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L’injection intra-utérine permet l’administration de cellules d’intérêt dans la cavité utérine d’un animal receveur. Pour commencer, préparez une souris nue immunodéprimée anesthésiée dans la position latérale droite. Faites une incision chirurgicale et disséquez le muscle abdominal pour exposer sa cavité abdominale.
Localisez l’une des cornes utérines. Ces structures tubulaires sont analogues à deux utérus distincts, s’étendant des oviductes des deux côtés et s’ouvrant sur un seul col de l’utérus.
Ensuite, clampez les extrémités antérieure et postérieure de la corne pour la segmentation. Maintenant, injectez lentement la suspension de cellules cancéreuses de l’ovaire dans la lumière utérine segmentée, assurant ainsi une distribution efficace des cellules.
Par la suite, ramenez la corne utérine dans la cavité abdominale et suturez l’incision chirurgicale. Laissez la souris récupérer dans une cage.
Dans les jours qui suivent l’injection, des tumeurs se développent au site d’injection qui métastasent pour former des tumeurs secondaires dans différents tissus ou organes de la cavité péritonéale.
Pour commencer cette procédure, anesthésez une souris nue athymique âgée de 7 à 8 semaines avec 2 % d’isoflurane. Ensuite, vérifiez qu’il est complètement anesthésié en pinçant son coussinet plantaire. Ensuite, placez l’animal sur son côté droit sur un tampon de gaze stérile, la tête éloignée de l’expérimentateur. Appliquez une pommade sur les deux yeux pour prévenir la sécheresse sous anesthésie.
Ensuite, insérez rapidement la tête de l’animal dans un système de cône nasal relié à un vaporisateur d’isoflurane. Désinfectez le côté droit de l’abdomen à l’aide de tampons imbibés d’alcool suivis d’iode. Ensuite, placez le champ chirurgical stérile dessus. À l’aide de ciseaux chirurgicaux stériles et de pinces, faites une incision cutanée de 1 à 2 centimètres sur le quadrant inférieur gauche de la souris.
Après cela, soulevez le muscle et faites une incision afin d’atteindre le péritoine. Par la suite, disséquez le muscle oblique pour exposer la cavité abdominale. Ensuite, localisez la corne utérine gauche. À l’aide d’un hémostat stérile, clampez les côtés antérieur et postérieur de la corne.
Placez la pince antérieure juste en dessous de la trompe de Fallope et la pince postérieure juste au-dessus du col de l’utérus. À ce stade, demandez au deuxième expérimentateur d’injecter la suspension cellulaire en plaçant les cellules contenant l’aiguille à un angle de 45 degrés perpendiculaire à la corne. Ensuite, injectez lentement 50 microlitres de suspension cellulaire dans la lumière de la corne utérine. Ensuite, relâchez la pince antérieure suivie de la pince postérieure.
Après cela, replacez la corne utérine dans la cavité abdominale. Fermez le péritoine à l’aide d’une suture synthétique résorbable. Ensuite, fermez la peau à l’aide d’un adhésif pour tissu.
Lorsque vous avez terminé, retirez la souris du cône nasal et remettez-la dans sa cage. Assurez-vous que l’animal est éveillé et actif avant de le laisser sans surveillance. Fournir de l’ibuprofène dans l’eau potable pendant les 48 premières heures après la chirurgie.
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