0 vues • 3:10 min • April 30th, 2023
- Commencez par des œufs granulés isolés par des vers adultes gravides blanchissants. Assurez-vous que chaque étape de cette procédure est effectuée de manière stérile pour éviter la contamination des cellules cultivées. Mettez en suspension la pastille dans une solution de chitinase, une enzyme qui décompose la chitine, un gros polysaccharide qui est un composant structurel de la coquille de l’œuf.
Après une période de digestion appropriée, centrifugez doucement les œufs et remplacez le surnageant par un milieu de culture cellulaire pour arrêter la digestion. Ensuite, passez les embryons dans une aiguille de calibre 18 pour séparer mécaniquement les cellules individuelles. Ensuite, filtrez la solution pour éliminer les débris de la coquille de l’œuf ou des amas de cellules non séparés. Plaquez les cellules dans une boîte de culture sur une lamelle en verre recouverte d’agglutinine d’arachide - une lectine qui aide les cellules à se fixer à la lamelle en liant les glucides de surface cellulaire.
Dans l’exemple de protocole, nous préparerons des cellules embryonnaires pour la différenciation morphologique et l’analyse in vitro.
- Tout en travaillant sous une hotte à flux laminaire p
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