Name: Induite par le virus Gene Silencing (VIGS) dans Nicotiana benthamiana Et aux tomates (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-06-10T00:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 34 s
Description: Apprenez le silençage génique induit par virus (VIGS) pour l'étude de la fonction des gènes chez Nicotiana benthamiana et la tomate. Cette méthode d'infiltration bactérienne permet une répression transitoire rapide de l'expression génique.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Nous remercions le Dr Patricia Manosalva pour ses précieuses sur le manuscrit. Le financement a été fourni par le Programme National Science Foundation génome des plantes, le nombre récompense DBI-0605059.

Partie 1: Les matières végétales N. benthamiana utilisées pour faire taire devrait être d&#39;environ 2 ½ semaines qui est le moment où les cotylédons et les 2 premiers - 4 vraies feuilles ont émergé. Tomate (Solanum lycopersicum) les plantes sont utilisées de 7 à 8 jours après l&#39;émergence, quand les feuilles vraies ne sont pas encore apparues. Partie 2: VIGS JOUR 1 <ol><li> Pour chaque expérience, Agrobacterium tumefaciens hébergeant pTRV1, pTRV2, pTRV2-PDS et gène cible pTRV2-hôtes sont cultivées sur des plaques d&#39;agar LB additionné de 50 pg / ml de kanamycine et 100 pg / mL de rifampicine. La kanamycine sélectionne pour la pTRV plasmide alors que la rifampicine fait pour l&#39;Agrobacterium. Incuber la plaque à 30 ° C pendant 2 jours. Désactivation du PDS causera les plantes à photobleach et est utilisé comme un contrôle d&#39;efficacité taire. En outre, les gènes à régulation négative doit être cloné dans un vecteur pTRV2. Il ya une passerelle compatible pTRV2 vecteur qui peut faciliter le clonage et est décrit par Liu et al. (2002). </li></ol> JOUR 3 <ol><li> Inoculer un 2 - 3 ml de culture liquide de LB avec les antibiotiques mentionnés ci-dessus pour chacune des souches. Incuber en secouant à 30 ° C pendant 16 - 18 heures et 200 tours par minute </li></ol> JOUR 4 <ol><li> Inoculer un 1: 25 de dilution de la culture primaire dans un média secondaire induction liquide (IM) la culture de messagerie instantanée avec la kanamycine, la rifampicine et 200 acétosyringone uM (tableaux 1, 2 et 3). Le acétosyringone est utilisé comme un inducteur des gènes vir d&#39;Agrobacterium qui sont requis pour le transfert de l&#39;ADN-T dans la plante 9 tandis que le MI imite l&#39;environnement de cette rencontre de pathogènes dans l&#39;apoplaste hôte. Incuber en secouant à 30 ° C pendant 20 - 24 heures et 200 tours par minute </li></ol> JOUR 5 <ol><li> Récolter les cellules par centrifugation pendant 10 minutes à 3000 x g. Remettre en suspension dans le même volume que la culture d&#39;origine a eu avec 10 mM MgCl2, 10 mM MES pH 5,5. Les cellules peuvent être vortexés doucement à les remettre en suspension. </li><li> Centrifugue les cellules pendant 10 minutes à 3000 x g. Remettre en suspension dans la moitié du volume de la culture d&#39;origine avec 10 mM MgCl2, 10 mM MES pH 5,5. </li><li> Préparer une suspension bactérienne avec une DO 600 de 0,3 pour chaque culture bactérienne. Ajouter acétosyringone à une concentration finale de 400 uM à la culture pTRV1. </li><li> Mélanger les cultures contenant de la pTRV1 et le pTRV2 (ou le pTRV2 contenant le gène