Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 3:35 min. • April 30th, 2023
En los riñones de los vertebrados, las nefronas consisten en múltiples glomérulos, una densa red de vasos sanguíneos, que desempeñan un papel principal en la filtración de desechos del cuerpo.
Para aislar glomérulos, comience tomando un riñón de ratón recién disecado. Use fórceps para despegar la cápsula renal del riñón y coloque el riñón limpio en una nueva placa de cultivo. Ahora, coloque el plato sobre hielo para evitar la degradación renal. Pica el riñón en trozos pequeños.
A continuación, vuelva a suspender los trozos de riñón picados en una solución tampón adecuada. Filtre la suspensión de tejido a través de un filtro de malla de gran tamaño y recoja el flujo en un plato nuevo. Repita este paso unas cuantas veces más mientras disminuye progresivamente el tamaño de la malla cada vez, hasta que los glomérulos se disocien de los fragmentos renales.
Finalmente, lave el filtro con el medio de cultivo deseado para recoger los glomérulos atrapados más pequeños mientras los fragmentos de riñón permanecen en el filtrado. Transfiera los glomérulos a una placa de fijación ultrabaja. Visualice la placa con un microscopio de luz invertida.
Con la ayuda de una micropipeta, capture un solo
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