Trasplante de células progenitoras neurales humanas en el cerebro del ratón

Asegure un ratón anestesiado en un marco estereotáxico.

Aplique ungüento para los ojos para evitar la sequedad de la córnea.

Afeitar el cuero cabelludo y desinfectar la piel.

Inserte las barras para estabilizar el cráneo.

Luego, haga una incisión en la línea media para exponer el cráneo.

Taladre un agujero a través del cráneo en la coordenada objetivo.

Cargue una jeringa con células progenitoras neurales humanas modificadas genéticamente o NPC que expresan luciferasa y una proteína fluorescente para su visualización.

Alinee la jeringa con el sitio objetivo y baje la aguja a la profundidad deseada.

Aplique adhesivo tisular alrededor de la aguja para evitar fugas celulares.

Inyecte las células lentamente para asegurar una distribución uniforme.

Sostenga la aguja en su lugar brevemente para evitar el reflujo de la suspensión celular.

Finalmente, retire la aguja lentamente y cierre la incisión.

El modelo de ratón con NPC trasplantados ahora está listo para su visualización.

Transportar al animal desde la cámara de inducción hasta el marco estereotáxico, manteniendo la anestesia mediante una mascarilla.

Aplique lubricante oftálmico para evitar que los ojos se sequen. Afeite el cuero cabelludo del ratón con una maquinilla de afeitar eléctrica y desinfecte la piel con una solución de betadine al 5 por ciento con hisopos de algodón. Asegure la cabeza del mouse e inserte las barras para los oídos en el meato externo.

Taladre un orificio con un diámetro de dos a tres milímetros a través del cráneo con un taladro dental quirúrgico. Vuelva a suspender las células preparadas en el tubo y extraiga dos microlitros de suspensión celular en una jeringa. Coloque la jeringa sobre el sitio objetivo y mueva lentamente la aguja hacia la superficie de la duramadre y calcule las coordenadas de profundidad.