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DOI: 10.3791/64315-v
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This study presents a protocol for preparing multicellular 3D tumor spheroids using lung adenocarcinoma cells, fibroblasts, and monocytes. It emphasizes the role of the tumor microenvironment in activating cancer-associated fibroblasts (CAFs) and explores mitochondrial health in these cells.
Se prepararon esferoides tumorales 3D multicelulares con células de adenocarcinoma de pulmón, fibroblastos y monocitos, seguidos del aislamiento de fibroblastos asociados al cáncer (CAF) de estos esferoides. Los CAF aislados se compararon con fibroblastos normales para evaluar la salud mitocondrial mediante el estudio del potencial transmembrana mitocondrial, las especies reactivas de oxígeno y las actividades enzimáticas.
Este protocolo destaca la importancia del microambiente tumoral en la activación de los fibroblastos asociados al cáncer o CAF. Podría ser un excelente modelo in vitro para estudiar las características fenotípicas. Las principales limitaciones en la biología de CAF radican en la disponibilidad limitada de CAF a partir de muestras de biopsia de tumor primario.
Por lo tanto, esta técnica se puede utilizar para estudiar diversos aspectos de la biología de CAF. Este estudio muestra la producción cruzada aberrante y la disfunción mitocondrial asociada con la activación de CAF que conduce a un mal pronóstico tumoral. La aplicación de este método sería útil para evaluar las interacciones traumáticas del tumor, particularmente la activación de CAF y la salud mitocondrial.
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