Name: Un modèle dinfusion de nutriments chronique chez le rat (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-08-14T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 18 s
Description: Découvrez un modèle d'infusion chronique de glucose et d'Intralipid chez le rat pour étudier les effets de l'excès de nutriments sur l'homéostasie glucidique et la fonction bêta-cellulaire.

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Ce travail a été soutenu par le National Institutes of Health (R01DK58096 à Vincent Poitout). Vincent Poitout titulaire de la Chaire de recherche du Canada sur le diabète et la fonction des cellules bêta du pancréas. Bader Zarrouki reçu des bourses post-doctorales de Merck et Eli Lilly. Fontés Ghislaine a été soutenu par une bourse post-doctorale de l&#39;Association canadienne du diabète.

Vue d&#39;ensemble: La procédure consiste en la pose de cathéters la veine jugulaire droite et l&#39;artère carotide gauche sous anesthésie générale, qui permet une période de récupération de 7 jours, reliant les cathéters de pompes utilisant un pivot et un système de contrepoids qui permet à l&#39;animal de se déplacer librement dans la cage; et infuser le glucose et / ou de l&#39;Intralipid (une émulsion d&#39;huile de soja qui génère un mélange d&#39;environ 80% unsaturated/20% d&#39;acides gras saturés avec de l&#39;héparine lorsque infusé 9) pendant 72 heures. 1. Canulation de la veine jugulaire droite et l&#39;artère carotide gauche <ol><li> Stériliser les instruments chirurgicaux. tube de canulation doit également être stérilisé à froid en utilisant un agent de stérilisation liquide (2,6% de glutaraldéhyde) avant la procédure. Plonger le tube dans un contenant stérilisé à l&#39;autoclave pour 16-24 heures. Rincez et rincer abondamment avec de l&#39;eau distillée stérile pour éliminer toutes les traces de glutaraldéhyde avant utilisation. </li><li> Peser le rat pour calculerdosages de médicaments: Carprofen 5 mg / kg: dilution 1/10 = poids corporel (g) x 0,001 ml SC (analgésique) Glycopyrrolate 0,01 mg / kg: dilution 1/10 = BW (g) X 0,0012 ml SC (anticholinergique) </li><li> Anesthésier le rat en utilisant l&#39;isoflurane et de l&#39;oxygène. </li><li> Placez le rat sur son estomac. Raser la zone derrière les oreilles à la base des épaulements. Posez le rat sur son dos. Rasez la région sous le cou aux pattes avant. </li><li> Préparation du site chirurgical à la chlorhexidine, de l&#39;alcool, et de l&#39;iode. Administrer des médicaments. </li><li> Transférez le rat dans le domaine chirurgical. </li><li> En utilisant une technique aseptique, canulate la veine jugulaire droite et l&#39;artère carotide gauche avec un PE-50 canule attachée à une seringue de 1 ml remplie avec 5 U de sérum physiologique hépariné. Rincer les canules avec 50 U de sérum physiologique hépariné pour éviter la coagulation au cours de la période de récupération. Utiliser des aiguilles 23G émoussés. Fermez chaque canule avec une épingle 23G. </li><li> Après la chirurgie, couper environ 2,5 mm de laincisives du bas et placez le rat dans une veste de perfusion pour éviter les canules d&#39;être mangé. </li><li> Fournir de l&#39;oxygène (1 L / min pendant 10 minutes) pour aider à évacuer l&#39;isoflurane. </li><li> Placez le rat dans une cage chauffée jusqu&#39;à ce qu&#39;elle soit complètement réveillé. </li><li> Exploiter quatre rats pour utiliser un par état ​​de perfusion (tableau 1). </li></ol> 2. Soins post-opératoire (traitement post-chirurgical et de la connexion des cathéters) <ol><li> Peser les rats le jour 1 et le jour 2 post-chirurgie. </li><li> Administrer glycopyrrolate (BW (g) x 0,00048 ml) SC deux fois le 1er jour post-opératoire et une fois sur 2 jours après l&#39;intervention chirurgicale. </li><li> Traitements de soutien supplémentaires peuvent être administrés si nécessaire: fluides, tapis de chauffage, l&#39;alimentation humide, l&#39;oxygénothérapie, les analgésiques, les anticholinergiques. </li><li> Au jour 7 post-chirurgie, peser les rats pour calculer les débits de perfusion. </li><li> Connectez chaque rat à un système de perfusion à l&#39;aide d&#39;une attache et pivotante montée sur un sommet de la grille de la cage (figure 1).