d&#39;intérêt) dans un rapport 1 pour 1. Incluent également un contrôle pTRV2-PDS. S&#39;il vous plaît noter que la concentration finale est maintenant acétosyringone 200 uM et que chaque culture est à une DO 600 de 0,15. </li><li> Étiqueter les semis d&#39;être infiltré par le gène de se taire et la date de l&#39;expérience. </li><li> Percer un trou dans chaque feuille doit être infiltré avec une aiguille. Utiliser une seringue de 1 mL inutiles pour infiltrer la suspension bactérienne dans le semis. Pour la tomate, infiltrer deux cotylédons tandis que pour N. benthamiana, infiltrer les deux plus grandes feuilles vraies. Cinq ml de chaque mélange bactérien devrait être suffisant pour infiltrer 15 N. benthamiana et 25 plants de tomates. Évitez la contamination croisée en changeant de gants entre les infiltrations et par ne pas arroser les plantes avant le lendemain après l&#39;inoculation. </li><li> Les plantes sont maintenus à 20 - 22 ° C dans une chambre de croissance avec une longueur de journée de 16 heures et 50% HR pendant au moins 3 semaines et demie avant qu&#39;ils peuvent être utilisés pour les dosages. </li></ol> Partie 3: Les résultats représentatifs La figure 1 montre une expérience représentative avec N. benthamiana et des plants de tomates réduites au silence pour PDS. Plantes montrer le phénotype caractéristique de photoblanchiment observée dans les usines avec des quantités diminuées de caroténoïdes. Pour la PDS-taire des plantes témoins, commence photoblanchiment d&#39;être vu dès que 1 ½ semaines après l&#39;infiltration. <img src="/files/ftp_upload/1292/Figure 1A 1292.jpg" alt="Figure 1a" /><img src="/files/ftp_upload/1292/Figure 1B 1292.jpg" alt="figure 1b" /> Figure 1. Désactivation du gène de contrôle du PDS cause photoblanchiment de N. benthamiana (A) et la tomate (B) des plantes. Les photographies ont été prises trois semaines et demi après taire. Tableau 1. Préparation du milieu d&#39;induction (GI). <table border="1" cellspacing="0" cellpadding="0"><tbody><tr><td> 400 ml </td><td> H 2 O distillée </td></tr><tr><td> 4,88 g </td><td> MES (2 - (4 morpholino) éthane sulfonique) </td></tr><tr><td> 2,5 g </td><td> Le glucose </td></tr><tr><td> 0,12 g </td><td> NaH 2 PO 4 </td></tr></tbody></table> Porter à un volume final de 475 ml avec dH 2 O et ajuster le pH à 5,6. Autoclave. Après que le milieu est refroidi, ajouter 25 ml de sels AB 20X. Tableau 2. Préparation de sels AB. <table border="1" cellspacing="0" cellpadding="0"><tbody><tr><td> 20 g </td><td> NH 4 Cl </td></tr><tr><td> 6 g </td><td> MgSO 4 · 7H 2 O </td></tr><tr><td> 3 g </td><td> KCl </td></tr><tr><td> 0,2 g </td><td> CaCl 2 </td></tr><tr><td> 0,05 g </td><td> FeSO 4 · 7H 2 O </td></tr></tbody></table> Porter à un volume final de 1 litre avec de l&#39;eau distillée. Autoclave. Soyez conscient que les sels AB précipiter sous forme d&#39;une poudre orange. Il suffit de les mélanger en remuant avant leur utilisation. Tableau 3. Préparation de 200 acétosyringone mM. S&#39;il vous plaît noter que acétosyringone doivent être préparés le jour où il sera utilisé. <table border="1" cellspacing="0" cellpadding="0"><tbody><tr><td> 19,6 mg </td><td> Acétosyringone (3 &#39;, 5&#39;-diméthoxy-4&#39;-hydroxyacétophénone) </td></tr><tr><td> 500 ul </td><td> DMSO (diméthylsulfoxyde) </td></tr></tbody></table>

