מודל השתלת לב הטרוטופי סטנדרטי מחזיר לקוף מקוק

השתלת לב מציעה תקווה חדשה לחולים עם אי ספיקת לב בשלב הסופי הזקוקים להשתלה אך אינם מסוגלים לקבל איבר תורם מתאים עקב מחסור בתורמים. במחקרי הערכה פרה-קליניים, השתלת לב תומכת חיים השיגה משך הישרדות של עד תשעה חודשים, ועומדת בקריטריוני היעילות הנדרשים להתחלת ניסויים קליניים בבני אדם¹. בהתבסס על ממצאים אלה, מינהל המזון והתרופות האמריקני (FDA) אישר שימוש בגישה מורחבת לשני מקרים קליניים של השתלת לב באמצעות לבבות תורמים שנערכו גנטית. למרות שמקרים קליניים אלה הוכיחו את ההיתכנות של השתלת לב, צצו מספר אתגרים לא פתורים, כולל היפרטרופיה לבבית חריגה ודחייה בתיווך נוגדנים 2,3,4,5. לכן, יש צורך במחקרים פרה-קליניים נוספים במודלים של בעלי חיים גדולים בתנאי מעבדה טובים כדי לספק נתונים נוספים ולפתח משטרי דיכוי חיסוני חדשים כדי להבטיח את בטיחותם של ניסויים קליניים עתידיים בבני אדם.

ההישרדות ארוכת הטווח של השתלות לב אורתוטופיות אינה מוגבלת רק על ידי דחייה, אלא גם על ידי תפקוד לקוי של השתל הראשוני. השכיחות הכוללת של הפרעות בתפקוד ראשוני דווחה ונעה בין כ-40% ל-60% בצוותי מחקר שונים ^4,6,7. בשל הרגישות המוגברת של לבבות תורמי חזירים לפגיעה איסכמית, קבוצות מסוימות פיתחו מכשירי זלוף היפותרמיים כדי להפחית את השכיחות של תפקוד לקוי של השתל הראשוני. עם זאת, היפרטרופיה לבבית לאחר הניתוח נותרה קשה לשליטה. אפילו עם חזירים תורמים של קולטן הורמון גדילה (GHR), תפקוד הלב עלול להיפגע על ידי היעדר GHR, ובכך להגביל את כדאיות השתל^לטווח ארוך ^2,3. בהקשר זה, השתלת לב הטרוטופית מציגה מספר יתרונות: היא מונעת עומס מוקדם ועומס מוגזם, מפשטת את ההליך הכירורגי ומפחיתה את הזמן האיסכמי הכולל ^8,9. מודל זה משקף טוב יותר פגיעה בשתל המונעת על ידי דחייה קסנוגנית, ובניגוד להשתלה אורתוטופית, השתלת לב הטרוטופית מאפשרת הישרדות שתל לטווח ארוך, לפרוטומיות חוזרות ונשנות לביופסיות in vivo ותצפית ממושכת על הפעלה חיסונית ותפקוד דינמי של תאי חיסון. הוא משמש כמודל רב ערך לחקירת מנגנוני דחייה חיסונית קסנוגניים ולהערכת היעילות והבטיחות של אסטרטגיות דיכוי חיסון חדשות^10,11.

עם זאת, רוב המודלים של השתלת לב הטרוטופית בבטן השתמשו בונים כמושתלים, אך רכישת בבונים כחיות ניסוי נותרה מאתגרת במדינות רבות. לעומת זאת, קופי מקוק הם הפרימטים הלא-אנושיים הנפוצים ביותר ויש להם הומולוגיה פילוגנטית גבוהה עם בני אדם¹², מה שהופך אותם לחלופה מעשית למחקר השתלות זרים. עם זאת, גודל גופם הקטן משמעותית בהשוואה לבבונים מחייב התאמות ספציפיות של פרוטוקול כירורגי כדי להתאים לממדים האנטומיים הייחודיים שלהם.