</li><li> Rincer les canules avec 5 U de sérum physiologique hépariné pour enlever les caillots. Rincer les canules une fois de plus avec 50 U de sérum physiologique hépariné pour empêcher la coagulation. </li><li> Laisser les rats s&#39;acclimater à la longe et pivotent pendant au moins 24 heures avant le début de la perfusion. </li></ol> 3. Infusion <ol><li> Dessiner 0,15 ml de sang de la carotide de chaque glycémie chez le rat et la mesure. Rincer les canules jugulaires. Utilisez 50 U de sérum physiologique hépariné pour empêcher la coagulation dans les deux canules de chaque rat. </li><li> Transférer l&#39;échantillon de sang pour un tube collecteur de 0,5 ml contenant 2% d&#39;EDTA. Centrifuger à 10000 rpm pendant 2 min et congeler le plasma à -20 ° C. </li><li> Remplir deux seringues de 60 ml de chacune des conditions de perfusion répertoriées ci-dessous. Lieu seringue 1 sur la position avant de la pompe et des seringues 2 place sur la position arrière de la pompe. </li><li> Rejoignez chaque paire de solutions avec raccords en Y et les tubes de T22 CO-EX qui a été stérilisé. Placez les seringues sur une Harvard 33Pompe à deux seringues. </li><li> Changez le fond de la cage et enlevez tous les aliments de la grille du haut de la cage. </li><li> Pesez 150 g de norme chow et le placer sur la grille du haut de la cage. </li><li> Branchez les seringues à l&#39;émerillon sur le gril de la cage. Rincer les seringues correctement pour éliminer l&#39;air emprisonné dans les lignes. </li><li> Calculer les débits de perfusion en utilisant le poids du corps qui a été prise avant de connecter le rat dans le système de perfusion. Les taux sont calculés avec un fichier Microsoft Excel qui convertit le débit de perfusion de glucose (GIR) en ml / h. </li><li> Régler la pompe pour administrer des débits de 60 ml seringues selon les réglages du fabricant. Entrez le taux de seringue 1 (seringue avant) et le taux de seringue 2 (arrière seringue). </li><li> Démarrer la pompe. </li></ol> 4. Surveillance <ol><li> Après le démarrage de la pompe, vérifier qu&#39;il n&#39;y a pas de fuite de la rotule ou des canules et que le tube de perfusion n&#39;est pas tordu. Vérifiez également qu&#39;il n&#39;y a pas de bulles d&#39;airla tubulure. </li><li> Après 3 heures de perfusion, prélever un échantillon de sang pour contrôler la glycémie. Répétez après 6, 24, 48, et 72 heures de perfusion. Par mesure de précaution, la glycémie est également surveillée après 30, 34, 54, et 60 h de la perfusion. La glycémie peut être mesurée à l&#39;aide d&#39;une goutte de sang total à l&#39;aide d&#39;un moniteur de glucose portable. Cela limite la quantité de sang prélevé pendant la perfusion et évite donc modifier sensiblement le volume sanguin et / ou de l&#39;hématocrite. </li><li> Le taux de seringue 1 est modifiée en fonction des valeurs de glycémie à maintenir la glycémie à 220-250 mg / dl. Le taux de seringue 2 ne change pas au cours de la perfusion de 72 heures parce que les acides gras libres sont maintenus à 1 mmol / L. </li><li> conditions liées à la perfusion sont jumelés afin que le volume reçu pour les animaux témoins est équivalent au volume reçu pour les animaux de laboratoire (tableau 1). </li><li> Après 24 heures de perfusion, changer le fond de la cage et peser les aliments restant dans la grille de la cage. Retourner la partie non consommée to la grille de la cage. Répétez après 48 h. </li><li> seringues de recharge jour au besoin au cours de l&#39;heure 72 de la perfusion. </li><li> Au cours de la perfusion, toujours observer le rat pour détecter tout signe d&#39;inflammation ou d&#39;inconfort. Administrer les soins appropriés si nécessaire. </li></ol> 5. Euthanasie post-perfusion <ol><li class="jove_content"> Après 72 heures de perfusion, les rats sont anesthésiés par voie intraveineuse avec 0,5 ml d&#39;un cocktail kétamine / xylazine (182 mg / kg de kétamine et de 11,6 mg / kg de xylazine dilué 1:2 avec du NaCl à 0,9%). </li><li class="jove_content"> Le réflexe toe-pincement est utilisé pour vérifier le niveau de l&#39;anesthésie. Anesthésique est administré supplémentaires au besoin. </li><li class="jove_content"> Lorsque le rat est anesthésié, la cavité abdominale est ouverte avec des ciseaux chirurgicaux. Le rat est saigné par tirage de 10 à 15 ml de sang dans une seringue à partir de l&#39;aorte ou la veine cave. </li></ol>

