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DOI: 10.3791/52293-v
Megan N. Evilsizor1,2, Helen F. Ray-Jones1,3, Jonathan Lifshitz1,2,4,5, Jenna Ziebell1,2
1Department of Child Health,University of Arizona College of Medicine - Phoenix, 2BARROW Neurological Institute,Phoenix Children's Hospital, 3Department of Biology and Biochemistry,University of Bath, 4Neuroscience Program,Arizona State University, 5Phoenix VA Healthcare System
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Ce protocole de niveau introductif décrit les réactifs, l’équipement et les techniques nécessaires pour réaliser la coloration immunohistochimique du cerveau des rongeurs, en utilisant des marqueurs pour la microglie et les éléments neuronaux à titre d’exemple.
L’objectif global de l’expérience suivante est d’utiliser l’immunohistochimie afin de visualiser les protéines d’intérêt. Pour cet exemple, IBA un pour les microgliaux et pan neuronal pour les neurones. Pour ce faire, il suffit de placer d’abord les sections préparées dans une solution de blocage afin d’éviter les liaisons non spécifiques.
Dans un deuxième temps, des anticorps, qui reconnaissent les deux protéines d’intérêt différentes, sont placés sur les sections pendant la nuit. Les sections suivantes sont lavées et incubées dans des anticorps secondaires afin d’ajouter des marqueurs fluorescents aux anticorps primaires. Les résultats du double marquage peuvent mettre en évidence des colorations microgliales dans des champs de neurones.
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