Modelado de la colonización de células de cáncer de ovario por epiplón: un método ex vivo para establecer la colonización por manchas lechosas de células de cáncer de ovario marcadas con fluorescencia en explantes de epiplón murino

El epiplón, un tejido rico en tejido adiposo dentro de la cavidad peritoneal, consta de depósitos de grasa que proporcionan un microambiente adecuado para que las células cancerosas metastásicas colonicen y formen tumores secundarios. Para estudiar esta colonización ex vivo, comience colocando un inserto de cultivo de células membranosas permeable dentro de una placa de cultivo.

Aplique un adhesivo tisular sobre la región interna de la membrana del inserto. Coloque un explante de omental de ratón sobre el adhesivo para inmovilizar el tejido. Siembre suavemente una suspensión de células cancerosas de ovario marcadas con fluorescencia en la parte superior del epiplón.

A continuación, llene los lados del pocillo con un medio adecuado para complementar el crecimiento celular e incubar durante el tiempo deseado. El tejido omental contiene estructuras especializadas llamadas manchas lechosas, que son grupos de células inmunitarias empaquetadas alrededor de redes de vasos sanguíneos. Estas células inmunitarias secretan ciertos factores químicos que atraen a las células cancerosas y promueven su implantación. Las células cancerosas colonizadas proliferan, simulando condiciones metastásicas.

Finalmente, deseche los medios gastados. Observe el cultivo con un microscopio fluorescente para evaluar las colonias de células cancerosas fluorescentes dentro del tejido omental.

Cultivar y preparar células marcadas con fluorescencia y volver a suspender a una concentración de 2 millones de células por mililitro. Aplique aproximadamente 6 microlitros del adhesivo tisular a la membrana del inserto de cultivo y déjelo secar al aire. Luego, lave la membrana dos veces con agua estéril para eliminar cualquier exceso de adhesivo antes de secar al aire las membranas debajo de una campana laminar.

Extirpe con cuidado el omentón y fíjelo a la membrana recubierta de adhesivo con pinzas estériles. Después de permitir que el tejido se adhiera a la membrana durante un minuto, agregue 500 microlitros de la suspensión celular encima de cada epiplón en cada inserto de cultivo.

Luego, llene el área alrededor de la cámara de transpocillos con 2,5 mililitros de medio DME/F-12. Incube el omenta con suspensión celular durante seis horas a 37 grados centígrados en un entorno de 5% de CO2. Retire con cuidado y lave el omentón con unos 10 mililitros de PBS. Finalmente, visualice los focos de células cancerosas fluorescentes utilizando un sistema de imágenes fluorescentes apropiado.

• Omentum – An adipose-rich tissue within the peritoneal cavity.
• Omental Tissue – Tissue providing a microenvironment for cancer cells.
• Ovarian Cancer – Cancer that seeds and proliferates on the omentum.
• Milky Spots – Structures that attract and support cancer cell implantation.
• Omental Metastasis – Secondary tumor colonization within the omental tissue.

• Omentum is a fat-rich depot providing a home for cancer cells (e.g., omental tissue).
• The omental tissue contains specialized structures known as milky spots (e.g., theory).
• Milky spots secrete chemicals, attracting and supporting cancer cells (e.g., processes).
• The seeded cancer cells proliferate, simulating metastatic conditions (e.g., experiment).

• What is the role of omentum and milky spots in ovarian cancer metastasis?
• What causes proliferation of cancer cells within the omental tissue?
• How do milky spots support cancer cell implantation?

• This research can contribute to new treatment strategies for ovarian cancer (e.g., technology).
• The findings can impact healthcare by improving understanding of metastasis (e.g., healthcare).
• The research could lead to improved quality of life for patients with ovarian cancer (e.g., sustainability).
• The research paves the way for advancement in the treatment of metastatic cancers (e.g., innovations).