Aislamiento de la microglía de la corteza del cerebro de un ratón adulto

Tomemos una corteza cerebral de ratón recién cosechada.

Pica el tejido en pequeños fragmentos. Transfiéralos a un homogeneizador refrigerado que contenga un tampón con inhibidores de la ARNasa y las ADNasas.

Homogeneizar el tejido de forma óptima para liberar las células en suspensión, preservando selectivamente la microglía debido a su capacidad para soportar las fuerzas de cizallamiento y mantener la viabilidad de la membrana, al tiempo que elimina las neuronas y otras células gliales.

Además, los inhibidores de la ARNasa degradan las ARNasas, mientras que las ADNasas degradan cualquier ADN contaminante.

Pase la suspensión celular a través de un filtro celular para eliminar los restos de tejido.

Transfiera la suspensión celular a un tubo. Centrifugar y eliminar el sobrenadante que contiene enzimas. Vuelva a suspender las celdas en un búfer.

Agrega microperlas magnéticas antimielina. Estas microperlas se dirigen a la proteína mielina, uniéndose a los restos de mielina y oligodendrocitos.

Cargue la mezcla de células y perlas en una columna de agotamiento que comprende una matriz con esferas ferromagnéticas.

Bajo el campo magnético aplicado, los restos de mielina y oligodendrocitos