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DOI: 10.3791/60060-v
Kristi J. Warren1,3, Todd A. Wyatt2,3,4
1Department of Internal Medicine,University of Utah, 2Research Service,VA Nebraska Iowa Health Care System, 3Department of Internal Medicine,University of Nebraska Medical Center, 4Department of Environmental, Agricultural & Occupational Health,University of Nebraska Medical Center
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Dans ce protocole, les lymphocytes sont placés dans la chambre supérieure d'un système de transmigration, séparés de la chambre inférieure par une membrane poreuse. La chimiokine est ajoutée à la chambre inférieure, qui induit une migration active le long d'un gradient de chimiokine. Après 48 h, les lymphocytes sont comptés dans les deux chambres pour quantifier la transmigration.
La transmigration des lymphocytes est une caractéristique importante de toute réponse immunitaire. Par conséquent, ce protocole est significatif parce qu’il permet à un chercheur d’évaluer la mobilité des lymphocytes dans un système in vitro bien défini. Le principal avantage de cette technique est que diverses chimiokines peuvent être évaluées pour déterminer leur efficacité d’induire la migration dans les cellules récemment définies, telles que le groupe deux cellules lymphoïdes innées, ou ILC2.
Un deuxième avantage est que les inhibiteurs ou les thérapies biologiques visant à bloquer certaines voies de chimiokine peuvent être testés par cette méthode avant de faire des expériences plus coûteuses avec des animaux. Commencez par exciser les poumons et la rate des souris mâles et femelles euthanasiées traitées aux ovules à l’aide de deux à trois animaux par groupe. Placer les tissus excisés dans des tubes de dissociation séparés selon le type de tissu et le sexe animal.
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