<ol><li>Voinnet, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA+silencing+as+a+plant+immune+system+against+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Genet%22%5BJournal%5D)">RNA silencing as a plant immune system against viruses.</a> Trends Genet. 17, 449-459 (2001).</li>
<li>Carrington, J. C., Ambros, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+microRNAs+in+plant+and+animal+development%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Role of microRNAs in plant and animal development.</a> Science. 301, 336-338 (2003).</li>
<li>Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+microRNA+as+a+translational+repressor+of+APETALA2+in+Arabidopsis+flower+development%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">A microRNA as a translational repressor of APETALA2 in Arabidopsis flower development.</a> Science. 303, 2022-2025 (2004).</li>
<li>Palatnik, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+leaf+morphogenesis+by+microRNAs%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Control of leaf morphogenesis by microRNAs.</a> Nature. 425, 257-263 (2003).</li>
<li>Brigneti, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viral+pathogenicity+determinants+are+suppressors+of+transgene+silencing+in+Nicotiana+benthamiana%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+J%22%5BJournal%5D)">Viral pathogenicity determinants are suppressors of transgene silencing in Nicotiana benthamiana.</a> EMBO J. 17, 6739-6746 (1998).</li>
<li>Liu, Y., Schiff, M., Dinesh-Kumar, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Virus-induced+gene+silencing+in+tomato%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Journal%22%5BJournal%5D)">Virus-induced gene silencing in tomato.</a> Plant Journal. 31, 777-786 (2002).</li>
<li>MacFarlane, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+biology+of+the+tobraviruses%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gen.+Virol%22%5BJournal%5D)">Molecular biology of the tobraviruses.</a> J. Gen. Virol. 80, 2799-2807 (1999).</li>
<li>Senthil-Kumar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+study+to+determine+the+extent+of+gene+silencing+in+Nicotiana+benthamiana+and+other+Solanaceae+species+when+heterologous+gene+sequences+are+used+for+virus-induced+gene+silencing%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytol%22%5BJournal%5D)">A systematic study to determine the extent of gene silencing in Nicotiana benthamiana and other Solanaceae species when heterologous gene sequences are used for virus-induced gene silencing.</a> New Phytol. 176, 782-791 (2007).</li>
<li>McCullen, C. A., Binns, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agrobacterium+tumefaciens+and+plant+cell+interactions+and+activities+required+for+interkingdom+macromolecular+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Cell+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Agrobacterium tumefaciens and plant cell interactions and activities required for interkingdom macromolecular transfer.</a> Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 22, 101-127 (2006).</li>
<li>Rosebrock, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+bacterial+E3+ubiquitin+ligase+targets+a+host+protein+kinase+to+disrupt+plant+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A bacterial E3 ubiquitin ligase targets a host protein kinase to disrupt plant immunity.</a> Nature. 448, 370-374 (2007).</li>
<li>Miki, D., Itoh, R., Shimamoto, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA+silencing+of+single+and+multiple+members+in+a+gene+family+of+rice%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiol%22%5BJournal%5D)">RNA silencing of single and multiple members in a gene family of rice.</a> Plant Physiol. 138, 1903-1913 (2005).</li>
<li>Voinnet, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use%2C+tolerance+and+avoidance+of+amplified+RNA+silencing+by+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">Use, tolerance and avoidance of amplified RNA silencing by plants.</a> Trends Plant Sci. 13, 317-328 (2008).</li>
<li>Ekengren, S. K., Liu, Y., Schiff, M., Kumar-Dinesh, S. P., Martin, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+MAPK+cascades%2C+NPR1%2C+and+TGA+transcription+factors+play+a+role+in+Pto-mediated+disease+resistance+in+tomato%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+J%22%5BJournal%5D)">Two MAPK cascades, NPR1, and TGA transcription factors play a role in Pto-mediated disease resistance in tomato.</a> Plant J. 36, 905-917 (2003).</li>
<li>Liu, E., Page, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+cDNA+libraries+for+virus-induced+gene+silencing+%28VIGS%29+using+tobacco+rattle+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Plant.+Methods%22%5BJournal%5D)">Optimized cDNA libraries for virus-induced gene silencing (VIGS) using tobacco rattle virus.</a> Plant. Methods. 4, 5-5 (2008).</li>
</ol>

