Une procédure d'étudier l'effet de la restriction alimentaire prolongée sur l'héroïne cherche à rats abstinents

Une procédure qui permet une augmentation de démonstration robuste de recherche de drogue chez le rat soumis à des restrictions alimentaires est décrite. Après héroïne formation à l'auto-administration, les rats passent par une période d'abstinence, dans un environnement exempt de drogues, au cours de laquelle ils sont légèrement restriction alimentaire. la recherche de drogue est ensuite testé dans l'environnement de médicament associé.

L’objectif général de cette procédure est d’étudier les effets des manipulations environnementales, telles que la restriction alimentaire chronique sur la rechute à la recherche d’héroïne dans des enveloppements de laboratoire dans des conditions de sevrage. Ceci est réalisé en insérant d’abord chirurgicalement un cathéter intraveineux dans la veine jugulaire du rat pour permettre l’auto-administration de l’héroïne après une période de récupération. Les rats sont entraînés à s’auto-administrer de l’héroïne dans des chambres de conditionnement opérantes pendant une période de 10 jours.

L’étape suivante de la procédure est la phase d’abstinence où les rats sont transportés à l’animalerie et soumis à une période d’accès restreint ou illimité à la nourriture. Enfin, les rats sont renvoyés dans les chambres de conditionnement opérantes pour subir un test de recherche d’héroïne où les réponses sur le levier des facultés affaiblies par l’héroïne entraînent l’activation d’un signal, d’une lumière et d’une tonalité en l’absence d’administration d’héroïne. En fin de compte, les rats chroniquement restreints à la nourriture Avec des antécédents d’héroïne, l’auto-administration montreront une forte augmentation de la recherche d’héroïne dans des conditions de sevrage, résultant d’une réexposition à l’environnement de consommation de drogues et aux signaux associés à la drogue.

Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes, telles que la procédure de réintégration, est l’absence d’extinction opérante explicite, qui n’est pas observée dans la condition humaine. De plus, l’utilisation de manipulations chroniques par rapport aux manipulations aiguës permet une plus grande validité conceptuelle en ce qui concerne la condition humaine. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la toxicomanie, telles que les mécanismes neurologiques courants sous-jacents aux comportements de recherche de drogues et de nourriture.

Les cathéters sont préparés en vrac et stérilisés en autoclave pour une utilisation sur une longue période de temps. Pour construire un cathéter, coupez d’abord un tube élastique en morceaux de 12 centimètres de long. À l’aide d’un cure-dent ou d’une aiguille de calibre 18, placez une petite goutte de silicium autour du cathéter, à trois centimètres de l’extrémité.

Laissez sécher le silicone pendant 24 heures avant l’autoclavage, pliez le long tube de la canule à cinq hauts, qui servira de connecteur à angle droit au socle en plastique avant l’autoclavage. Pour assembler les cathéters le jour de l’opération, poussez le côté long du tube scolaire sur le tube métallique plié de la canule à cinq doigts à mi-chemin du socle en plastique. Connectez le tube à cinq vers le haut via un tube tigon et une aiguille de calibre 22 mélangée à une seringue d’un millilitre remplie de solution saline stérile.

Rincez la solution saline à travers le cathéter pour assurer un écoulement non obstrué. Pour commencer, anesthésez l’animal avant de le raser et nettoyez la zone de l’épaule droite et de la tête avec de l’alcool et un gommage chirurgical. Après avoir appliqué du gel sur les yeux pour prévenir le dessèchement, de la pénicilline et une solution saline sont injectées pour protéger contre l’infection et la déshydratation.

Utilisez des techniques standard pour exposer la veine jugulaire externe une fois isolée des tissus environnants. Insérez une pince incurvée sous la veine pour la maintenir soulevée et légèrement étirée. Faites une petite incision en forme de V sur la veine et maintenez la coupe ouverte.

À l’aide d’un dilatateur vasculaire, avancez l’extrémité courte de trois centimètres du cathéter dans la veine vers le cœur jusqu’à ce que la goutte de silicone soit au point d’incision. Attachez le cathéter à la veine avec trois sutures, une aussi loin que possible. L’un juste rostral jusqu’à la goutte de silicone, et le troisième aussi rostral que possible.

Passez une solution saline dans le cathéter pour vous assurer qu’il reste obstrué et que les sutures ne sont pas trop serrées. Ensuite, placez le côté ventral du rat vers le bas. Incisez la tête et insérez un hémostat pour séparer la peau du tissu sous-jacent et créer une poche sous-cutanée.

Guidez l’hémostat sous la peau vers l’ouverture sur les épaules où le cathéter a été inséré. Percez le tissu conjonctif et serrez fermement le cathéter au point le plus rostral sous la base des cinq vers le haut. Détachez les cinq vers le haut et enfilez l’extrémité longue du cathéter sous la peau et par l’incision située au sommet de la tête.

