Inducir una lesión traumática en un corte de cerebro usando un dispositivo de tubo de choque

Comience con una configuración de tubo de choque que comprende una sección de controlador proximal, un conjunto de recámara de diafragma y una sección impulsada distal con sensores de presión y un portamuestras.

El dispositivo se conecta a un cilindro de gas presurizado a través de la unidad de control.

Inserte una varilla ciega a través del portamuestras para alinearlo con la salida del tubo de choque.

Conecte los sensores de presión a un dispositivo de registro.

Mantenga cerrado el control del tubo de choque y abra la salida del cilindro de gas para generar presión en la unidad de control.

Asegure un diafragma de lámina de poliéster en el conjunto de la recámara.

Coloque una bolsa que contenga una membrana con cortes de cerebro en un medio experimental en el soporte de muestras.

Abra la perilla de control de gas del tubo de amortiguador, permitiendo que el gas ingrese a la sección del controlador y aumente la presión del aire.

Esto rompe el diafragma, liberando una alta presión que genera una onda de choque.

Esta onda de choque viaja e impacta en los cortes cerebrales, induciendo una lesión tisular traumática.

Utilice una varilla ciega para atornillar el marco del soporte de la bolsa estéril a la brida distal del tubo de choque, asegurándose de que el orificio central esté alineado con la salida del tubo de choque. El sensor 1, un transductor de presión se encuentra en la parte media de la sección impulsada y el sensor 2 está en la brida distal del tubo de choque.

Conecte estos transductores de presión a un osciloscopio a través de una unidad de alimentación de fuente de corriente y encienda el osciloscopio. Asegúrese de que la válvula solenoide del tubo de choque y el control de flujo estén cerrados, luego abra la línea de aire comprimido externa y cargue la válvula solenoide a 2,5 bar. Abra la válvula de seguridad del cilindro de aire comprimido y abra lentamente el regulador de presión para aumentar la presión a aproximadamente 5 bar.

A continuación, prepare los diafragmas cortando láminas de poliéster de 23 micras de espesor en cuadrados de 10 por 10 centímetros. Prepare manijas con cinta de autoclave y péguelas en la parte superior e inferior de cada diafragma. Coloque un diafragma en la brecha y asegúrese de que estén centrados.

A continuación, sujete el diafragma con cuatro pernos y tuercas M24. Fíjelos secuencialmente de forma diagonalmente simétrica mientras se asegura de que los diafragmas no se arruguen. Sujete una bolsa estéril en posición vertical en el marco del soporte, asegurándose de que la superficie del inserto de cultivo de tejidos con los cortes organotípicos del hipocampo esté orientada hacia la salida del tubo de choque y que el inserto de cultivo de tejidos esté centrado dentro de la bolsa estéril.

Para la configuración de doble diafragma, la presión de ruptura depende del diferencial de presión de gas entre el controlador y la cámara de doble recámara. Por lo tanto, para que los diafragmas estallen de forma controlada, la válvula de seguridad de doble recámara se abre manualmente una vez que se alcanzan las presiones objetivo.

Póngase protectores auditivos y gafas de seguridad, si aún no los ha usado. Cierre la válvula solenoide. Encienda la unidad de alimentación de la fuente de corriente para adquirir los datos de ondas de choque.

Manipule la perilla de control de flujo en el panel de control del tubo de choque para presurizar lentamente la sección de volumen del controlador del tubo de choque para la configuración de diafragma simple tanto para la sección de volumen del controlador como para la sección de doble recámara del tubo de choque para la configuración de doble diafragma. Tan pronto como se rompa el diafragma, cierre rápidamente el flujo de aire comprimido con la perilla de flujo y abra la válvula solenoide.

La combinación ideal de parámetros de ondas de choque debería ser suficiente para causar lesión tisular, pero no tan alta como para causar inserto de cultivo de tejido o distorsión o ruptura de bolsas estériles.