Die Verwendung von Maus-Mammary-Tumorzellen in einem In-Vitro-Invasions-Assay als Maß für das onkogene Zellverhalten

Dieses Protokoll, der In-vitro-Invasionstest, ist ein nützliches Werkzeug zur quantitativen Messung der Fähigkeit einer Zelllinien, durch eine proteinreiche Matrix zu wandern und eine poröse Membran zu durchlaufen, in einem Prozess, der den frühen Stadien der Krebszellinvasion ähnelt. Diese Zelllinien können genetisch verändert werden, um ein Gen zu übertragen oder die Expression eines Gens zu reduzieren, um festzustellen, ob dieses Gen eine Rolle bei der Zellmigration oder Zellinvasion spielt. Viele aggressive Krebsarten beinhalten dramatische Veränderungen im Zellverhalten, einschließlich erhöhter Migration und Invasion.

Dieser In-vitro-Invasionstest kann es uns ermöglichen, die Gene und andere Faktoren, die an diesem Prozess beteiligt sind, besser zu verstehen. Um dieses Verfahren zu beginnen, wachsen anhimante Maus-Mammary-Tumorzellen in einem T25-Kolben bei 37 Grad Celsius mit 5% Kohlendioxid und 100% Luftfeuchtigkeit, bis sie 70% bis 90% konfluent für tag eins des Experiments sind. Holen Sie die Boyden Kammereinsätze aus dem Lager und übertragen Sie sie auf eine Zellkulturhaube, um sie für 20 Minuten auf Raumtemperatur zu erwärmen.