Análisis de dolor en roedores y farmacoterapia intracraneal

Aquí presentamos un protocolo para llevar a cabo experimentos farmacológicos intracraneales seguidos por análisis de comportamiento del dolor en roedores. Este protocolo permite a los investigadores ofrecer objetivos moleculares y celulares en el cerebro, de agentes farmacológicos en el tratamiento del dolor.

La principal ventaja de esta técnica es que se puede utilizar para explorar más a fondo los mecanismos del dolor y las acciones de drogas en el cerebro. Para estudiar el efecto de las inyecciones intracraneales en el comportamiento agudo del dolor en ratas, una semana después de la cirugía, coloque la rata en la placa de vidrio de un aparato Hargreaves, y utilice el aparato para enfocar un haz infrarrojo a través del plano de vidrio debajo de la zona plantar de uno de los pies de la rata. Para estudiar los efectos farmacológicos sinérgicos entre dos fármacos de estudio diferentes, utilice una pieza de tubo PE-50 unido a una jeringa Hamilton de 10 microlitros equipada con una cánula de inyector de calibre 33 que se extiende un milímetro más allá de las guías implantadas.

Inyectar 0,5 microlitros o menos del fármaco del estudio en una cánula intracraneal durante un período de 100 segundos. Mantenga la cánula del inyector en su lugar durante 60 segundos adicionales después de la inyección para facilitar una difusión lenta de la solución. Luego, inyecte intraperitonealmente el segundo fármaco de interés.

20 a 30 minutos después de la inyección, realice la prueba de reflejo plantar cinco veces más como se ha demostrado. En este experimento representativo, la entrega intracraneal de una AMPAkine demostró un efecto analgésico aditivo cuando se administró conjuntamente con morfina entregada por vía intraperitoneal, lo que sugiere que las inyecciones intracraneales tienen el poder, al menos en parte, de descubrir un mecanismo para la activación de fármacos en el contexto del dolor. Al intentar este procedimiento, es importante recordar seguir de cerca el momento del procedimiento.

Después de este procedimiento, los implantes intracraneales se pueden utilizar junto con ensayos de dolor para responder preguntas adicionales sobre la región del cerebro responsable de un fenotipo de dolor dado, posibles sitios de acción de la droga, o posibles mecanismos de medicamentos para el dolor.