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Isolement des cellules gliales entériques de la sous-muqueuse et de la Lamina Propria de la souri...
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JoVE Journal Biology
Isolation of Enteric Glial Cells from the Submucosa and Lamina Propria of the Adult Mouse

Isolement des cellules gliales entériques de la sous-muqueuse et de la Lamina Propria de la souris adulte

Full Text
14,375 Views
07:53 min
August 15, 2018

DOI: 10.3791/57629-v

Zhen Wang1,4, Ramon Ocadiz-Ruiz1, Sinju Sundaresan1, Lin Ding1, Michael Hayes1, Nirakar Sahoo3, Haoxing Xu1,2, Juanita L. Merchant1,2,5

1Department of Internal Medicine-Gastroenterology,University of Michigan, 2Department of Molecular and Integrative Physiology,University of Michigan, 3Department of Molecular, Cellular and Developmental Biology,University of Michigan, 4Department of Gastrointestinal Surgery,The First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University, 5Division of Gastroenterology,University of Arizona College of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Nous décrivons ici l’isolement de cellules gliales-entérique de la sous-muqueuse intestinale à l’aide des incubations EDTA séquentielles pour chélater les cations divalents, puis incubation dans une solution de récupération non enzymatique cellulaire. Placage de la suspension de cellules qui en résultent sur le poly-D-lysine et de la laminine se traduit par une culture fortement enrichie des cellules gliales sous-muqueux analyse fonctionnelle.

Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine des neurosciences, en particulier la fonction du système nerveux entérique. Le principal avantage de la technique est qu’il s’agit d’une méthode rapide et non enzymatique pour isoler les cellules entériques de la lamina propria et de la sous-muqueuse plutôt que du muscle lisse. Commencez par identifier l’estomac distal et le pylore.

Tenez le pylore avec une pince tout en coupant le mésentère. Ensuite, utilisez une dissection émoussée avec le dos des ciseaux pour gratter le pancréas adhérent. Ensuite, utilisez des ciseaux pour retirer sept centimètres de l’intestin proximal sans le déchirer.

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