Räumlich-zeitliche Analyse von zytokinetischen Events in Spalthefe

Das übergeordnete Ziel dieser Lebendzellmikroskopietechnik ist es, die raumzeitlichen Ereignisse zu untersuchen, die während der Zytokinese im Spalthefe-Modellsystem auftreten. Diese Methode kann dazu beitragen, Schlüsselfragen im zytokinetischen Bereich zu beantworten, wie z. B. die molekularen Details der verschiedenen Stadien der Zytokinese im Laufe der Zeit. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass verschiedene räumliche Komponenten der zytokinetischen Maschinerie über lange Zeiträume mit minimaler Toxizität für die Zellen analysiert werden können.

Obwohl diese Methode Einblicke in die Zytokinese und Spalthefe geben kann, kann sie auch auf knospende Hefen und andere Pilze angewendet werden. Um dieses Verfahren zu starten, gießen Sie drei bis vier Milliliter geschmolzenes Medium, das mit Vitamin C versetzt ist, auf eine Kulturschale mit Glasboden. Sobald das Medium erstarrt ist, heben Sie die Medienplatte vorsichtig mit einem scharfen Skalpell von der Kulturschale ab und platzieren Sie eine Pipettenspitze zwischen der Medienplatte und der Kulturschale, um zu verhindern, dass die Platte zurück in die Schale fällt.