מחקר זה מציג פרוטוקול שלב אחר שלב להשתלת לב הטרוטופית מחזיר GTKO לקוק מקוק. השימוש בחזירי נוקאאוט α-Gal (GTKO) נועד בעיקר למנוע דחייה היפר-חריפה, שאחרת תוביל לכשל השתל תוך דקות לאחר השתלת הלב. הוא בנוי באופן הבא: (1) עקרונות התאמה בין חזירים תורמים לקופי מקוק מקבלים; (2) אופטימיזציה של ההליך הכירורגי להשתלת לב הטרוטופית; ו-(3) ניהול פרי-ניתוחי. מחקר זה נועד להפיץ את טכניקות ההשתלה הללו כדי להקל על ההשוואה בין צוותי המחקר ולשפר את יכולת השחזור והרלוונטיות התרגומית של מחקרי השתלות לב.

מחקר זה אושר על ידי ועדת האתיקה של בעלי חיים בבית החולים Fuwai (FWAEC-JL-010-1/0-2020). קופי מקוק זכרים במשקל >9 ק"ג בגילאי 10-15 שנים, וחזירי במה מיניאטוריים זכרים במשקל 5-6 ק"ג (~60 יום) שימשו כדי למזער את דחיסת הבטן. קופי מקוק בעלי גוף גדול יותר קיבלו עדיפות כדי למנוע דחיסת בטן על ידי לב התורם וכדי להתאים לצמיחה לאחר ההשתלה. הריאגנטים והציוד המשמשים מפורטים בטבלת החומרים.

1. קריטריונים לבחירת התורם והנמען

1. בחירת קופי מקוק של הנמען
   1. בדיקת נוגדנים קיימים: השתמש בזרימה ציטומטרית כדי להעריך את רמת הנוגדנים הקסנוגניים המוכנים מראש, המאפשרים בחירת מושתלים עם סיכון אימונולוגי נמוך.
      הערה: בבדיקה זו, תאי אנדותל חזיר GTKO מאבי העורקים של חזירי GTKO מבודדים באמצעות עיכול אנזימטי, כפי שתואר קודם לכן¹³.
      1. דגירה של תאי אנדותל חזיר GTKO עם פלזמה מקבלת.
      2. לכמת את הקישור של IgM ו-IgG מקוק לתאי חזיר באמצעות נוגדנים משניים המסומנים פלואורסצנטית כנגד IgM ו-IgG מקוק. בחר מושתלים עם רמות נוגדנים נמוכות מראש.
   2. הערכת בריאות בסיסית: בצע בדיקות ביוכימיה בסרום, ספירת דם מלאה ותפקודי קרישה כדי לאשר תפקוד תקין של איברי הבסיס.
2. קריטריונים לבחירת חזיר תורם
   1. בדיקת אקו לב: בחר חזירים תורמים עם תפקוד תקין של החדר השמאלי והימני, ללא הפרעות מבניות או תפקודיות של מסתמי הלב, מקטע פליטה גדול מ-65%, וללא עדות ליתר לחץ דם ריאתי.
   2. התאמת מין: בחר חזירים תורמים מאותו מין כמו המקבל.
   3. סוג דם: בחר חזירים תורמים עם סוג דם O.