<ol><li>Poitout, V., Robertson, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucolipotoxicity%3A+fuel+excess+and+beta-cell+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Endocr.+Rev%22%5BJournal%5D)">Glucolipotoxicity: fuel excess and beta-cell dysfunction.</a> Endocr. Rev. 29, 351-366 (2008).</li>
<li>Poitout, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucolipotoxicity+of+the+pancreatic+beta+cell%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim.+Biophys.+Acta%22%5BJournal%5D)">Glucolipotoxicity of the pancreatic beta cell.</a> Biochim. Biophys. Acta. 1801, 289-298 (2010).</li>
<li>Unger, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minireview%3A+weapons+of+lean+body+mass+destruction%3A+the+role+of+ectopic+lipids+in+the+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Minireview: weapons of lean body mass destruction: the role of ectopic lipids in the metabolic syndrome.</a> Endocrinology. 144, 5159-5165 (2003).</li>
<li>Harmon, J. S., Gleason, C. E., Tanaka, Y., Poitout, V., Robertson, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antecedent+hyperglycemia%2C+not+hyperlipidemia%2C+is+associated+with+increased+islet+triacylglycerol+content+and+decreased+insulin+gene+mRNA+level+in+Zucker+diabetic+fatty+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Antecedent hyperglycemia, not hyperlipidemia, is associated with increased islet triacylglycerol content and decreased insulin gene mRNA level in Zucker diabetic fatty rats.</a> Diabetes. 50, 2481-2486 (2001).</li>
<li>Bachar, E., Ariav, Y., Cerasi, E., Kaiser, N., Leibowitz, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+nitric+oxide+synthase+protects+the+pancreatic+beta+cell+from+glucolipotoxicity-induced+endoplasmic+reticulum+stress+and+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Neuronal nitric oxide synthase protects the pancreatic beta cell from glucolipotoxicity-induced endoplasmic reticulum stress and apoptosis.</a> Diabetologia. 53, 2177-2187 (2010).</li>
<li>Peyot, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beta-cell+failure+in+diet-induced+obese+mice+stratified+according+to+body+weight+gain%3A+secretory+dysfunction+and+altered+islet+lipid+metabolism+without+steatosis+or+reduced+beta-cell+mass%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Beta-cell failure in diet-induced obese mice stratified according to body weight gain: secretory dysfunction and altered islet lipid metabolism without steatosis or reduced beta-cell mass.</a> Diabetes. 59, 2178-2187 (2010).</li>
<li>Hagman, D. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclical+and+alternating+infusions+of+glucose+and+intralipid+in+rats+inhibit+insulin+gene+expression+and+Pdx-1+binding+in+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Cyclical and alternating infusions of glucose and intralipid in rats inhibit insulin gene expression and Pdx-1 binding in islets.</a> Diabetes. 57, 424-431 (2008).</li>
<li>Fontes, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucolipotoxicity+age-dependently+impairs+beta+cell+function+in+rats+despite+a+marked+increase+in+beta+cell+mass%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Glucolipotoxicity age-dependently impairs beta cell function in rats despite a marked increase in beta cell mass.</a> Diabetologia. 53, 2369-2379 (2010).</li>
<li>Stein, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essentiality+of+circulating+fatty+acids+for+glucose-stimulated+insulin+secretion+in+the+fasted+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Essentiality of circulating fatty acids for glucose-stimulated insulin secretion in the fasted rat.</a> J. Clin. Invest. 97, 2728-2735 (1996).</li>
<li>Leahy, J. L., Cooper, H. E., Weir, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+insulin+secretion+associated+with+near+normoglycemia.+Study+in+normal+rats+with+96-h+in+vivo+glucose+infusions%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Impaired insulin secretion associated with near normoglycemia. Study in normal rats with 96-h in vivo glucose infusions.</a> Diabetes. 36, 459-464 (1987).</li>
<li>Hager, S. R., Jochen, A. L., Kalkhoff, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+resistance+in+normal+rats+infused+with+glucose+for+72+h%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Insulin resistance in normal rats infused with glucose for 72 h.</a> The American Journal of Physiology. 260, 353-362 (1991).</li>
