOM%29+are+useful+biomarkers+for+colon+carcinogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Carcinogenesis%22%5BJournal%5D)">Mucin-depleted foci (MDF) in the colon of rats treated with azoxymethane (AOM) are useful biomarkers for colon carcinogenesis.</a> Carcinogenesis. 25, 277-281 (2004).</li>
<li>Ruehl-Fehlert, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revised+guides+for+organ+sampling+and+trimming+in+rats+and+mice--part+1%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Toxicol+Pathol%22%5BJournal%5D)">Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice--part 1.</a> Exp Toxicol Pathol. 55, 91-106 (2003).</li>
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<li>Mandir, N., Englyst, H., Goodlad, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resistant+carbohydrates+stimulate+cell+proliferation+and+crypt+fission+in+wild-type+mice+and+in+the+Apc%28Min%2F%2B%29+mouse+model+of+intestinal+cancer%2C+association+with+enhanced+polyp+development%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Nutr%22%5BJournal%5D)">Resistant carbohydrates stimulate cell proliferation and crypt fission in wild-type mice and in the Apc(Min/+) mouse model of intestinal cancer, association with enhanced polyp development.</a> Br J Nutr. 100, 711-721 (2008).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

Das Gerät erheblich beschleunigt den Prozess, so daß zwei Bediener kann vollständig eine Maus Autopsie innerhalb von 6 min. Dazu gehört auch eine Sichtkontrolle auf offensichtliche makroskopischen Veränderungen und einem Gewicht von und zur Festsetzung der wichtigsten Organe. Es ermöglicht auch die Betreiber zu spülen, trocknen und wiegen den Magen, Blinddarm, Dünndarm und Dickdarm und bereiten die gesamte Reittiere. Der abgeflachte Gewebe sehr schnell behoben werden und somit zu vermeiden Abbau Artefakte. <p class=...

Die Maus und die genetisch veränderte Maus 1-3 sind eine unschätzbare Modell für die Untersuchung von verschiedenen Pathologien, insbesondere Krebs und seine Beziehung zu Entzündungen im Magen-Darm-Trakt. Dies erfordert oft die Herstellung von Gesamtpräparate des Dünndarms und / oder Dickdarm. Die Herstellung von Gesamtpräparate mit einer Genauigkeit Paar versetzter Schere gemacht werden, aber es kann etwa 20 min pro Maus 4 nehmen. Dies ist nicht sehr praktisch für Vergleichsstudien, die eine erhebliche Menge an Mäusen benötigen (etwa 10 pro Gruppe für die statistische Analyse). Darüber hinaus ist die Länge der Zeit erhöht das Risiko von Gewebeabbau. Ein Versuch, dieses Problem zu lindern führte zu der Studie von verschiedenen Schneidvorbereitung Hilfen. Die erste auf einer Reihe von Metallplatten basiert, mit Schneidhainen, aber die Platten verdeckt das Gewebe und die Schneid war daher schwierig zu kontrollieren. Ein Konventionel sechseckigen Bleistift schließlich Inspiration zur Verfügung gestellt für die Schneideinrichtung, wie wir könnten dann sehen, wie eine halbe Stiftform wäre eine gute Führung für ein Skalpell (Abbildung 1) zu machen. Dies führte zu einem Design für einen Rahmen mit vier Schneidführungen 5. Die Wirksamkeit dieser Vorrichtung war dramatisch wie die Präparate in Figur 4 veranschaulichen den Unterschied zwischen der Scheren Zubereitung und der Vorrichtung Zubereitung. Die Oberseiten der Originalgeräte wurde aus mehreren Metallstücke, aber späteren aufgebaut, und das aktuelle Modell wurde aus einem massiven Stück Duraluminium gefertigt. Die Basis wurde von höchster Qualität mit hoher Dichte Harz bearbeitet. Das Gerät hat sich als von großem Nutzen für die Herstellung von ganzen Bergen von Mausdarm, da es erheblich beschleunigt und verbessert die Qualität und Konsistenz der Präparate, die eine breite Palette von Anwendungen.

