Verbesserte Genom Bearbeitung mit Cas9 Ribonucleoprotein in verschiedenen Zellen und Organismen

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25. Mai 2018

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Behnom Farboud^*¹^,² , Erin Jarvis^*¹ , Theodore L. Roth^*³^,⁴^,⁵^,⁶ , Jiyung Shin^*¹^,³ , Jacob E. Corn¹^,³ , Alexander Marson³^,⁵^,⁶^,⁷^,⁸^,⁹ , Barbara J. Meyer¹^,² , Nipam H. Patel¹^,¹⁰ , Megan L. Hochstrasser³

¹Department of Molecular Cell Biology, University of California, Berkeley, ²Howard Hughes Medical Institute, University of California, Berkeley, ³Innovative Genomics Institute, University of California, Berkeley, ⁴Biomedical Sciences Graduate Program, University of California, San Francisco, ⁵Department of Microbiology and Immunology, University of California, San Francisco, ⁶Diabetes Center, University of California, San Francisco, ⁷Chan Zuckerberg Biohub, ⁸Department of Medicine, University of California, San Francisco, ⁹UCSF Helen Diller Family Comprehensive Cancer Center, University of California, San Francisco, ¹⁰Department of Integrative Biology, University of California, Berkeley

^* These authors contributed equally

Unter Verwendung einer vormontierten Cas9 ist Ribonucleoprotein Komplex (RNP) eine leistungsfähige Methode für präzise und effiziente Genom-Bearbeitung. Hier heben wir ihre Nützlichkeit in einem breiten Spektrum von Zellen und Organismen, einschließlich der primären humanen Zellen und sowohl klassische und neue Modellorganismen.

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CRISPR Cas9 RNP

Genomeditierung

Ribonukleoprotein Komplex

Guide RNA Design

Elektroporationsprotokoll

T Zell Editierung

HSPC Editierung

C elegans Mikroinjektion

Parhyale Embryo Injektion

Durchflusszytometrie Analyse

Chapters in this video

0:04

Title

1:09

RNP Preparation for Primary Cell Editing, Hematopoietic Stem/Progenitor Cell (HSPC) Preparation, and RNP Electroporation

2:46

C. elegans Gonad Microinjection with RNPs and Post-injection Care

5:17

P. hawaiensis Embryo Microinjection with RNPs and Post-injection Care

8:05

Results: Evaluation of Genome Editing Outcomes

9:28

Conclusion