Extracción de sonicación de biomarcadores lípidos de sedimento

1. recoger el material necesario

1. Muestras (hojas, suciedad, hongos, corteza, tejido), generalmente congelado, liofilizado, aplastado y homogeneizada antes de la extracción, extraída en grupos para maximizar la eficiencia. Extraer tres muestras.
2. Dependiendo del tamaño de la muestra, deben utilizarse frascos con volúmenes que van de 4-60 mL. Para este experimento, se utilizan frascos de vidrio de borosilicato (40 mL) y casquillos seguros solvente. Viales, pipetas de vidrio de borosilicato y latas de pesaje deben ser quemado a 550 ° C antes de 6 h asegurar el retiro de posibles contaminantes orgánicos.
3. Diclorometano y metanol son comunes en los laboratorios de geoquímica orgánicos más. Se utilizan individualmente para limpiar instrumentos de laboratorio y cristalería antes de usar. Una mezcla de diclorometano (DCM) en metanol (MeOH; 9:1) se utiliza en muchos laboratorios para extraer eficientemente biomarcadores con un amplio rango de polaridades. Disolventes deben estar libres de contaminantes orgánicos.
4. Utilizar un baño de sonicación a temperatura ambiente. Una gama de tamaños de sonicador y sonicación con o sin calor están disponibles en tiendas de equipamiento científico mayor.
5. Estantes de vial, que deben ser resistente al agua, se colocará en el baño de sonicación.
6. Solvente había aprobado Campana química.

2. preparación de muestra

1. Coloque una combustión peso de lata en la escala de laboratorio y Tara.
2. Enjuague el espátula de laboratorio con solvente, luego utilizar para transferir una masa adecuada de muestra en la bandeja de pesaje y registrar la masa.
   1. La masa de la muestra varía en función de su contenido de materia orgánica. Materia orgánica relativamente magro material (barro marino) puede requerir varios gramos, mientras que el material rico de materia orgánica (tejido foliar) puede requerir mucho menos.
3. Transferir todo el material en la bandeja de pesaje en una combustión, vial previamente pesado y etiquetado. Tapa el frasco y luego tire de la bandeja de pesaje.
4. Realice los pasos 2.1-2.3 para cada muestra que se extrae.

3. extracción

1. Utilizando una pipeta de pre-combustión y bulbo, transferir 20 mL de la mezcla de DCM:MeOH (9:1) en cada frasco (vial debe ser aproximadamente medio lleno). Tapar los frascos antes de pasar a la siguiente muestra, para no evaporar los solventes volátiles.
   1. Las volatilidades de DCM y MeOH son diferentes. Evaporación del disolvente de extracción por cubetas destapado tiene la habilidad de cambiar su polaridad y así la extracción.
2. Coloque los frascos de muestra en un rack de frasco resistente al agua.
3. Compruebe que el nivel de agua en el baño de sonicación es sólo lo suficientemente profundo como para sumergir los frascos de muestra hasta la parte superior del solvente de extracción. Demasiada agua puede causar los frascos flotar; muy poca agua puede dejar las muestras de ser bien agitado.
4. Coloque la rejilla del frasco con las muestras en él directamente en el baño de sonicación.
5. Someter a ultrasonidos durante 30 min a temperatura ambiente.
6. Quitar el estante de la muestra del sonicador. Si la extracción de sedimentos, que establece por 30 min permitir colocar a ocurrir. Si otro grupo de muestras de extracción, poner en sonicador en este momento.
7. Retire la mezcla de DCM:MeOH del frasco de extracción, utilizando un pre combustión pipeta y bulbo, e inserto en otro previamente había pesado, pre-quemado y había etiquetado frasco 40 mL.
8. Repita 3 3.1-3.7 x para todas las muestras.
9. Permite muestras extraídas secar en sus frascos, tapas y en la capilla, cubierto ligeramente con un trozo de papel de aluminio. La etiqueta como 'residuo extraído' y almacenar.
10. Los extractos combinados para cada muestra de la etiqueta como 'TLE'.