Induite par le virus gene silencing est une méthode qui permet rapidement inversée écrans génétique. Il évite la génération de T-ADN ou le gène médié transposon knock-outs, qui ne sont disponibles que dans certaines plantes comme Arabidopsis et le maïs. Il contourne le processus fastidieux de transformation des plantes et permet le ciblage de gènes multiples dans le même temps, à condition qu&#39;ils aient une homologie suffisante 10 ou que les différentes séquences cibles d&#39;hôte sont disposés en...

induite par le virus gene silencing (vigs) dans nicotiana benthamiana et aux tomates

Virus-induced Gene Silencing (VIGS) in Nicotiana benthamiana and Tomato

L&#39;interférence ARN (ARNi) est un très spécifiques de silençage génique phénomène déclenché par une ARNdb. Ce mécanisme utilise taire deux grandes classes de régulateurs d&#39;ARN: les microARN, qui sont produites à partir non des gènes codant des protéines et des courts ARN interférents (siRNA). Les plantes utilisent l&#39;ARNi pour contrôler les transposons et d&#39;exercer un contrôle serré sur les processus de développement tels que la formation des organes de fleurs et de 2,3,4 développement des feuilles. Plantes également utiliser l&#39;ARNi pour se défendre contre l&#39;infection par des virus. En conséquence, de nombreux virus ont évolué suppresseurs de gènes taire pour permettre leur colonisation réussie de leur hôte 5. Induite par le virus gene silencing (VIGS) est une méthode qui prend avantage de l&#39;usine de l&#39;ARNi à médiation mécanisme de défense antivirale. Chez les plantes infectées par des virus non modifiés, le mécanisme est spécifiquement ciblées contre le génome viral. Cependant, avec des vecteurs viraux portant des séquences dérivées de gènes de l&#39;hôte, le processus peut en outre être ciblées contre les ARNm hôte correspondant. VIGS a été adapté à haut débit de génomique fonctionnelle chez les plantes en utilisant la plante pathogène Agrobacterium tumefaciens pour offrir, via son plasmide Ti, un virus recombinant portant la totalité ou une partie de la séquence du gène ciblé pour réduire au silence. La propagation du virus systémique et les plantes endogènes ARNi machines prendre soin du reste. dsRNA correspondant au gène cible sont produites et ensuite clivée par la ribonucléase Dicer en siRNA de 21 à 24 nucléotides de long. Ces siRNA finalement guider la RNA-Induced Silencing complexes (RISC) à dégrader la transcription cible 2. Différents vecteurs ont été utilisés dans VIGS et l&#39;un des plus fréquemment utilisée est basée sur le tabac hochet virus (TRV). VRT est un virus bipartite et, comme tels, A. différentes deux tumefaciens souches sont utilisées pour VIGS. On réalise pTRV1, qui code les fonctions de réplication virale et le mouvement tandis que l&#39;autre, pTRV2, ports la protéine d&#39;enveloppe et de la séquence utilisée pour VIGS 6,7. L&#39;inoculation de Nicotiana benthamiana et plants de tomates avec un mélange de souches des résultats aussi bien dans le silençage génique. Désactivation de l&#39;endogènes phytoène désaturase (PDS) du gène, ce qui provoque photoblanchiment, est utilisé comme un contrôle d&#39;efficacité VIGS. Il faut noter, cependant, que l&#39;inhibition de la tomate est généralement moins efficace que dans N. benthamiana. L&#39;abondance de transcription d&#39;ARN du gène d&#39;intérêt doit toujours être mesuré afin de s&#39;assurer que le gène cible a été efficacement régulé à la baisse. Néanmoins, les séquences de gènes hétérologues de N. benthamiana peut être utilisé pour réduire au silence leurs orthologues chez la tomate et 8 vice-versa.