<table><tbody><tr><td>Delrin</td><td>Ryan Plastics, Earls Barton, Vereinigtes Königreich</td><td></td><td>Ein ähnliches Material aus hochdichtem Acetalharz würde ausreichen</td></tr><tr><td>Duraluminiumblech</td><td>Metal Supplies Ltd, Park Road, Dukinfield. SK16 5LP UK</td><td></td><td>Aluminium ermöglichen aus dem Jahr 1909, daher sind alternative Lieferanten verfügbar&nbsp;</td></tr><tr><td>Fertige(s) Gerät(e) gebrauchsbereit</td><td>Wenden Sie sich an Dr. Goodlad&nbsp; r.goodlad@imperial.ac.uk</td><td></td><td>Kontakt&nbsp; r.goodlad@imperial.ac.uk für Lieferdetails</td></tr></tbody></table>

eine einfache vorrichtung, um schnell vorbereiten whole mounts des mausdarm

A Simple Device to Rapidly Prepare Whole Mounts of the Mouse Intestine

Herstellung Gesamtpräparate der Maus-Dünndarm und Dickdarm zur nachfolgenden Analyse oder Quantifizierung kann zeitaufwendig und schwierig sein. Wir beschreiben die Verwendung einer einfachen Vorrichtung zu schneiden und zu &#39;roll&#39; Maus Darm ganze Berg Zubereitungen von Superior und gleichbleibende Qualität zu dem, was von Hand erreicht werden kann schnell vorzubereiten. Die Vorrichtung umfasst eine Basis, die 4 Edelstahlstangen und eine Oberseite, die eine Schneidführung wirkt hält. Die Stäbe werden in das Lumen des Dünndarms [gedrittelt] und den Dickdarm eingelegt. Die Stäbe und die Proben werden dann in einem Stück Filterpapier oder einer Karte in die Halteschlitze in der Basis der Vorrichtung platziert. Die Oberseite des Gerätes wird dann positioniert und dient als Schnittführung. Die beiden Abwinkelungen in der Mitte des Oberteils werden verwendet, um ein Messer oder Skalpell führen und schneiden den Darm in Längsrichtung auf der Oberseite der Stangen. Sobald die Darmabschnitte geschnitten worden sind, wird der Kopf abgetrennt und die Karte, tissue und Stangen leicht aus der Vorrichtung entnommen und auf die Bank gelegt. Die Stäbe werden dann sanft zur Seite gerollt, um zu glätten und kleben die Darmsegmente auf die darunterliegende Stück Filterpapier oder Karte. Die endgültige Präparation kann dann untersucht oder befestigt werden und für eine spätere Analyse gelagert. Die Zubereitungen sind von unschätzbarem Wert für die Untersuchung von Veränderungen der intestinalen normalen oder genetisch modifizierte Mausmodellen. Die Vorbereitungen für die Untersuchung und Quantifizierung der Auswirkungen der Entzündung (Colitis), Schäden, Krebsvorstufen verwendet (anomale Kryptenherden (ACFs) und Mucin erschöpft Brennpunkten (MDF)) und Polypen oder Tumoren.

Polypen sind einfach, unter einem Stereomikroskop mit einer Kaltlichtquelle zu identifizieren, um die Seite zu beleuchten das Gewebe (Abbildung 4). Es ist hilfreich, um die Karte mit Bleistiftmarkierungen kennzeichnen, wenn ein Polyp, damit Scoring kann später diskutiert und verschiedene Betreiber kann Einigung beobachtet. Das Gewebe kann auch Groß sein befleckt [mit Methylenblau] zu identifizieren anomale Kryptenherden 8 oder Mucin erschöpft Brennpunkten (MDF) 9 durch Beleuchtung ...

Die Verwendung einer einfachen Vorrichtung zum Schneiden und 'Rollen' von Mäusedärmen, um schnell ganze Reittierpräparate vorzubereiten, wird beschrieben.

Eine einfache Vorrichtung, um schnell vorbereiten Whole Mounts des Mausdarm

Preparing whole mounts of the mouse small intestine and colon for subsequent analysis or quantification can be time consuming and difficult. We describe ...