À l’aide de ciseaux, coupez le cathéter en dessous de l’endroit où l’hémostat a été serré et rattachez l’extrémité longue des cinq vers le haut. Tirez le cathéter le long de la tige métallique des cinq jusqu’au piédestal en plastique, passez une solution saline pour assurer une circulation libre. Après avoir fermé les plaies avec des sutures, placez le rat dans un appareil stéréotaxique.

Une fois que le crâne exposé est propre et sec, utilisez un foret manuel pour percer quatre à cinq trous dans la surface. Ensuite, insérez des vis à métaux dans les trous pour servir d’échafaudage pour le capuchon de tête. Placez le connecteur cinq vers le haut entre les vis et rentrez l’excédent de longueur du cathéter dans la poche sous-cutanée faite précédemment.

Enfin, utilisez du ciment dentaire pour fixer les cinq jusqu’au sommet du crâne. Retirez le rat de l’appareil stéréotaxique une fois le ciment complètement sec et surveillez-le jusqu’à ce qu’il soit complètement rétabli. Les rats sont logés individuellement dans des chambres de conditionnement opérantes.

Enfermé dans des compartiments insonorisants équipés d’un ventilateur. Deux leviers rétractables sont montés à neuf centimètres au-dessus du sol de la paroi latérale droite avec une lumière de repère au-dessus de chaque levier. Un module de tonalité est placé au-dessus du levier actif et une lumière rouge de la maison est positionnée en haut au centre de la paroi latérale gauche.

De la nourriture et de l’eau sont disponibles chez libitum. La pompe à médicament est fixée au cathéter par un émerillon à liquide et un tube tigon protégé par un ressort métallique. L’auto-administration d’héroïne est initiée après la guérison d’une intervention chirurgicale et une période d’accoutumance de 24 heures.

Pour commencer, rincez le cathéter avec une solution d’héparine gentamycine. Ensuite, connectez le connecteur à cinq vers le haut au tube Tigon et fixez le ressort métallique. Commencez chaque séance au début de la phase d’obscurité avec l’extension des leviers actifs et inactifs, ainsi que l’allumage de la lumière de la maison et l’activation du complexe de tons de lumière Q.

Pendant 30 secondes, les rats sont autorisés à s’auto-administrer de l’héroïne pendant 10 jours au cours de trois séances de trois heures séparées par des intervalles de trois heures. Les réponses sur le levier actif entraînent l’activation de la pompe à médicament et le déclenchement d’une 22e période d’attente pendant laquelle la lumière de la maison est éteinte et le complexe de lumière Q au-dessus du levier actif est activé. Les réponses inactives des leviers sont enregistrées, mais n’ont pas de conséquences programmables.

Après l’auto-administration, retirez les rats des chambres de conditionnement opérantes et hébergez-les individuellement dans l’animalerie avec un accès illimité à la nourriture et à l’eau. Pour un jour de sevrage médicamenteux le lendemain, réduisez la quantité de nourriture pour le groupe restreint en nourriture pour commencer la période d’abstinence tout en maintenant un accès illimité à la nourriture dans le groupe rassasié. Effectuez le test de recherche de drogue le matin de l’abstinence.

Jour 14, retournez les rats dans les chambres de conditionnement opérantes et fixez-les au ressort métallique. Permettre une séance d’une ou trois heures au cours de laquelle les réponses des leviers actifs et inactifs ont les mêmes conséquences que dans la formation à l’auto-administration, à l’exclusion de la disponibilité du médicament. Ces résultats démontrent que le poids corporel reste stable tout au long de l’héroïne.

Pendant l’abstinence, les rats ayant un accès illimité à la nourriture augmentent leur poids corporel tandis que ceux qui sont limités en nourriture diminuent leur poids corporel d’environ 10 à 15 %. Comme on le voit ici, les perfusions et les réponses du levier actif ont augmenté au cours des jours de formation, contrairement aux réponses du levier inactif. Après la période d’abstinence, la réponse active du levier pour les rats restreints en nourriture a considérablement augmenté par rapport aux rats rassasiés. Alors que la réponse du levier inactif est minime et comparable entre les groupes suivant cette procédure.

D’autres méthodes telles que les injections intracrâniennes, la microdialyse, le western blot et les techniques immunohistochimiques peuvent être utilisées pour cibler des systèmes neurochimiques et pharmacologiques spécifiques. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une compréhension claire de la façon d’implanter chirurgicalement un cathéter intraveineux dans la veine jugulaire du rat, ainsi que de la façon de mener une procédure d’auto-administration d’héroïne dans des chambres de conditionnement opérantes standard.