Description d&#39;une induite par le virus gene silencing (VIGS) méthode pour le knock-down de l&#39;expression génique dans le<em&gt; Nicotiana benthamiana</em&gt; Et la tomate.

Induite par le virus Gene Silencing (VIGS) dans Nicotiana benthamiana Et aux tomates

L'interférence ARN (ARNi) est un phénomène de silençage génique hautement spécifique déclenché par l'ARNdb1. Ce mécanisme de silençage utilise deux classes majeures d'ARN...

Le protocole d'interférence ARN induite par un virus commence par la culture des souches d'aphasiens. PT RV un, PT RV deux pt, RV deux PT S et PT RV deux gène cible sur des boîtes de gélose LB. Deux jours plus tard, ces souches sont inoculées dans du LB liquide et cultivées toute la nuit.Cette culture est ensuite utilisée pour inoculer une culture liquide secondaire dans un milieu d'induction, elle aussi cultivée toute la nuit. Le jour suivant, une suspension bactérienne de chaque culture est préparée, puis le PT RV un et le PT RV deux, ou le gène cible du PT RV deux, sont mélangés selon un rapport un pour un. Le mélange bactérien est ensuite infiltré dans des plantules d’endive ou de tomate à l’aide d’une seringue sans aiguille.Bonjour, je suis Andre Velazquez du laboratoire de Greg Martin au Département de pathologie végétale et de microbiologie végétale de l'Université Cornell. Aujourd'hui, nous allons vous montrer comment réaliser un silençage génique induit par un virus chez la tomate et chez le Nicotiana. Nous utilisons cette procédure dans notre laboratoire pour étudier les interactions entre un agent pathogène végétal et son hôte.Commen&ccedil;ons. Pour commencer cette proc&eacute;dure a

virus-induced-gene-silencing-vigs-in-nicotiana-benthamiana-and-tomato

Research

Recherche

JoVE Journal

Biology

Biologie

Nous présentons le protocole détaillé pour Agrobacterium induite par le virus du gène taire (VIGS) de dosage dans le coton. Le virus du rattle (VRT) vecteurs dérivés VIGS ont été déployés pour inciter RNA silencing de coton GrCLA1, alterados Cloroplastos une gène. Le phénotype albinos causés par faire taire GrCLA1 ​​a été observée au stade plantule dans les 2 semaines après l'inoculation.

Agrobacterium induite par le virus Assay Gene Silencing En Coton

Source : Shi, J., et al. Dépistage et identification des suppresseurs de silencieux d’ARN à partir des effecteurs sécrétés de pathogènes des plantes. J. Vis. Exp. (2020)Cette vidéo montre un essai de co-infiltration permettant d’identifier les protéines effectrices pathogènes qui suppriment le silence de l’ARN dans Nicotiana benthamiana 16c. Un reporter fluorescent et un gène effecteur candidat sont délivrés dans les feuilles des plantes via Agrobacterium. Normalement, le silence de l’ARN...

Essai de co-infiltration pour le dépistage des effecteurs pathogènes qui suppriment le silence de l’ARN végétal

L’agroinfiltration et l’agroinfection PVX sont des tests fonctionnels de routine pour l’expression ectopique transitoire des gènes dans les plantes. Ces méthodes sont des tests efficaces dans les stratégies effectoromiques (résistance rapide et découverte de gènes avirulence) et cruciales pour la recherche moderne en pathologie moléculaire des plantes. Ils répondent à la demande d’analyses fonctionnelles robustes à haut débit dans les usines.

Agroinfiltration et PVX Agroinfection dans la pomme de terre et Nicotiana benthamiana

Induite par le virus gene silencing est un outil utile pour identifier les gènes impliqués dans la résistance non hôte des plantes. Nous démontrons l'utilisation d'agents pathogènes bactériens exprimant GFPuv dans l'identification des gènes des plantes silencieux sensibles aux pathogènes non hôtes. Cette approche est simple, rapide et facilite le dépistage à grande échelle et un protocole similaire peut être appliquée à l'étude de divers autres interactions plantes-microorganismes.

