La disección de las glándulas salivales y del intestino medio de Ae. aegypti

Summary

El intestino medio del mosquito y las glándulas salivales son clave de entrada y salida de los agentes patógenos, como vector de Plasmodium falciparum y el virus del dengue. Este video muestra las técnicas de disección para la eliminación de las glándulas salivales y del intestino medio del mosquito Aedes aegypti.

Abstract

El intestino medio del mosquito y las glándulas salivales son clave de entrada y salida de los agentes patógenos, como los parásitos Plasmodium y los virus del dengue. Este protocolo de vídeo se muestran las técnicas de disección para la eliminación de las glándulas salivales y del intestino medio del mosquito Aedes aegypti.

Protocol

La disección del intestino y los tejidos de las glándulas salivales de los mosquitos requiere una preparación previa de fosfato 1X solución salina (PBS 1X) y solución de anestesia de los mosquitos al someter a una temperatura de 4 ° C, hasta el inmovilizado. Los mosquitos permanecen anestesiados mediante la colocación de una placa de Petri que se mantiene frío en hielo. Otros materiales necesarios son: microscopio óptico equipado con objetivo de 10x, pipeta, pinzas de punta fina, portaobjetos de vidrio, las sondas de punta de la aguja.

Intestino medio de disección

1. Coloque una gota de PBS 1X en un portaobjetos de vidrio montada bajo el microscopio de luz.
2. La transferencia de un mosquito en la diapositiva preparada por apuñalar en el tórax de mosquitos con una sonda de punta de aguja.
3. Mientras mantiene presionado el mosquito con la sonda, utilice las pinzas para agarrar el segundo al último segmento abdominal y tire suavemente hacia fuera del abdomen del mosquito en un solo movimiento. El intestino medio debe permanecer unido al tórax inmovilizado.
4. Deseche el abdomen. Use las pinzas para separar el intestino medio del tórax.

Disección de las glándulas salivales

1. Coloque una gota de PBS 1X en un portaobjetos de vidrio montada en un microscopio de luz.
2. Recoger un mosquito por stabbling el tórax con una sonda de punta de aguja.
3. Tirar de las piernas de los mosquitos utilizando los dedos.
4. Transferir el mosquito en la diapositiva.
5. Quitar la cabeza del mosquito con el fórceps.
6. Mientras mantiene presionado el tórax de mosquitos con la sonda, utilizar otra sonda para empujar suavemente hacia abajo en el tórax.
7. Las glándulas salivales se encuentran en la parte anterior del tórax y se puede aislar mediante el uso de una sonda de punta de aguja y la ruptura de los accesorios que se conectan a la glándula en el tórax. Intactas las glándulas salivales están formadas por tres lóbulos: dos lóbulos laterales y un lóbulo.