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DOI: 10.3791/53179-v
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Le protocole d'immunofluorescence indirecte décrite dans cet article permet la détection et la localisation de protéines dans la glande mammaire de la souris. Procédé complète est donnée pour préparer des échantillons de la glande mammaire, pour effectuer l'immunohistochimie, l'image de coupes de tissus par microscopie à fluorescence, et de reconstruire des images.
L’objectif global de cette procédure est de localiser les protéines d’intérêt dans le tissu mammaire de la souris pendant la lactation. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la biologie cellulaire, telles que l’emplacement des protéines snap impliquées dans la sécrétion du produit intermédiaire, localisées chez la souris, les cellules épithéliales mammaires pendant la lactation. Le principal avantage de cette technique est qu’elle permet d’observer rapidement et facilement l’emplacement des protéines dans un contexte tissulaire donné.
Après l’euthanasie, placez la souris sur le dos, mouillez la zone ventrale avec de l’éthanol, puis séchez-la avec une serviette en papier. Ensuite, à l’aide d’une pince, tirez la peau abdominale entre les deux pattes arrière et faites une incision d’un centimètre de long à travers la peau avec une paire de ciseaux tranchants. En partant de cette première incision, coupez la peau jusqu’au cou, puis retirez la peau du péritoine.
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