2. הכנה טרום ניתוחית

1. הרדמה וטשטוש
   1. הרדמה: לגרום לקופי מקוק עם קטמין (10 מ"ג/ק"ג) ומידזולם (1 מ"ג/ק"ג) (בהתאם לפרוטוקול המאושר על ידי המוסד). לאחר הזירוז, יש לשמור על הרדמה עם איזופלורן (2%-3%) בתוספת דקסמדטומידין (1 מיקרוגרם/ק"ג/שעה) ופרופופול (1-2 מ"ג/ק"ג/שעה).
   2. אינטובציה: החדרת החזיר התורם עם צינור אנדוטרכיאלי בקוטר 5.0 מ"מ. החדרו את קופ המקוק המקבל עם צינור אנדוטרכאלי בקוטר 5.5 מ"מ.
   3. החדרת קטטר שופכה: הכנס קטטר שתן כפול לומן 6-F לקוק; להשמיט בחזיר תורם.
2. הכנה וחיטוי שדות כירורגיים
   1. הכנת העור: גזור שיער מהחזה, הצוואר, הבטן, הגב והגפיים.
   2. חיטוי: יש לשפשף אזורים מגולחים עם פובידון-יוד, כולל פרסות (חזירים) או ידיים ורגליים (קופים).
3. מיקום קטטר ורידי מרכזי במקבל
   1. מיקום: מקם את מקוק הנמען בדקוביטוס צדדי שמאלי חלקי עם הרמת כתפיים כדי לייעל את החשיפה של אזור צוואר הרחם הימני. בחר את וריד הצוואר הפנימי הימני כאתר המועדף לגישה ורידית מרכזית.
   2. עיקור ועטיפה: חיטוי ועטיפה של השדה הניתוחי בפובידון יוד בעקבות פרוצדורות אספטיות סטנדרטיות.
   3. חתך וחשיפת כלי דם: בצע חתך של 5 ס"מ כ-1 ס"מ מדיאלי לשריר הסטרנוקלידומסטואיד, במקביל לגבול הפנימי שלו. בצע דיסקציה קהה של הפאשיה ומשוך את השריר לרוחב.
      1. זהה את וריד הצוואר החיצוני, הנמצא שטחי ומחוץ לנדן הצוואר. קשר בזהירות ענפים מתקשרים קטנים של וריד הצוואר הפנימי. פתח את מעטפת הצוואר כדי לחשוף את וריד הצוואר הפנימי, עצב הנרתיק ועורק הצוואר.
   4. החדרת קטטר: הכנס קטטר ורידי מרכזי בעל שלושה לומן 8-F בטכניקת מנהור לאחור. חבר את הקצה הפרוקסימלי של הצנתר למחט המנהור בתנאים סטריליים ומשוך אותו דרך המנהרה לתוך חתך הצוואר.
      1. החוצה את הקצה הדיסטלי בנקודת האמצע של עצם השכמה. חתוך את הצנתר לאורך מתאים כדי להבטיח שקצהו יגיע למפגש של הווריד הנבוב העליון והפרוזדור הימני.
   5. סגירת חתך: סגור את הפצע בשכבות. יש לסגור את הפאשיה והרקמה התת עורית באמצעות 3-0 תפרים נספגים, ולסגור את העור עם 1-0 תפרי משי. הקפידו על כיסוי מלא וקיבוע מאובטח של הצנתר מתחת לשכבה הפשיאלית כדי למזער את הסיכון לזיהום.
      1. השתמש בצנתר הוורידי המרכזי כנתיב גישה קריטי לנוזלים למתן תרופות לאחר הניתוח והחייאת נפח בקופי מקוק. בצע מדי יום נוגדי חיטוי פובידון-יוד וחבישת גזה סטרילית כדי לשמור על שלמות הצנתר ולמנוע זיהום.
      2. שמור על הצנתר הוורידי המרכזי באתרו עד להליך ההקרבה הסופי כדי להבטיח גישה אמינה לכלי הדם.

3. ניתוח מושתל (שלב טרום השרשה)

1. חתך בטן בקו האמצע
   1. בחירת חתך: בצע חתך בקו האמצע בבטן באורך של כ-12-15 ס"מ (איור 1A).
   2. פרטי חתך: חתך ברצף דרך העור, פאשיה שטחית, לינאה אלבה, פאשיה רוחבית ופאשיה תת-פריטונאלית (כולל שומן חוץ-פריטוניאלי), ואז חותך את הצפק הקודקודי כדי לגשת לחלל הבטן. השתמש בלהב כירורגי #23 לחתך העור ולצריבה חשמלית לדיסקציה עמוקה יותר של רקמות כדי להשיג חיתוך והמוסטזיס בו זמנית.
2. חקר הבטן וניהול המעיים
   1. הידבקויות: חקור את חלל הבטן כדי להעריך הידבקויות, תוך התמקדות בנוכחות הידבקויות בין המעיים לדופן הבטן. אם קיימים, נתחו בזהירות הידבקויות באמצעות צריבה חשמלית כדי למזער את הפגיעה ברקמות ולהפחית את הסיכון לחסימת מעיים מכנית לאחר הניתוח.
   2. הגנה על המעי: יש להוציא בעדינות את המעי הדק ולהניח אותו על גזה לחה סטרילית להגנה כדי לחשוף את אבי העורקים הבטני ואת הווריד הנבוב התחתון.
3. חשיפת אבי העורקים הבטני והווריד הנבוב התחתון
   1. גייסו את אבי העורקים הבטני ואת הווריד הנבוב התחתון: נתחו בזהירות את הרקמות הסובבות מאבי העורקים הבטני והווריד הנבוב התחתון, תוך מזעור הסיכון לפגיעה בכלי הדם ולדימום. חשוף את אבי העורקים הבטני ואת הווריד הנבוב התחתון בין מקורות עורקי הכליה לבין התפצלות עורקי הכסל באופן מלא ככל האפשר.
   2. לטפל בענפי כלי הדם: שמור על העורק המזנטרי התחתון ועל הווריד הנלווה לו במהלך הדיסקציה. שמור בקפידה על כל ענפי המותניים.