VIGS-Mediated dépistage génétique avant pour l&#39;identification des gènes impliqués dans la résistance non hôte

La production de protéines dans les plantes de Nicotiana transitoire basée sur l'infiltration sous vide avec Agrobacteria transportait des vecteurs de lancement (virus de la mosaïque à base de tabac) est une approche rapide et économique pour produire des antigènes de vaccins et de protéines thérapeutiques. Nous avons simplifié la procédure et amélioré l'accumulation de cible en optimisant les conditions de culture de bactéries, la sélection des espèces hôtes, et co-introduction de RNA...

Optimisation et l&#39;utilisation des<em&gt; Agrobacterium</em&gt; Médiée par la production de protéines transitoire dans<em&gt; Nicotiana</em

L’expression hétérologue transitoire des enzymes biosynthétiques dans les feuilles de Nicotiana benthamiana peut détourner les fournitures endogènes de 2,3-oxidosqualene vers la production de nouveaux produits de haute valeur triterpène. Ici est décrit un protocole détaillé pour la production à l’échelle préparative rapide (5 jours) de triterpènes et analogues utilisant cette plate-forme puissante à base de plantes.

Expression transitoire de Nicotiana Benthamiana quitte pour triterpène Production à l’échelle préparative

Ici, nous présentons une méthode polyvalente pour la transformation des racines de tomate suivie de l’inoculation avec Ralstonia solanacearum pour effectuer l’analyse génétique simple pour l’étude de la maladie bactérienne de flétrir.

Transformation des racines de tomate suivie de l’inoculation avec Ralstonia Solanacearum pour l’analyse génétique directe de la maladie bactérienne de wilt

Ici, nous présentons une méthode de criblage modifiée qui peut être employée intensivement pour examiner rapidement des suppresseurs de silençage d'ARN dans les agents pathogènes de plante.

Dépistage et identification des suppresseurs de silençage de l'ARN des agents d'effets sécrétés des pathogènes végétaux

Nous présentons un protocole détaillé pour le système de silençage microARN (VbMS) à base du virus X de la pomme de terre (PVX) pour caractériser fonctionnellement les microARN endogènes (miARN) dans la pomme de terre. Les molécules d’imitation cible (TM) de miARN d’intérêt sont intégrées dans le vecteur PVX et exprimées transitoirement dans la pomme de terre pour faire taire la famille de miARN ou miARN cible.

MicroARN À base de virus de la pomme de terre X Silençage (VbMS) dans la pomme de terre.

Un protocole d’injection (agroinjection) à base d’Agrobacterium est présenté pour l’inoculation du virus de la mosaïque de la queue de renard et du virus de la mosaïque de la canne à sucre dans les semis de maïs. L’inoculation de cette manière conduit à une infection virale, à un silençage génique induit par le virus des gènes marqueurs et à une surexpression virale de GFP.

Agroinoculation directe de plants de maïs par injection avec le virus recombinant de la mosaïque de la queue de renard et le virus de la mosaïque de la canne à sucre Clones infectieux

Nous présentons ici le premier protocole d’infiltration sous vide localisée pour des études in vivo de la transformation génétique de plantes de grande taille. En utilisant cette méthodologie, nous avons réalisé pour la première fois la transformation transitoire du cacao par Agrobacterium in planta .

Agro-infiltration forcée sous vide pour la transformation in planta de plantes récalcitrantes : le cacao comme étude de cas

Apprenez le silençage génique induit par virus (VIGS) pour l'étude de la fonction des gènes chez Nicotiana benthamiana et la tomate. Cette méthode d'infiltration bactérienne permet une répression transitoire rapide de l'expression génique.

Induite par le virus Gene Silencing (VIGS) dans Nicotiana benthamiana Et aux tomates

Explorer plus de vidéos