מקור: Li, J., et al. זיהוי אירועי רקומבינציה הומולוגית בתאי גזע עובריים של עכברים באמצעות כתם דרומי ותגובת שרשרת פולימראז. J. Vis. Exp. (2018).
בסרטון זה, אנו מתארים את טכניקת הכתם הדרומי לזיהוי אירועי רקומבינציה הומולוגיים בגנום של תאי גזע עובריים של עכברים באמצעות בדיקות רדיואקטיביות. אזורי דנ”א המכילים אירועי רקומבינציה הומולוגיים מופיעים כפסים נפרדים כאשר הממברנה המכילה את הדנ”א הקשור לגשושית נחשפת לקרני רנטגן.
1. הכנת DNA גנומי והעיכול עם אנזימי הגבלה
2. כתם דרומי
The authors have nothing to disclose.
QIAquick Gel Extraction Kit | QIAGEN | 28704 | |
DNA Denaturing Solution | VWR | 351-013-131 | |
DNA Neutralizing Solution | VWR | 351-014-131 | |
EcoR I | Thermo Scientific | ER0271 | |
Dra I | Thermo Scientific | ER0221 | |
ProbeQuan G-50 Micro Columns | GE Healthcare | 28-9034-08 | |
Hybrisol I Hybridization Solution | Millipore | S4040 | |
Ready-To-Go DNA Labeling Beads (-dCTP) | VWR | 27-9240-01 | |
UltraPure SSC, 20x | Thermo Fisher | 15557036 | |
Salmon Sperm DNA Solution | Thermo Fisher | 15632011 | |
Whatman TurboBlotter Transfer System, Large Kits | Fisher Scientific | 09-301-188 | |
[α32P] dCTP | PerkinElmer | NEG013H100UC | |
Kodak X-Ray Film | Z&Z Medical | 844 5702 | |
QIAprep Spin Miniprep Kit | QIAGEN | 27104 | |
Nuclei Lysis Solution | Promega | A7941 | |
Protein Precipitation Solution | Promega | A7951 |