Estrés crónico de derrota social en ratones machos adolescentes tempranos

Nuestra investigación tiene como objetivo identificar las anomalías a nivel de circuito que resultan de la exposición al trauma durante varias etapas del desarrollo neurológico, hemos desarrollado un modelo de trauma físico en la adolescencia temprana para comprender mejor el impacto del trauma infantil en el funcionamiento del cerebro adulto. Los profesionales de la salud conductual están viendo un aumento en los pacientes que sufren los impactos duraderos del abuso infantil. Sin embargo, la mayoría de las investigaciones actuales sobre roedores se centran en la exposición al trauma en la edad adulta o en el impacto de la negligencia infantil.

Ninguno de estos aborda directamente los desafíos únicos que se observan en los adultos que tienen un historial de abuso infantil. Nuestro protocolo produce un fenotipo evitativo consistente en más de dos tercios de los animales derrotados en la edad adulta. Además, mediante el uso de machos más jóvenes sin experiencia reproductiva alojados con hembras, nuestro protocolo es capaz de producir machos CFW robustamente agresivos sin el uso de ratones B6 adultos adicionales para instigar la agresión, lo que aumenta la facilidad y la minuciosidad del protocolo.

Nuestra investigación ayudará a contribuir a la creciente comprensión de cómo la exposición al trauma en diferentes etapas del desarrollo tiene un impacto biológico, conductual y anatómico único en el cerebro, y esperamos ayudar en el nuevo desarrollo de tecnologías de tratamiento para personas que han experimentado abuso infantil. Para empezar, empareje a los machos CFW con las hembras CFW OVX durante una semana para permitir la experiencia sexual y aumentar la agresión territorial en el macho. Después de una semana, retira a la hembra CFW OVX de la jaula y colócala en una jaula limpia y vacía.

A continuación, introduzca el estímulo C57 macho en la jaula con el macho CFW durante un minuto y registre la latencia del ataque. A continuación, retire el estímulo C 57 macho y vuelva a colocar a la hembra CFW OVX en la jaula con el macho CFW antes de devolverlos a la sala de alojamiento Grupos de machos CFW que no atacan o muestran una latencia de ataque de más de 30 segundos en dos o más días. Utilice estos machos CFW no agresivos como animales de estímulo durante las pruebas de interacción social en campo abierto.

Cuando los machos C57 adolescentes tengan cuatro semanas de edad, pesa cada animal y registra el peso. Separe los animales en dos cohortes iguales, control y derrotado, asegurándose de que los pesos entre las dos cohortes no sean significativamente diferentes. Aloje un adolescente de control C57 en un lado de un tabique de plexiglás con otro adolescente de control C57 en el otro lado del tabique.

En la casa del día 11, cada adolescente de control al lado de un adolescente de control diferente con una partición de plexiglás entre los dos durante el resto del experimento. Pesar y registrar el peso del C57 adolescente que va a ser derrotado. Las heridas de más de cuatro milímetros de diámetro, que se muestran aquí a escala, requieren la eutanasia inmediata del animal de prueba.

A continuación, retire la hembra CFW OVX de la jaula con el macho CFW residente y colóquela con otras hembras OVX. Después, introduzca al adolescente C 57 en la jaula del macho CFW residente y ponga en marcha el cronómetro. Retire al adolescente de la jaula después de 30 mordeduras o cinco minutos, lo que ocurra primero y registre los datos del ataque.

A continuación, coloque el tabique de plexiglás en el centro de la jaula del residente masculino de CFW, asegurándose de que el residente de CFW esté de un lado y el adolescente derrotado del otro. El día 11, aloje a los adolescentes derrotados junto a otros adolescentes derrotados con una partición de plexiglás entre ellos durante la duración del experimento. Habitúa a los animales de control y derrotados a la sala de pruebas durante una hora.

Grabe todas las sesiones con el software de seguimiento de animales. Coloque la copa de alambre contra la pared izquierda de la arena acrílica de 44 por 44 por 44 centímetros en el punto medio de la pared. Dibuja una zona de interacción circular de dos centímetros alrededor de la taza.

Ahora coloque el C 57 en la esquina de la arena con un vaso de alambre vacío durante 150 segundos. A continuación, retira el C 57 de la arena y colócalo en una jaula limpia y vacía. Coloque un macho adulto CFW no agresivo y desconocido dentro de la copa de alambre y coloque la copa de alambre dentro de la arena.

Vuelva a introducir el C 57 en la arena con la copa de alambre que contiene CFW durante 150 segundos. Después de devolver a ambos animales a sus respectivas jaulas, limpie la arena con agua y etanol al 70% para limpiar cualquier área con orina o heces antes de probar el próximo C 57. Calcule la cantidad de tiempo que cualquier punto del cuerpo está dentro de la zona de interacción tanto para la sesión con el vaso vacío como para la sesión con el vaso que contiene CFW.

Divida el tiempo que se pasa en la zona de interacción con el vaso que contiene CFW por el tiempo que se pasa en la zona de interacción con el vaso vacío para producir la relación de interacción social. Realice la interacción social en campo abierto en cualquier momento después del período de derrota de 10 días, dependiendo de la ventana de desarrollo de interés. Los animales derrotados mostraron una reducción significativa tanto en la relación de interacción social como en el tiempo bruto de interacción social en comparación con los controles en todos los puntos de tiempo probados.

La reducción más pronunciada en la relación de interacción social y el tiempo ocurrió dos semanas después de la derrota, cuando los animales derrotados mostraron un mayor tiempo que pasaban con una taza vacía. Los mapas de calor confirmaron que los ratones derrotados pasaron más tiempo en las esquinas y menos tiempo en la zona de interacción en todos los puntos de tiempo.