Génération d’une culture neuronale à ultra-faible densité à l’aide d’une couche nourricière neuronale à haute densité
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:03 min • July 8th, 2025
Commencez avec deux plaques multipuits : l’une avec un fond gravé recouvert d’un polymère et l’autre avec une lamelle recouverte de polymère.
Ensemencez une suspension à haute densité des neurones embryonnaires dans la plaque avec le fond gravé. Ajoutez une suspension de neurones à ultra-faible densité dans le couvercle contenant le puits.
Incuber pour permettre la fixation neuronale aux polymères.
Retirez la lamelle et placez-la sur la culture de neurones à haute densité, permettant aux neurones de se faire face.
La surface gravée avec des structures surélevées crée un micro-espace qui sépare les neurones de différentes densités.
La culture à haute densité agit comme une couche nourricière et sécrète le facteur de croissance neuronale.
En raison de l’espace de diffusion confiné, les facteurs de croissance s’accumulent autour des neurones, facilitant leur croissance et le développement des projections neuronales.
Introduire un milieu neurobasal avec de la cytosine arabinoside qui inhibe sélectivement la croissance des cellules non neuronales.
Remplissez régulièrement avec un milieu neurobasal frais pour maintenir la culture neuronale.
Dans cette procédure, placez des plaques à 24 p
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