<li>Laybutt, D. R., Chisholm, D. J., Kraegen, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+adaptations+in+muscle+and+adipose+tissue+in+response+to+chronic+systemic+glucose+oversupply+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Specific adaptations in muscle and adipose tissue in response to chronic systemic glucose oversupply in rats.</a> The American Journal of Physiology. 273, E1-E9 (1997).</li>
<li>Jonas, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+glucose+stimulates+early+response+gene+c-Myc+expression+in+rat+pancreatic+beta+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">High glucose stimulates early response gene c-Myc expression in rat pancreatic beta cells.</a> The Journal of Biological Chemistry. 276, 35375-35381 (2001).</li>
<li>Tang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose-induced+beta+cell+dysfunction+in+vivo+in+rats%3A+link+between+oxidative+stress+and+endoplasmic+reticulum+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Glucose-induced beta cell dysfunction in vivo in rats: link between oxidative stress and endoplasmic reticulum stress.</a> Diabetologia. 55, 1366-1379 (2012).</li>
<li>Alonso, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose+infusion+in+mice%3A+a+new+model+to+induce+beta-cell+replication%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Glucose infusion in mice: a new model to induce beta-cell replication.</a> Diabetes. 56, 1792-1801 (2007).</li>
<li>Magnan, C., Gilbert, M., Kahn, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+free+fatty+acid+infusion+in+rats+results+in+insulin+resistance+but+no+alteration+in+insulin-responsive+glucose+transporter+levels+in+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Lipids%22%5BJournal%5D)">Chronic free fatty acid infusion in rats results in insulin resistance but no alteration in insulin-responsive glucose transporter levels in skeletal muscle.</a> Lipids. 31, 1141-1149 (1996).</li>
<li>Goh, T. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid-induced+beta-cell+dysfunction+in+vivo+in+models+of+progressive+beta-cell+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">Lipid-induced beta-cell dysfunction in vivo in models of progressive beta-cell failure.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 292, 549-560 (2007).</li>
<li>Pascoe, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Free+fatty+acids+block+glucose-induced+beta-cell+proliferation+in+mice+by+inducing+cell+cycle+inhibitors+p16+and+p18%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Free fatty acids block glucose-induced beta-cell proliferation in mice by inducing cell cycle inhibitors p16 and p18.</a> Diabetes. 61, 632-641 (2012).</li>
<li>Bell, C. G., Walley, A. J., Froguel, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genetics+of+human+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Genetics%22%5BJournal%5D)">The genetics of human obesity.</a> Nature Reviews. Genetics. 6, 221-234 (2005).</li>
<li>Fontes, G., Hagman, D. K., Latour, M. G., Semache, M., Poitout, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+preservation+of+insulin+gene+expression+by+a+glucagon-like+peptide+1+agonist+or+a+dipeptidyl+peptidase+4+inhibitor+in+an+in+vivo+model+of+glucolipotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Res.+Clin.+Pract%22%5BJournal%5D)">Lack of preservation of insulin gene expression by a glucagon-like peptide 1 agonist or a dipeptidyl peptidase 4 inhibitor in an in vivo model of glucolipotoxicity.</a> Diabetes Res. Clin. Pract. 87, 322-328 (2010).</li>
<li>Crawford, P. A., Schaffer, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+stress+in+the+myocardium%3A+Adaptations+of+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+and+Cellular+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Metabolic stress in the myocardium: Adaptations of gene expression.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. , (2012).</li>
<li>Kewalramani, G., Bilan, P. J., Klip, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+insulin+resistance%3A+assault+by+lipids%2C+cytokines+and+local+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Clin.+Nutr.+Metab+Care%22%5BJournal%5D)">Muscle insulin resistance: assault by lipids, cytokines and local macrophages.</a> Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab Care. 13, 382-390 (2010).</li>
<li>Cusi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+obesity+and+lipotoxicity+in+the+development+of+nonalcoholic+steatohepatitis%3A+pathophysiology+and+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Role of obesity and lipotoxicity in the development of nonalcoholic steatohepatitis: pathophysiology and clinical implications.</a> Gastroenterology. 142, 711-725 (2012).</li>
</ol>

