Intrakranielle Pharmakotherapie und Schmerz-Assays bei Nagern

Hier präsentieren wir ein Protokoll, um intrakranielle pharmakologische Experimente, gefolgt von Schmerzen Verhalten Assays bei Nagetieren durchführen. Dieses Protokoll erlaubt Forschern, molekularen und zellulären Ziele im Gehirn, für pharmakologische Wirkstoffe bei der Behandlung von Schmerzen zu liefern.

Der Hauptvorteil dieser Technik ist, dass es verwendet werden kann, um Schmerzmechanismen und Drogenaktionen im Gehirn weiter zu erforschen. Um die Wirkung von intrakraniellen Injektionen auf das akute Schmerzverhalten bei Ratten zu untersuchen, legen Sie die Ratte eine Woche nach der Operation auf die Glasplatte eines Hargreaves-Geräts und verwenden Sie das Gerät, um einen Infrarotstrahl durch die Glasebene unter dem Plantarbereich eines der Rattenfüße zu fokussieren. Um die synergistischen pharmakologischen Wirkungen zwischen zwei verschiedenen Studienmedikamenten zu untersuchen, verwenden Sie ein Stück PE-50-Schläuche, das an einer 10-Mikroliter-Hamilton-Spritze befestigt ist, die mit einer 33-Spur-Injektorkanüle ausgestattet ist, die einen Millimeter über die implantierten Führungen hinausreicht.

Injizieren Sie 0,5 Mikroliter oder weniger des Studienmedikaments in eine intrakranielle Kanüle über einen Zeitraum von 100 Sekunden. Halten Sie die Injektorkanüle nach der Injektion weitere 60 Sekunden an Ort und Stelle, um eine langsame Diffusion der Lösung zu erleichtern. Dann, intraperitoneally injizieren das zweite Medikament von Interesse.

20 bis 30 Minuten nach der Injektion den Plantarreflextest fünfmal durchführen, wie gezeigt. In diesem repräsentativen Experiment zeigte die intrakranielle Abgabe eines AMPAkine eine additive analgetische Wirkung, wenn sie gleichzeitig mit intraperitoneal geliefertem Morphin verabreicht wurde, was darauf hindeutet, dass intrakranielle Injektionen zumindest teilweise die Kraft haben, einen Mechanismus zur Wirkstoffaktivierung im Zusammenhang mit Schmerzen aufzudecken. Beim Versuch dieses Verfahrens ist es wichtig, sich daran zu erinnern, den Zeitpunkt des Verfahrens genau zu verfolgen.

Nach diesem Verfahren können intrakranielle Implantate in Verbindung mit Schmerzassays verwendet werden, um zusätzliche Fragen über die Region des Gehirns zu beantworten, die für einen gegebenen Schmerzphänotyp verantwortlich ist, mögliche Orte der Arzneimittelwirkung oder mögliche Schmerzmedikamentenmechanismen.