Aislamiento y cultivo de ratón adulto cardiomiocitos de Señalización Celular y In vitro Hipertrofia Cardíaca

[Narrador] El objetivo general de este procedimiento es producir una preparación consistente para el cultivo de cardiomiocitos de ratón adultos funcionales. Primero retire el corazón del ratón bajo anestesia y canulación. Perfunde el corazón y digiere con colagenasa. Luego disociar las células y reintroducir el calcio. A continuación, siembra las células y cultivo de los cardiomiocitos primarios. Los resultados de los ensayos de inmunotransferencia y leucina tritiada pueden demostrar funciones como la activación de la fosforilación de AKT dependiente de PI3 quinasa y el aumento de la tasa de síntesis de proteínas inducida por la ouabaína.

- Después del aislamiento del corazón, ventile rápidamente la aorta de muchos otros vasos, luego manipule la aorta con mucho cuidado y conéctela rápidamente en el primer intento. Con la práctica, podrá determinar cuándo detener la digestión de la colagenasa del corazón controlando con precisión el cambio de color y suavidad.