Vincent Poitout est co-fondateur de et a reçu des contrats de recherche de Bêtagenex Inc., une organisation de recherche sous contrat qui offre le modèle de perfusion présentée dans cet article comme un service commercial.

Bien qu&#39;un certain nombre d&#39;études antérieures ont employé des perfusions de glucose chroniques (par exemple 10-15) ou des lipides (par exemple 16,17) chez les rongeurs, à notre connaissance la perfusion combinée de ces deux carburants n&#39;a été signalée chez les souris 18. Le modèle de perfusion chronique présentée ici offre plusieurs avantages à étudier les effets sur les excès de nutriments sur une variété de fonctions biologiques chez les rats. D&#39;abord...

Niveaux chroniquement élevés de glucose et de lipides dans la circulation ont été proposées pour contribuer à la pathogenèse du diabète de type 2 en modifiant la fonction de plusieurs organes impliqués dans le maintien de l&#39;homéostasie du glucose, y compris, mais sans s&#39;y limiter, le pancréas des cellules bêta (revue en 1). Les dépôts d&#39;hypothèse de glucotoxicité que l&#39;hyperglycémie chronique aggrave le défaut des cellules bêta qui a donné lieu à une hyperglycémie, en premier lieu, créant ainsi un cercle vicieux et de contribuer à la détérioration du contrôle de la glycémie chez 2 patients diabétiques de type. De même, l&#39;hypothèse de glucolipotoxicité propose que des élévations concomitantes de la glycémie et des lipides, comme souvent observées dans le diabète de type 2, sont préjudiciables à la cellule beta. Décrypter les mécanismes cellulaires et moléculaires des effets délétères de nutriments chroniquement élevés sur la fonction des cellules bêta du pancréas est la clé de la understanding de la pathogénie du diabète de type 2 1. À cette fin, un grand nombre d&#39;études ont examiné les mécanismes d&#39;excès de nutriments ex vivo chronique dans les îlots de Langerhans isolés ou in vitro dans des lignées de cellules sécrétrices d&#39;insuline clonales. Cependant, la traduction des résultats obtenus dans ces systèmes modèles pour l&#39;ensemble de l&#39;organisme est complexe, notamment parce que les concentrations d&#39;acides gras utilisés dans des cellules en culture ou îlots correspondent rarement les taux circulants dans le voisinage des cellules bêta in vivo 2. D&#39;autre part, les mécanismes de défaillance des cellules bêta en réponse à un excès de nutriments ont été examinés dans des modèles rongeurs de diabète, comme en témoigne le rat Zucker Diabetic Fatty 3,4, la gerbille Psammomys obesus 5 et le régime riche en gras- Fed souris 6. Ces modèles, cependant, sont caractérisées par des anomalies métaboliques intrinsèques et ne sont pas facilement prêter à des manipulations de glucose dans le sanget / ou les niveaux de lipides dans un cadre plus contrôlée et moins chronique. Pour être en mesure de modifier les taux circulants de nutriments dans un délai de jours chez les animaux normaux par ailleurs, nous avons développé un modèle de perfusion chronique chez les rats normaux qui nous permet d&#39;examiner les effets des lipides et du glucose, seul ou en combinaison, sur les paramètres et les fonctions physiologiques 7,8.