Das allgemeine Ziel dieses Verfahrens besteht darin, ganze Präparate des Mausdünndarms und -kolons herzustellen. Dies wird erreicht, indem zuerst der Dünndarm und das Kolon entfernt, gespült und abgetupft werden. Im zweiten Schritt werden Dünndarm und Kolon ausgebreitet.Das Seum wird entfernt und der Dünndarm wird in Drittel unterteilt. Anschließend wird eine Stange durch die drei Gewebesegmente geführt, und die Segmente werden zur Bewertung eingeteilt. Im letzten Schritt werden die Stangen vorsichtig abgerollt, um die Dünndarmabschnitte zu glätten, und die Gewebe werden in Schweizerrolle-Technik aufgerollt, um weitere nachgeschaltete Analysen durchzuführen; letztendlich können Histologie und/oder Immunhistochemie durchgeführt werden, um die intestinale Tumorbildung zu charakterisieren.Der Hauptvorteil dieser Technik im Vergleich zu bestehenden Methoden wie dem Offset-Verfahren besteht darin, dass dieses Verfahren wesentlich schneller ist und deutlich bessere Präparationen ermöglicht. Bei diesem Verfahren wird ein Gerät verwendet, das aus einer Basis besteht, an deren beiden Enden sich hochstehende Streifen mit Rillen zur Aufnahme der Stäbe sowie einem Deckel befinden. Nach der Entnahme von Dünndarm und Dickdarm von einer erwachsenen Maus halten Sie das Mesenterium mit einer gebogenen Pinzette fest und ziehen das Gewebe vorsichtig vom Darm ab. Um den Darm zu reinigen, setzen Sie eine Gilson-Pipettenspitze, deren breiteres Ende abgeschnitten wurde, auf eine 10- oder 20-Milliliter-Luer-Adapter-Spritze aus Kunststoff und spülen den Darm mit kaltem PBS aus. Nachdem das Gewebe gewaschen wurde, legen Sie das Dünndarm- und Dickdarmstück auf ein Papiertuch und teilen Sie das Dünndarmstück mit einer Schere in drei gleich große Abschnitte. Führen Sie mehrere sehr kleine Einschnitte in den Darmsegmenten durch, um die Flüssigkeit ablaufen zu lassen. Legen Sie dann ein weiteres Papiertuch über die Darmabschnitte und streichen Sie vorsichtig mit einem Finger über die Segmente, um die restliche Flüssigkeit herauszudrücken.Als Nächstes trocknen Sie die Präparationen vorsichtig ab. Führen Sie mit einem Bleistift Edelstahlstäbe, die in PBS getränkt wurden, in das Gewebe ein. Erstellen Sie Beschriftungen für die Segmente, die das Autopsiedatum, den Versuchscode und die Tierkennnummer enthalten.Platzieren Sie die Etiketten in der Basis des Geräts. Stecken Sie anschließend die Stäbe und Därme in die Schlitze an der Basis des Geräts. Achten Sie darauf, dass die proximalen Enden der Segmente standardisiert in der Nähe der Etiketten positioniert sind.Platzieren Sie nun das obere Teil des Geräts über den Unterbau und führen Sie mit Hilfe der abgeschrägten Stäbe ein Skalpellblatt längs durch die Segmente, um das Gewebe an Ort und Stelle zu halten. Halten Sie während des Schneidens die Segmente vorsichtig mit einem Finger fest, damit sie sich nicht mit dem Messer bewegen. Nachdem alle Schnitte angefertigt wurden, entfernen Sie das obere Teil des Geräts und verwenden Sie ein Stück steifes Karton, um das Filterpapier und das Gewebe vorsichtig zu entfernen.Die Segmente mit einer in PBS getränkten, behandschuhten Fingerspitze leicht benetzen. Die Rolle vorsichtig von Seite zu Seite rollen, um den Darm zu öffnen und das Gewebe flach auszubreiten. Die Schnitte heften sich an das Filterpapier. Nach der visuellen Untersuchung der Präparationen auf grobe Läsionen überführen Sie das Filterpapier in ein flaches Bad mit Fixans. Sobald die Gewebe fixiert sind, überführen Sie sie zur Aufbewahrung bis zur weiteren downstream-Analyse in 70 % Ethanol. Um beispielsweise eine Schweizer Rolle herzustellen, nehmen Sie die Darmsegmente vom Filterpapier und rollen das Gewebe um einen Spießstab.Danach das Gewebe fixieren und die Probe zur weiteren histologischen Aufarbeitung verarbeiten. Die Verwendung dieses Geräts führt zur Herstellung von Präparationen deutlich besserer Qualität, wodurch die anschließende Analyse und Quantifizierung wesentlich einfacher wird. Polypen sind unter einem Stereomikroskop bei seitlicher Beleuchtung des Gewebes durch eine Kaltlichtquelle leicht zu identifizieren.Es ist hilfreich, die Karte mit Bleistiftmarkierungen zu versehen, wenn ein Polyp beobachtet wird, um diesen später besprechen oder einer Qualitätskontrolle unterziehen zu können. Das Gewebe kann außerdem global angefärbt werden, um abnorme Krypten oder muzinverarmte Herde nachzuweisen. Die Lokalisation der Läsionen kann auf der Grundlage ihrer Position bewertet werden, indem mehrere Gitter bekannter Größe am Computer erstellt und auf ein Stück Acetatfolie gedruckt werden.Die Gitter, die zur Länge der Abschnitte passen, können anschließend verwendet werden, um die interessierenden Ereignisse zu erfassen. Nach der Erfassung können die gesamten Abschnitte zu einer Schweizerrolle aufgerollt werden, um histologische Schnitte anzufertigen, die dann zur Bewertung von Mikropolypen genutzt werden können. Sobald die Methode beherrscht ist, kann sie bei korrekter Durchführung innerhalb weniger Minuten an einer Probe durchgeführt werden.

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