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DOI: 10.3791/69122-v
Dilan Gokyer1, Natasha Salpeter1, Lydia Hughes1, Hoi Chang Lee1, Meredith J Lohman1, Tomiris Atazhanova1, Anna Kleinhans2, Joan K Riley1,2, MaryEllen Pavone1,2, Francesca E Duncan1, Emily Zaniker-Gomez1, Elnur Babayev1,2
1Department of Obstetrics and Gynecology, Feinberg School of Medicine,Northwestern University, 2Department of Obstetrics and Gynecology,Northwestern Medicine Center for Fertility and Reproductive Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Ce protocole décrit des méthodes standardisées pour isoler et traiter le liquide folliculaire, les cellules somatiques et les ovocytes immatures à partir de procédures de FIV, permettant des analyses moléculaires et cellulaires de haute qualité. Ces approches soutiennent la recherche translationnelle sur la fertilité, le vieillissement reproductif et le dysfonctionnement ovarien à l’aide de matériaux généralement jetés dans les soins cliniques.
Nous avons développé des méthodes reproductibles pour collecter et analyser les sous-produits de la FIV afin d’étudier la fertilité humaine, l’infertilité et le vieillissement reproductif. Maintenir l’intégrité de l’ARN et la viabilité cellulaire est un défi qui nécessite une manipulation rapide et coordonnée des échantillons entre les équipes cliniques et de recherche. Pour commencer, obtenez des tubes coniques de 50 millilitres contenant du liquide folliculaire.
Centrifugez les tubes à 400 x g pendant 10 minutes à quatre degrés Celsius. Jetez le surnageant de chaque tube, laissant derrière lui la pastille cellulaire. Ajoutez quatre à cinq millilitres de DMEM/F-12 à chaque granule cellulaire et resuspendez la pellete en pipettant doucement.
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