4. רכש לב תורם

1. סטרנוטומיה חציונית וגיוס כלי דם
   1. סטרנוטומיה חציונית: בצע סטרנוטומיה בקו האמצע כדי לגשת לחלל בית החזה (איור 1B). מחלקים בזהירות את עצם החזה של התורם בעזרת סכין עצם החזה של Lebsche.
   2. ניוד כלי דם: לאחר חשיפת חלל בית החזה, יש לחתוך את קרום הלב ולנתח בקפידה כדי להפריד בין אבי העורקים העולה לעורק הריאה הראשי.
2. הידוק כלי דם וקירור לב
   1. הידוק כלי דם: הנח תפר 4-0 בשורש אבי העורקים, ולאחר מכן הכנס צינורית קרדיופלגיה חד-פעמית לקרדיפלגיה (איור 1C). מהדקים ברצף את הווריד הנבוב העליון והתחתון, ואחריו הידוק צולב של אבי העורקים העולה.
      1. מיד לאחר הידוק צולב של אבי העורקים, חתכו את ורידי הריאה ואת הווריד הנבוב התחתון לצורך דקומפרסיה, וודא שהחתכים גדולים מספיק לניקוז מספיק.
   2. קירור לב: שאבו את חלל קרום הלב כדי לפנות שאריות דם, ולאחר מכן טבלו מיד את הלב במי מלח סטריליים קרים כקרח כדי להשיג סביבה היפותרמית (0-4 מעלות צלזיוס).
3. ניטור קרדיופלגיה וזלוף
   1. קרדיופלגיה: שמור על לחץ זלוף ב-150 מ"מ כספית באמצעות שקית לחץ. יש להחדיר ללב התורם 30 מ"ל/ק"ג משקל גוף של תמיסת HTK (למשל, 150 מ"ל לחזיר במשקל 5 ק"ג).
   2. ניטור זלוף: משש בו זמנית את שורש אבי העורקים והחדר השמאלי כדי לוודא לחץ אספקת קרדיופלגיה תקין ולמנוע התנפחות חדרית. לאחר השלמת עירוי לב, אשר דום לב על ידי מישוש ובדיקה חזותית. ודא היעדר פרפור שריר הלב, ולאחר מכן המשך בכריתת לב התורם.
4. כריתת לב ושימור
   1. כריתת לב: לאחר קרדיופלגיה, מרחו קרח נוסף על חלל קרום הלב (איור 1D). הרם בעדינות את הלב וחצה ברצף את הווריד הנבוב התחתון וורידי הריאה באמצעות מספריים כירורגיים. היזהר במיוחד כדי למנוע פגיעה בווריד הנבוב העליון ובפרוזדור הימני בעת חלוקת וריד הריאה העליון הימני.
      1. הגן על קנה הנשימה תוך ניתוק הדופן האחורית של הפרוזדור השמאלי. ברגע שהדיסקציה מגיעה לגובה גג הפרוזדורים השמאלי ועורקי הריאה, הנח את הלב באופן זמני בחזרה לחלל קרום הלב.
      2. להפריד ולחצות את קשת אבי העורקים הפרוקסימלי ואת הווריד הנבוב העליון כדי לחשוף את תא המטען הריאתי. המשך דיסקציה לאורך מישורי הרקמה לכיוון גג הפרוזדורים השמאלי, המאפשר הסרה של הלב וכלי הדם הגדולים שלו.
         הערה: קשר היטב את גדם וריד האזיגוס לאחר כריתת לב כדי למנוע דימום.
   2. שימור לב: טבלו מיד את הלב המושתל במי מלח קרים כקרח לשימור. בנוסף, יש להחדיר את לב התורם עם תמיסה אחרת של אוניברסיטת ויסקונסין (UW) בנפח של 30 מ"ל/ק"ג, מכיוון שתמיסת UW מספקת הגנה מעולה על שריר הלב (איור 1E).
5. הבדלים עיקריים מרכישת לב מתורם אנושי
   1. הגדרות לחץ עירוי: הגדר את לחץ הזלוף בשקית הלחץ ל-150 מ"מ כספית, הנחשב אופטימלי לזלוף שריר הלב.
   2. מיקום מהדק צולב אבי העורקים: מכיוון שלחזירים יש רק שני ענפים עיקריים מקשת אבי העורקים, הגזע הברכיוצפלי השמאלי והימני, הנח את המהדק הצולב בין הענפים הללו. קשרו את תא המטען הברכיוצפלי הימני עם תפרי משי לפני ההידוק הצולב כדי לשמור על אורך ארוך יותר של אבי העורקים התורם.
   3. אסטרטגיית הפחתת לחץ חדרית: כדי למזער את התפשטות יתר של החדר ולהגביל את הזמן האיסכמי, יש לפרק רק את החדר השמאלי באופן שגרתי. אם החדר הימני מתחיל להתנפח, פתח את הווריד הנבוב העליון מעל וריד האזיגוס. אם החדר השמאלי מתנפח, חתכו את וריד הריאה הימני והאריכו את החתך לכיוון הילום הריאתי הימני.

