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DOI: 10.3791/51012-v
Brianna N. Gaskill1, Alicia Z. Karas2, Joseph P. Garner3,4, Kathleen R. Pritchett-Corning1
1Research Models and Services,Charles River, 2Department of Clinical Sciences,Tufts University, 3Department of Comparative Medicine,Stanford University, 4Department of Psychiatry and Behavioral Sciences,Stanford University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Demostramos la utilidad del comportamiento de construcción de nidos en ratones de laboratorio como indicador de bienestar. El marcado de nidos es una técnica sensible que se ve alterada por la temperatura, la enfermedad y la agresión. El tiempo de integración en la prueba del nido (TINT) es una evaluación simple en la jaula que puede detectar el dolor postoperatorio.
El objetivo general del siguiente experimento es observar el efecto de un tratamiento experimental sobre el comportamiento de construcción de nidos en ratones. Esto se logra proporcionando a los ratones material de anidación para asegurarse de que tengan un sustrato para exhibir el comportamiento. Como segundo paso, se permite que los animales interactúen con el material, lo que puede resultar en la construcción de un nido.
A continuación, se puntúa el nido para evaluar su calidad y complejidad. Se obtienen resultados que muestran el efecto de diversas intervenciones en función de la calidad y complejidad del nido. La principal ventaja de esta técnica sobre los métodos existentes, como la observación simple, es que las pruebas utilizan comportamientos naturales altamente motivados en ratones que se observan fácilmente en la jaula cuando los ratones están inactivos.
Aunque este método puede proporcionar información sobre aspectos básicos del comportamiento del ratón. Potencialmente, se puede aplicar a otros sistemas, como la evaluación del bienestar del ratón o el trastorno causado por enfermedades neurológicas o infecciosas. Por lo general, las personas nuevas en este método tendrán dificultades porque intentar marcar un nido sin una plantilla producirá datos variables. Para empezar, pese de ocho a 10 gramos de material de anidación.
Se recomienda el papel arrugado para obtener los mejores resultados en la construcción del nido, pero se pueden usar otros materiales. A continuación, identifique las jaulas que se van a puntuar en cualquier momento conveniente. Para el investigador o el personal de cuidado de animales, coloque el material de papel para anidar en la jaula.
El material se puede colocar encima o mezclar con la ropa de cama para examinar un repertorio de comportamiento más amplio. Regrese al día siguiente, de siete a nueve horas después de que se enciendan las luces para marcar los nidos en un momento en que los ratones estén menos activos. Usando las pautas de puntuación de nidos, califique cada nido en una escala de cero a cinco.
Primero, determine si el material ha sido manipulado por los ratones. Esto incluye ser procesado o movido alrededor de la jaula. Si el material no se toca, todo el nido recibe una puntuación de cero.
A continuación, determine si la mayor parte del material de anidación se ha recogido en un sitio de anidación central. Si no hay un sitio de anidación claro y el material ha sido manipulado, la jaula recibe una puntuación de uno. Si hay un sitio de anidación centralizado, considere el nido como si fuera un cuadrado.
A cada uno de los cuatro lados del cuadrado se le puede dar una puntuación separada de dos a cinco. A continuación, se promedian las cuatro puntuaciones para obtener la puntuación del nido en jaula. Un nido recibe una puntuación de dos cuando es plano y no tiene paredes poco profundas.
Si el nido tiene una forma ligeramente ahuecada donde la pared tiene menos de la mitad de la altura de una cúpula, se le da un tres. Se da una puntuación de cuatro. Cuando la pared tiene la mitad de la altura de la cúpula, las paredes que son más altas que la mitad de la altura de una cúpula, que pueden o no encerrar completamente el nido, se les da una puntuación de cinco.
Alternativamente, la puntuación puede ocurrir tres o cuatro días después de la provisión de material nuevo. Cuando a menudo se alcanzan los puntajes máximos para que el tiempo se integre en la prueba o el tinte del nido, corte un cuadrado de dos pulgadas de material de anidación de algodón en cuartos. Para obtener cuatro cuadrados de prueba de una pulgada.
Pruebe a los animales dentro de las primeras tres horas del ciclo de luz para aprovechar el aumento de los comportamientos de construcción de nidos antes de la inactividad diurna. Cuando esté listo, abra la tapa de la jaula y coloque un cuadrado de prueba en el lado opuesto de la jaula desde el sitio principal del nido. El material de prueba debe colocarse en el mismo lugar cada vez que se realice la prueba.
Coloque el cuadrado de prueba donde se pueda ver desde fuera de la jaula. Regrese a la jaula después de 10 minutos para hacer observaciones. Si falta la escuadra de prueba de su ubicación original, el estaño de la jaula es positivo.
Si la escuadra de prueba permanece en la ubicación original, es posible que se necesite el negativo de estaño de la jaula y observaciones adicionales para determinar si los ratones requieren atención veterinaria. En este ejemplo, la construcción de nidos se puntuó en jaulas mantenidas a tres temperaturas ambiente diferentes a medida que la temperatura aumentaba la puntuación del nido, la disminución de la forma del nido puede identificar grupos de ratones machos con un alto nivel de agresión, lo que puede resultar en heridas. Durante un experimento de cinco semanas, se encontró que la puntuación del nido se correlacionaba negativamente con el número promedio de ratones machos C 57 negros heridos seis.
Estos datos muestran que un procedimiento quirúrgico doloroso puede alterar el comportamiento de construcción de nidos. El número de animales con un tinte negativo aumentó en aproximadamente un 60% después de una cirugía dolorosa, pero los ratones volvieron a los niveles basales positivos tres días después de la operación mientras intentaban este procedimiento. Es importante recordar que, si bien se ha demostrado que el método de puntuación tiene una alta confiabilidad entre evaluadores y entre evaluadores, esa variabilidad en la puntuación puede afectar sus resultados.
Por lo tanto, asegúrese de entrenar y evaluar adecuadamente la variabilidad de sus puntuaciones antes de comenzar su experimento, siguiendo el procedimiento. Se pueden realizar otros métodos, como la observación directa o las pruebas de comportamiento, para responder preguntas adicionales sobre la salud y el bienestar o los déficits de comportamiento de los ratones. Después de ver este video, debería tener una buena comprensión de cómo dividir un nido en cuadrantes, cómo marcar un nido y cómo administrar el tiempo para integrarse a la prueba del nido.
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