Une procédure d'étudier l'effet de la restriction alimentaire prolongée sur l'héroïne cherche à rats abstinents

L'objectif général de cette procédure est d'étudier les effets de manipulations environnementales, telles qu'une restriction alimentaire chronique, sur la rechute dans la recherche d'héroïne chez des rats en laboratoire placés en condition de sevrage. Ceci est réalisé en insérant d'abord chirurgicalement un cathéter intraveineux dans la veine jugulaire du rat, permettant ainsi l'auto-administration d'héroïne après une période de récupération. Les rats sont entraînés à s'auto-administrer de l'héroïne dans des chambres de conditionnement opérant pendant une durée de 10 jours.

L'étape suivante de la procédure est la phase d'abstinence, au cours de laquelle les rats sont transférés vers le centre d'élevage et soumis à une période d'accès restreint ou illimité à la nourriture. Enfin, les rats sont ramenés dans les chambres de conditionnement opérant pour subir un test de recherche d'héroïne, où les réponses sur le levier associé à l'héroïne entraînent l'activation d'un stimulus, une lumière et un son, en l'absence de distribution d'héroïne. En définitive, les rats soumis chroniquement à une restriction alimentaire et ayant une histoire d'auto-administration d'héroïne présenteront une augmentation marquée de la recherche d'héroïne dans des conditions de sevrage, résultant de la réexposition à l'environnement de prise de drogue et aux stimuli associés à la drogue.

Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes, comme la procédure de réinstauration, réside dans l'absence d'une extinction opérante explicite, phénomène qui n'est pas observé dans l'état humain. De plus, l'utilisation de manipulations chroniques plutôt qu'aiguës permet une meilleure validité de construit par rapport à la condition humaine. Cette méthode peut aider à répondre à des questions essentielles dans le domaine de la toxicomanie, telles que les mécanismes neurologiques communs aux comportements de recherche de drogues et d'aliments.

Les cathéters sont préparés en grande quantité et stérilisés par autoclavage pour une utilisation sur une longue période. Pour fabriquer un cathéter, découpez d'abord un tube élastique en morceaux de 12 centimètres de long. Utilisez un cure-dent ou une aiguille de calibre 18 pour déposer une petite goutte de silicone autour du cathéter, à trois centimètres de l'extrémité.

Laisser sécher le silicone pendant 24 heures avant la stérilisation par autoclave. Avant l'autoclavage, courber le tube long de la canule five up, qui servira de raccord en angle droit par rapport au socle en plastique. Pour monter les cathéters le jour de la chirurgie, enfoncer le côté long du tube scolaire sur environ la moitié du tube métallique courbé de la canule five up, jusqu'au socle en plastique. Relier le tube five up, à l’aide d’un tube en tigon et d’une aiguille stérile de 22 gauge, à une seringue d’un millilitre remplie de sérum physiologique stérile.

Passer du sérum physiologique dans le cathéter pour s'assurer qu'il n'y a pas d'obstruction au flux. Commencer par anesthésier l'animal avant de raser et de nettoyer la zone de l'épaule droite et de la tête avec de l'alcool et un antiseptique chirurgical. Après avoir appliqué un gel sur les yeux pour prévenir le dessèchement, injecter de la pénicilline et du sérum physiologique afin de prévenir les infections et la déshydratation.

Utilisez des techniques standard pour exposer la veine jugulaire externe une fois isolée des tissus environnants. Insérez une pince courbe sous la veine afin de la maintenir soulevée et légèrement tendue. Effectuez une petite incision en forme de V sur la veine et maintenez l'incision ouverte.

À l’aide d’un dilatateur de vaisseau, introduire l’extrémité courte du cathéter, de trois centimètres, dans la veine en direction du cœur jusqu’à ce que la goutte de silicone se trouve au niveau du point d’incision. Fixer le cathéter à la veine à l’aide de trois points de suture : un aussi caudal que possible, un juste rostral à la goutte de silicone, et le troisième aussi rostral que possible.

Faire passer du sérum physiologique dans le cathéter pour s'assurer qu'il reste perméable et que les points de suture ne sont pas trop serrés. Ensuite, placer le rat sur le dos. Inciser la tête et insérer un hémostat afin de séparer la peau des tissus sous-jacents et créer une poche sous-cutanée.

Guider l'hémostat sous la peau vers l'ouverture au niveau des épaules par laquelle le cathéter a été inséré. Percer le tissu conjonctif et pincer fermement le cathéter au point le plus rostral situé sous la base du five up. Détacher le five up et faire passer l'extrémité longue du cathéter sous la peau jusqu'à l'incision située au sommet du crâne.

