Banca cerebro y el muestreo sistemático de la materia biológica constituye la base para estereología imparcial y maximiza el potencial de los datos obtenidos de cada ejemplar.
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Artículo de método
Banca cerebro: Aprovechar al máximo las muestras de su investigación
En este artículo
Resumen
Resumen
Estereología imparcial es un método de forma precisa y eficiente la estimación del número de neuronas total (o otro tipo de células) en un área de interés
Protocolo
Parte 1: Pre-procesamiento de tejidos
- Tejido debe ser buena perfusión con paraformaldehído, glutaraldehído, o formalina. Esto se puede lograr a través de la perfusión estándar transcardial normalmente se utiliza para la cosecha de otros órganos. En el presente estudio el tema fue profundamente sedado con clorhidrato de ketamina (10 mg / kg, im), sacrificados con una sobredosis de pentobarbital sódico (25 mg / kg, iv) y perfundidos transcardially con PBS 0,1 M hasta que esté completamente desangrado. Esto es seguido por una solución de paraformaldehído al 4% en PBS durante 5 minutos (aproximadamente 1 litro).
- El cerebro debe ser stereotaxically bl....
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Discusión
El muestreo sistemático es un método barato destinado a maximizar el material de investigación. Esta estrategia de muestreo se ha diseñado para cumplir con las normas de estereología imparcial que requiere un muestreo sistemático en toda la región. Es muy importante que el orden de las secciones de cada serie se mantiene. En nuestro laboratorio hemos utilizado con éxito este método para la banca de los hamster y no humanos, cortes de cerebro de los primates. Hasta ahora, hemos recogido cerca de 20.000 monos verdes (.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Los autores desean agradecer a Ikiel Ptito por su apoyo técnico continuo.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Glicol etilénico | Fisher Scientific | E178-4 | |
| Poli(vinil pirrolidona) | Fisher Scientific | BP431-500 | |
| Medio de inclusión Thermal Scientific | Fisher Scientific |
Referencias
- West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M.
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Reimpresiones y permisos
