La disección de las glándulas salivales y del intestino medio de Ae. aegypti

Mi nombre es Judy Coleman y formo parte del Laboratorio James. Aquí en la UCI, estamos en el Departamento de Biología Molecular y Bioquímica. Hoy voy a diseccionar los mosquitos Eptide y vamos a diseccionar la glándula salival en el intestino medio.

Nos interesan estos tejidos específicos porque están muy implicados en la vía del virus y de los parásitos. Cuando un mosquito ingiere una comida de sangre, el virus parásito entra en la glándula salival, y de la glándula salival pasa al intestino medio. Pasa a través del epiepitelio del intestino medio y luego llega a la linfa humerante.

Y eso viaja a través del torrente sanguíneo del mosquito, la hemo linfa, y llega a la glándula salival. Allí reside hasta que está listo para tomar otra comida de sangre. Muy bien.

Lo que voy a hacer ahora primero es diseccionar la tripa media de los aegypti de los ochenta. En primer lugar, tengo que poner una vez PBS. Este es un amortiguador, es decir, son nuestras buenas condiciones fisiológicas.

Así que lo pusimos en el portaobjetos y tengo un resfriado para evitar que el mosquito se vaya volando mientras estamos diseccionando, de modo que tomaré el intestino medio para obtener un intestino medio, tengo que apuntar al mosquito. Pongo el my, uso una sonda que he hecho y paso la sonda a través del tórax del mosquito. Una vez que lo pongo bajo el microscopio, tomo las pinzas, tomo el extremo de la succión del abdomen, lo saco y dejo atrás el intestino medio.

Así que el enano, el enano está ahí, y lo lograré. Ahí está. Ahí está el intestino medio aislado.

Ahora mismo vamos a diseccionar las glándulas salivales de los ochenta ojos de GT. Y en este procedimiento utilizo dos sondas diferentes y las pinzas. Tengo una sonda aquí que tiene un alfiler recto, y la uso para agarrar el mosquito.

Utilizo una sonda que tiene un alfiler en ángulo, y la utilizo para empujar la lente del mosquito. Las pinzas que utilizo para arrancar la cabeza del mosquito antes de sacar las glándulas salivales. Cuando saco el mosquito de la placa de Petri, lo introduzco en el tórax.

Es más fácil para mí tirar, sacar las glándulas si puedo quitar las patas. Así que lo hago a mano. Entonces pongo al mosquito en el amortiguador y le arranco la cabeza, y empujo el tórax, y saco la glándula salival.

Aquí hay un buen vistazo a la glándula salival, y hay un vistazo a ambas partes del par de glándulas salivantes. Acabamos de terminar de diseccionar las glándulas salivantes entre las tripas de los ochenta, mosquito ojo de güeya. Observamos este material a nivel molecular con el fin de interferir con la vía del virus o el parásito dentro del mosquito.