Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 4:37 min • July 8th, 2025
Traiter les cultures neuronales avec des concentrations croissantes d’une toxine d’essai.
La toxine pénètre dans les cellules et est libérée dans le cytosol.
Selon son potentiel, la toxine peut empêcher la fusion vésiculaire, inhibant la libération de neurotransmetteurs.
Remplacez le milieu par un tampon contenant des composés neuropharmacologiques spécifiques pour bloquer les potentiels d’action neuronale.
Placez la boîte de culture sur une platine d’électrophysiologie. Pour commencer l’enregistrement, connectez un soma neuronal à une pipette contenant une électrode d’enregistrement.
Appliquez une pression négative constante pour aspirer une petite partie de la membrane, formant un gigaseal, un joint étanche qui garantit un minimum d’interférences pendant l’enregistrement.
Maintenir une tension membranaire constante pour mesurer les courants neuronaux.
Appliquez des impulsions de pression négative pour rompre la membrane, établissant un contact direct entre le neurone et la pipette.
Enregistrez les courants produits dans le neurone en raison de l’absorption de neurotransmetteurs, appelés mEPSC.
Une diminution de la fréquence des mEPSC avec une exposition accrue aux toxines indique
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