<table><tbody><tr><td>Solution saline 0,9 %</td> <td>BD</td><td>JB1324</td><td></td></tr><tr><td>Dextrose 70 %</td> <td>McKesson</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Intralipid 20 %</td> <td>Fresenius Kabi</td><td>JB6023</td><td></td></tr><tr><td>Metricide (glutaraldéhyde 2,6 %)</td><td>Metrex</td><td>11-1401</td><td></td></tr><tr><td>Héparine sodique 10 000 USP u/ml</td><td>PPC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Carprofène</td><td>Metacam</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glycopyrrolate</td><td>Sandoz</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abbott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Chlohexidine 2 %</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alcool 70 %</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Iode</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PE-50</td><td>BD</td><td>427411</td><td></td></tr><tr><td>CO-EX T22</td><td>Instech Solomon</td><td>BCOEX-T22</td><td></td></tr><tr><td>Connecteur 22G</td><td>Instech Solomon</td><td>SC22/15</td><td></td></tr><tr><td>Swivel 22G</td><td>Instech Solomon</td><td>375/22PS</td><td></td></tr><tr><td>Y-Connector 22G</td><td>Instech Solomon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Contrepoids et bras</td><td>Instech Solomon</td><td>CM375BP</td><td></td></tr><tr><td>23 G Aiguilles émoussées</td><td>Instech Solomon</td><td>LS23</td><td></td></tr><tr><td>23 G Goupilles de canulation</td><td>Instech Solomon</td><td>SP23/12</td><td></td></tr><tr><td>Longes (12 pouces)</td><td>Lomir</td><td>RT12D</td><td></td></tr><tr><td>Vestes de perfusion </td><td>Lomir</td><td>RJ01, RJ02, RJ03, RJ04</td><td></td></tr><tr><td>(SM-XL)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Attache de sangle</td><td>Lomir</td><td>RS T1</td><td></td></tr><tr><td>Seringue 60 ml</td><td>BD</td><td>309653</td><td></td></tr><tr><td>seringue 1 ml</td><td>BD</td><td>309602</td><td></td></tr></tbody></table>

