Un modelo de trasplante renal ortotópico de rata para el rechazo del aloinjerto renal

El trasplante renal ortotópico de rata es un modelo importante para investigar el mecanismo de rechazo del aloinjerto renal en estudios preclínicos y podría ayudar a desarrollar un enfoque novedoso para mejorar la supervivencia a largo plazo de los aloinjertos renales. La anastomosis de extremo a extremo de los vasos renales en esta cirugía evita la isquemia de la parte inferior del cuerpo y la trombosis de la vena cava inferior, mientras que la anastomosis del uréter en un método de túnel de extremo a lado reduce la pérdida de orina postoperatoria y la torsión del uréter. Este método proporciona información sobre la investigación de los mecanismos de rechazo inmune y la lesión de los aloinjertos renales después del trasplante de riñón.

Comience por incidir el abdomen con una tijera quirúrgica a lo largo de la línea media desde la sínfisis del pubis hasta el subxifoide. Luego abra la incisión con un retractor. Saque los intestinos del lado derecho de la incisión y envuélvalos con una gasa humedecida para evitar que se sequen.

Luego exponga el riñón izquierdo. Disociar la arteria renal izquierda y la vena usando microfórceps e hisopos de algodón de menos de 20 veces el aumento. Ligar y transectar la vena suprarrenal y la vena genital si es necesario.

Disociar el uréter con la ayuda de microfórceps, preservando los tejidos conectivos periféricos para garantizar el suministro de sangre al uréter. Disociar y cortar o ligar la aorta aproximadamente cinco milímetros por encima de la arteria renal izquierda con una pinza vascular o sutura de monofilamento de poliamida 4-0. Luego transecte la vena renal izquierda distal a la conjunción de la vena genital izquierda y la vena suprarrenal.

Usando una aguja de bisturí calibre 24, enjuague el riñón de la aorta debajo de la arteria renal izquierda con una solución de UW helada suplementada con 100 unidades por mililitro de heparina hasta que la sangre se desvanezca en color. Transecte la arteria renal izquierda junto a la aorta, luego transecte el uréter junto a la vejiga y disocie el riñón con la ayuda de microfórceps y tijeras. Conserve el riñón izquierdo del donante en una solución de UW helada.

Con un aumento de menos de 20 veces, disocie la arteria renal izquierda y la vena renal de la rata receptora con hisopos de algodón y microfórceps. Ligar la vena suprarrenal y la vena genital si es necesario. Recorte la arteria renal izquierda y la vena renal en la raíz con pinzas microvasculares, luego transecte la arteria renal y la vena renal a tres milímetros de distancia de la pinza microvascular.

Disociar y ligar el uréter izquierdo aproximadamente dos o tres centímetros por debajo del riñón con un 8-0 sutura de monofilamento de poliamida y transectarlo en la ligadura. Reseque los receptores nativos del riñón izquierdo disociando el riñón con la ayuda de microfórceps y tijeras. Implantar el riñón del donante en la fosa renal izquierda de la rata receptora y colocar hielo alrededor del riñón del donante implantado.

Cambie a 45 veces el aumento, luego anastomose la arteria renal y la vena renal de los donantes a la arteria renal y la vena renal receptoras en un patrón de extremo a extremo utilizando suturas de monofilamento de poliamida 10-0. Para anastomosar la arteria renal con suturas interrumpidas, coloque las suturas de estancia a las 12 y seis en punto de la anastomosis. Sutura equidistante un lado de la anastomosis entre las dos suturas de permanencia con dos o tres puntos de sutura.

Voltee las suturas de estancia y suture de manera similar el otro lado de la anastomosis entre las dos suturas de estancia con dos o tres puntos de sutura. Para anastomosear la vena renal con suturas continuas, coloque las suturas de estancia en las posiciones de las seis y 12 en punto de la anastomosis. Sutura un lado de la anastomosis desde la posición de las 12 en punto con cuatro a cinco puntos de sutura usando las suturas de carrera.

Gire las suturas de la estancia y, de manera similar, suture el otro lado de la anastomosis desde la posición de las seis en punto. Vuelva a perfundir el riñón del donante liberando la pinza microvascular no invasiva de la vena renal, identifique los sitios de sangrado y haga puntos adicionales si es necesario. A continuación, suelte la pinza microvascular no invasiva de la arteria renal, identifique los sitios de sangrado y haga puntos adicionales si es necesario.

Con un aumento de menos de 20 veces, ligar o coser el extremo del uréter donante con una sutura de monofilamento de poliamida 4-0 como remolque para arrastrar el extremo a través del túnel de la vejiga receptora. Fijar el uréter del donante con la vejiga de los receptores cosiendo la adventicia del uréter del donante con la capa muscular de la vejiga de los receptores afuera en cuatro posiciones equidistantes usando un 8-0 sutura de monofilamento de poliamida. Después, transecte el extremo del uréter del donante con la sutura fuera de la vejiga de los receptores y permita que el uréter del donante se encoja de nuevo en la vejiga de los receptores.

Coloque los intestinos de nuevo en la cavidad abdominal y cierre la incisión abdominal con suturas continuas en la capa muscular y luego la capa de la piel con una sutura de monofilamento de poliamida 4-0. A las diez semanas después del trasplante, la tinción de hematoxilina y eosina y la tinción periódica por cambio de ácido revelaron esclerosis glomerular, fibrosis intersticial, atrofia tubular y esclerosis arterial intersticial en el aloinjerto renal en contraste con el riñón isoismbrado. La tinción de plata mostró el engrosamiento de la membrana basal glomerular en el riñón aloinjerto en comparación con el riñón isogrino, lo que indica el éxito del modelo de trasplante renal ortotópico de rata.

Debido a que el orificio vascular del riñón es muy delgado, para evitar la sutura incorrecta, recuerde realizar la anastomosis en el campo de alta ampliación.