5. השתלת לב תורם

1. הכנת לב התורם
   1. הכנת לב התורם: סגור היטב את הווריד הנבוב העליון של התורם, הווריד הנבוב התחתון ופתחי וריד הריאות של הפרוזדור השמאלי באמצעות 4-0 תפרי פרולן.
   2. שימור הצומת הסינו-אטריאלי: שמור על הווריד הנבוב העליון של התורם ועל הצומת הסינו-אטריאלי הממוקם ליד התוספתן הפרוזדורי הימני.
2. אנסטומוזה מקצה לצד של עורק הריאה לווריד הנבוב התחתון
   1. הפריניזציה: מתן 5,000 יחידות של נתרן הפרין תוך ורידי לקוף מקוק המקבל לפני אנסטומוזה של לב התורם כדי למנוע היווצרות פקקת.
   2. אנסטומוזיס של עורק הריאה: הנח מהדק משיק אטראומטי של DeBakey על הווריד הנבוב התחתון המקבל. צור חתך אורכי מעט גדול יותר מעורק הריאה התורם כדי למזער היצרות לאחר הניתוח.
      1. בעזרת תפר פרולן 5-0 בעל זרועות כפולות, התחל את האנסטומוזה במצב השעה 12 על ידי החדרת מחט אחת מבפנים (הצד הלומינלי) של כלי הדם הנמען כלפי חוץ. הכנס את המחט השנייה מהצד של עורק הריאה התורם, ועבר מהלומן החוצה במיקום השעה 12 המתאים.
      2. קושרים את הקשר הראשוני על דופן הכלי החיצוני. הפוך את כיוון המחט, עובר מבחוץ חזרה ללומן של עורק הריאה התורם. המשיכו לתפור ברציפות עם כיוון השעון לכיוון השעה 6, תוך שימוש בוו עצבי כדי לשמור על מתח התפרים.
      3. סובב את הלב כדי לחשוף את הצד הנגדי, עבור למחט השנייה ותפור את הדופן הנגדית משעה 12 עד 6 עם דפוס כניסת מחט מבחוץ לפנים על כלי הדם המקבל ומבפנים לחוץ על כלי התורם, והשלים את האנסטומוזיס מקצה לצד.
   3. פינוי אוויר: לפני אבטחת הקשר האחרון, הזריק מי מלח לאתר האנטומוטי כדי להבטיח פינוי אוויר מלא. חסום את עורק הריאה התורם באמצעות מהדק כלי דם אטראומטי, ולאחר מכן שחרר ברצף את מהדק כלי הדם של הווריד הנבוב התחתון (איור 1F).
3. אנסטומוזה מקצה לצד של אבי העורקים התורם לאבי העורקים הבטני המקבל
   1. אנסטומוזיס אבי העורקים: מהדקים חלקית את אבי העורקים הבטני המקבל באמצעות מהדק משיק אטראומטי של DeBakey. בצע חתך אורכי מעט גדול יותר מקוטר אבי העורקים התורם כדי למנוע היצרות לאחר הניתוח.