un modèle d&#39;infusion de nutriments chronique chez le rat

A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat

L&#39;exposition chronique à des niveaux excessifs de nutriments est postulé pour affecter le fonctionnement de plusieurs organes et de tissus et de contribuer au développement des nombreuses complications liées à l&#39;obésité et le syndrome métabolique, y compris le diabète de type 2. Pour étudier les mécanismes par lesquels des niveaux excessifs de glucose et d&#39;acides gras affectent le pancréas des cellules bêta et la sécrétion d&#39;insuline, nous avons établi un modèle de perfusion nutritive chronique chez le rat. La procédure consiste en la pose de cathéters la veine jugulaire droite et l&#39;artère carotide gauche sous anesthésie générale, qui permet une période de récupération de 7 jours, reliant les cathéters de pompes utilisant un pivot et un système de contrepoids qui permet à l&#39;animal de se déplacer librement dans la cage, et infusant glucose et / ou de l&#39;Intralipid (une émulsion d&#39;huile de soja qui génère un mélange d&#39;environ 80% unsaturated/20% d&#39;acides gras saturés quand infusé avec de l&#39;héparine) pendant 72 heures. Ce modèle offre plusieurs avanges, y compris la possibilité de moduler finement les niveaux cibles de glucose et d&#39;acides gras circulants, l&#39;option de co-insuffler composés pharmacologiques, et le laps de temps relativement court, par opposition aux modèles alimentaires. Il peut être utilisé pour examiner les mécanismes du dysfonctionnement des nutriments induite par une variété d&#39;organes et de tester l&#39;efficacité des médicaments dans ce contexte.

Sur une série de 42 rats qui ont subi une chirurgie, 5 rats ont été perdus au cours de la période post-opératoire et 1 rat ont été perdues pendant la perfusion, soit un taux de réussite global de 86%. Le poids corporel moyen des 37 rats qui ont finalement été infusés était de 608 ± 5 g avant la chirurgie et 588 ± 6 g au début de la perfusion (moyenne ± SE, n = 37, p &lt;0,0001 par test t apparié). Les résultats représentatifs suivants ont été obtenus en 2 groupes de perfusion:. Saline (SAL) et de glucose + Intralipide (...

Un protocole d&#39;infusions chroniques de glucose et Intralipide chez le rat est décrite. Ce modèle peut être utilisé pour étudier l&#39;impact de l&#39;excès de nutriments sur la fonction des organes et des paramètres physiologiques.

Un modèle d&#39;infusion de nutriments chronique chez le rat

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to  affect the function of several organs and tissues and to contribute to the  ...

L'objectif général de cette procédure est de canuler les veines jugulaires et les artères carotides de rats afin d'infuser du glucose et des lipides, servant ainsi de modèle pour un excès chronique de nutriments. Cette opération consiste d'abord à canuler la veine jugulaire et l'artère carotide sous anesthésie générale. Après la procédure, le rat est laissé en convalescence pendant six jours.Ensuite, les cathéters sont reliés à des pompes d'infusion au moyen d'un câble et d'un rotule fixés sur le dessus de la cage. Enfin, le rat reçoit une perfusion de solutions de glucose et de lipides. En définitive, on peut obtenir des résultats montrant les effets d'un excès chronique de nutriments sur l'homéostasie du glucose.Le principal avantage de cette technique par rapport à d'autres modèles, comme les modèles génétiques par exemple, est qu'elle permet d'examiner les premiers changements de la fonction des cellules bêta en réponse à un excès de nutriments. Un autre avantage est qu'il est possible de moduler spécifiquement les concentrations de glucose et d'intralipide ou de lipides dans la circulation. Nous utilisons actuellement cette technique pour étudier les modifications de la foncti

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Cette vidéo montre la canulation intraduodénale dans un modèle de rat. Après avoir anesthésié le rat, le duodénum est localisé et une petite ponction est créée. Une canule en forme de J avec une pointe biseautée est soigneusement insérée et sécurisée, et l’incision est fermée. Le modèle de rat canulé permet une perfusion intra-intestinale pour les études d’immunopathologie.

Canulation intraduodénale dans un modèle de rat pour des études d’immunopathologie

Ce protocole décrit un modèle murin à cathétérisme central de maladie critique prolongée. Nous combinons la méthode de ligature cæcale et de ponction pour induire la septicémie avec l’utilisation d’une ligne veineuse centrale pour l’administration de liquides, de médicaments et de nutriments afin d’imiter le cadre clinique humain.

