Différenciation de cellules souches pluripotentes induites en cellules progénitrices neurales

Prenez une microplaque contenant une culture adhérente de fibroblastes embryonnaires de souris, ou MEF, dans un milieu.

Les MEF collés fonctionnent comme une couche nourricière, fournissant un microenvironnement de culture cellulaire favorable.

Retirez le milieu et introduisez des cellules souches pluripotentes induites humaines, ou hiPSC, dans un milieu hiPSC complété par de petites molécules qui améliorent la survie cellulaire.

Incuber pour permettre aux hiPSC d’adhérer à la couche nourricière, qui sécrète des facteurs de croissance qui facilitent la prolifération des hiPSC.

Retirez le milieu et ajoutez une solution enzymatique pour détacher les cellules. Transférez les cellules et centrifugez-les, puis retirez le surnageant et mettez-les en suspension dans le milieu hiPSC.

Transférez les cellules sur une plaque recouverte de biopolymère. Incuber pour permettre aux MEF d’adhérer.

Transférez les hiPSC suspendus dans une microplaque à fond en V. Centrifuger les cellules et les incuber, induisant la formation d’agrégats cellulaires.

Se réapprovisionner avec un milieu de différenciation. Les nutriments du milieu et les interactions cellule-cellule au sein de l’agrégat facilitent la d