Imágenes en vivo y seguimiento de una sola célula para monitorear el linaje neuronal en células madre neurales adultas

Siembre células madre neurales adultas en una placa de pocillos múltiples recubierta de poli-D-lisina a densidades óptimas para garantizar la viabilidad celular y el seguimiento de una sola célula.

Durante la incubación, las células se adhieren a la superficie recubierta, proporcionando una plataforma estable para una visualización precisa durante la obtención de imágenes.

Marque un pocillo sin células para establecer un punto de referencia para las coordenadas del microscopio.

Transfiera y asegure la placa dentro de la cámara de incubación del microscopio en condiciones optimizadas para mantener la viabilidad celular y evitar movimientos no deseados durante los cambios de platina motorizados.

Permita que las células se equilibren con las condiciones de la cámara para garantizar un enfoque de imagen consistente.

Seleccione la región que contiene las células para obtener imágenes con respecto al punto de referencia. Luego, configure los parámetros del microscopio de lapso de tiempo.

Realice microscopía de lapso de tiempo de contraste de fase para obtener imágenes de células vivas a intervalos regulares, minimizando la fototoxicidad.

Utilizando software de seguimiento de células individua