Utilisation d&#39;une ligne centrale pour les fluides veineuses, les drogues et l&#39;administration des nutriments dans un modèle de souris de maladies graves

Ce protocole décrit l'utilisation d'un régime de cafétéria très appétissant de style occidental pour modéliser la suralimentation et l'obésité chez les rongeurs. Ici, nous fournissons un aperçu détaillé de la sélection, de la préparation et de la mesure des aliments, et expliquons les facteurs méthodologiques qui aident à générer un phénotype robuste et reproductible.

Palatable Western-style Cafeteria Diet as a Reliable Method for Modeling Diet-induced Obesity in Rodents

L’accès pour perfusion à long terme dans l’artère mésentérique supérieure (SMA) des rats est une intervention chirurgicale qui consiste en la canulation d’une branche proximale de la SMA. La canule sort de la plaie abdominale et est creusée dans un tunnel à travers l’espace sous-cutané jusqu’au pli interscapulaire.

Cibler l’intestin grêle du rat : perfusion à long terme dans l’artère mésentérique supérieure

La pancréatite chronique (PC) est une maladie caractérisée par une inflammation et une fibrose du pancréas, souvent associée à des douleurs abdominales intraitables. Cet article se concentre sur le raffinement de la technique pour générer un modèle murin de CP par perfusion de voies biliaires avec de l’acide 2,4,6 -trinitrobenzène sulfonique (TNBS).

Un modèle murin pour la pancréatite chronique par perfusion de TNBS dans les voies biliaires

Cet article présente les réponses morphométriques et les résultats de performance d’entraînement d’un protocole d’entraînement par intervalles à haute intensité (HIIT) dans un modèle de rat Sprague-Dawley d’obésité induite par l’alimentation. Le but de ce protocole était de maximiser l’intensité de l’exercice et de déterminer les réponses physiologiques au HIIT chez les rats maigres et obèses.

Un modèle d’entraînement par intervalles chronique à haute intensité et d’obésité induite par l’alimentation pour maximiser l’effort d’exercice et induire des changements physiologiques chez les rats

Un modèle de frénésie alimentaire a été établi chez la souris en utilisant un accès intermittent à des M&amp;M’s (un aliment très appétissant composé de graisse et de sucre). Les souris ayant un accès intermittent à cet aliment riche en graisses et en sucre ont montré des comportements similaires au stress, un apport calorique accru et une préférence pour cet aliment par rapport à la nourriture standard par rapport aux souris ayant un accès continu ou inexistant à la nourriture.

Modèle de consommation excessive intermittente chez la souris

Ce protocole décrit un modèle de transplantation intestinale avec iléostomie basé sur le rat pour l’évaluation de l’évolution temporelle de l’intervention médicamenteuse sur le rejet de greffe.

Modèle de rejet de greffe de rat de transplantation intestinale avec iléostomie extériorisée pour l’évaluation du pronostic longitudinal

Cette étude propose une méthode reproductible et standardisée afin d’établir des modèles de rats obèses présentant une obésité simple, généralement caractérisée par un pancréas graisseux. Il comprend également des protocoles détaillés pour l’échantillonnage des tissus pancréatiques et l’immunohistochimie.

Développement et validation d’une méthodologie pour l’établissement de modèles de rats obèses avec pancréas gras typique

Cet article présente un modèle ischémique de MRC utilisant une IRI rénale unilatérale avec une néphrectomie controlatérale réalisée un jour avant la collecte de l’échantillon ; ce protocole permet une évaluation fonctionnelle basée sur le sérum, une survie élevée et une pathologie reproductible de la MRC à 28 et 42 jours, offrant une plateforme polyvalente pour les études mécanistes et interventionnelles.

Modèle murin de transition d’une maladie rénale aiguë à chronique induite par une ischémie rénale/lésion de reperfusion

Découvrez un modèle d'infusion chronique de glucose et d'Intralipid chez le rat pour étudier les effets de l'excès de nutriments sur l'homéostasie glucidique et la fonction bêta-cellulaire.

Un modèle d'infusion de nutriments chronique chez le rat

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