Utilisez des ciseaux pour couper le cathéter en dessous de l'endroit où le clamp hémostatique était fixé et réattachez l'extrémité longue du five up. Faites glisser le cathéter le long de la tige métallique du five up jusqu'au socle en plastique, puis faites passer du sérum physiologique pour vérifier l'écoulement libre. Après avoir fermé les plaies par points de suture, placez le rat dans un appareil stéréotaxique.

Une fois que le crâne exposé est propre et sec, utilisez un foret manuel pour percer quatre à cinq trous à sa surface. Ensuite, insérez des vis mécaniques dans les trous afin de servir d'échafaudage pour le capuchon crânien. Placez le connecteur cinq vers le haut entre les vis et rangez l'excédent de longueur du cathéter dans la poche sous-cutanée réalisée précédemment.

Enfin, utilisez du ciment dentaire pour fixer le cinq en haut du crâne. Retirez le rat de l'appareil stéréotaxique une fois le ciment complètement sec et surveillez-le jusqu'à ce qu'il soit entièrement remis. Les rats sont logés individuellement dans des chambres de conditionnement opérant.

Logés dans des compartiments insonorisés équipés d'un ventilateur. Deux leviers escamotables sont montés à neuf centimètres au-dessus du sol sur la paroi latérale droite, avec un témoin lumineux au-dessus de chaque levier. Un module sonore est placé au-dessus du levier actif et une lumière témoin rouge est positionnée en haut au centre de la paroi latérale gauche.

La nourriture et l'eau sont disponibles ad libitum. La pompe à médicament est reliée au cathéter à l'aide d'un raccord rotatif liquide et d'un tube tigon protégé par un ressort métallique. L'auto-administration d'héroïne commence après la récupération post-chirurgicale et une période d'habituation de 24 heures.

Pour commencer, rincez le cathéter avec une solution d'héparine et de gentamicine. Ensuite, reliez le connecteur cinq voies au tube Tigon et fixez le ressort métallique. Commencez chaque séance au début de la phase sombre par l'extension des leviers actif et inactif, ainsi que par l'illumination de la lumière de la cage et l'activation du complexe sonore de la lumière Q.

Pendant 30 secondes, les rats peuvent automédicamenter de l'héroïne pendant 10 jours au cours de trois séances de trois heures séparées par des intervalles de trois heures. Les réponses sur le levier actif entraînent l'activation de la pompe à drogue et l'initiation d'une période de temporisation de 22 secondes, durant laquelle la lumière de la cage est éteinte et le complexe sonore de la lumière Q au-dessus du levier actif est activé. Les réponses sur le levier inactif sont enregistrées, mais n'ont aucune conséquence programmable.

Après l'entraînement à l'auto-administration, sortir les rats des chambres de conditionnement opérant et les loger individuellement dans l'élevage animalier avec un accès illimité à la nourriture et à l'eau. Le jour suivant, consacré à l'élimination du médicament, réduire la quantité de nourriture fournie au groupe soumis à la restriction alimentaire afin d'initier la période d'abstinence, tout en maintenant un accès illimité à la nourriture pour le groupe rassasié. Effectuer le test de recherche de drogue le matin de l'abstinence.

Jour 14, ramener les rats dans les chambres de conditionnement opérant et les attacher au ressort métallique. Permettre une session d'une ou trois heures au cours de laquelle les réponses sur le levier actif et le levier inactif ont les mêmes conséquences qu'au cours de l'entraînement à l'automédication, sauf en ce qui concerne la disponibilité de la drogue. Ces résultats montrent que les masses corporelles restent stables tout au long de l'administration d'héroïne.

Formation à l'auto-administration Pendant l'abstinence, les rats ayant un accès illimité à la nourriture augmentent leur poids corporel, tandis que ceux soumis à une restriction alimentaire diminuent leur poids corporel d'environ 10 à 15 %. Comme on le voit ici, le nombre d'infusions et de pressions sur le levier actif augmentait au cours des jours d'entraînement, alors que le nombre de pressions sur le levier inactif ne variait pas. À l'issue de la période d'abstinence, la réponse sur le levier actif chez les rats soumis à restriction alimentaire augmentait significativement par rapport aux rats rassasiés. La réponse sur le levier inactif reste faible et comparable entre les groupes suivant cette procédure.

D'autres méthodes, telles que les injections intracrâniennes, la microdialyse, le transfert western et les techniques immunohistochimiques, peuvent être utilisées pour cibler des systèmes neurochimiques et pharmacologiques spécifiques. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez avoir une compréhension claire de la manière d'implanter chirurgicalement un cathéter intraveineux dans la veine jugulaire du rat, ainsi que de la façon de réaliser une procédure d'auto-administration d'héroïne dans des compartiments standard de conditionnement opérant.