      1. בעזרת תפר 5-0 פרולן בעל זרועות כפולות, התחל את האנסטומוזיס על ידי החדרת המחט במיקום השעה 12 מבפנים (הצד הלומינלי) של אבי העורקים הנמען כלפי חוץ. הכניסו את המחט השנייה מאבי העורקים התורם בשעה 12, גם מבפנים לחוץ, וקשרו את התפר הראשון על דופן הכלי החיצוני.
      2. הפוך את כיוון המחט, עובר מבחוץ לפנים על כלי התורם, ותפור ברציפות עם כיוון השעון למצב השעה 6, תוך שמירה על מתח תפר עם וו עצבי. הפוך את הלב כדי לחשוף את הצד הנגדי, הפוך את כיוון המחט בהתאם (מבחוץ לפנים על כלי התורם, מבפנים לחוץ על כלי המקבל), ותפר ברציפות משעה 12 עד 6, והשלים את האנסטומוזיס מקצה לצד.
   2. פינוי אוויר: לפני קשירת הקשר האחרון, יש להזריק מי מלח לתוך האנסטומוזיס כדי להוציא אוויר. שחרר ברצף את מהדק כלי הדם של אבי העורקים הבטני כדי להחזיר את זרימת הדם (איור 1G).
4. רפרפוזיה ודפיברילציה
   1. מניעת פרפור חדרים: יש לתת 3 מ"ג/ק"ג לידוקאין תוך ורידי לפני פרפרפוזיה כדי למנוע פרפור חדרים. התבונן בלב התורם להתכווצויות ספונטניות תוך 2 דקות.
   2. דפיברילציה: אם מתרחש פרפור חדרים, יש להפעיל דפיברילציה ישירה על ידי הנחת המשוטים במגע ישיר עם שני משטחי החדרים (שמאל וימין) ולספק שוק דו-פאזי של 5 ג'אול. הזמן האיסכמי הכולל של לב התורם היה כ-57.5 דקות ±-6.1 דקות (טבלה 1).
5. מיקום ניקוז
   1. ניקוז בלחץ שלילי: הנח צינור ניקוז בלחץ שלילי בחלל הבטן כדי למנוע הצטברות נוזלים לאחר הניתוח ולעקוב אחר דימום פעיל.
   2. אינדיקציה להסרת ניקוז: עקוב אחר נפח הניקוז לאחר הניתוח והסר את נקז הבטן כאשר התפוקה של 24 שעות יורדת מתחת ל-25 מ"ל.
6. סגירת בטן
   1. סגירת בטן ובדיקת אולטרסאונד: סוגרים את דופן הבטן בשכבות, בקירוב הפאשיה והרקמה התת עורית עם 3-0 תפרים נספגים, וסוגרים את העור עם 1-0 תפרי משי. בצע אולטרסאונד בטן לאחר הניתוח כדי להעריך את פעילות הלב (איור 1H).

6. ניהול לאחר ניתוח וניטור השתלות

1. הנחיות ניטור וטיפול כללי
   1. ניטור התנהגותי ותסמינים: עקוב באופן רציף אחר מצב הנמען במהלך השבועיים הראשונים לאחר הניתוח באמצעות מעקב וידאו. בצע הערכות יומיות של התנהגות, תיאבון, נפיחות בבטן, קוצר נשימה, בצקת ועשיית צרכים ומתן שתן רגילים.
      1. עקוב אחר משקל הגוף, המצב הגופני הכללי, ריפוי חתך כירורגי, זיהום פוטנציאלי בצנתר ורידי מרכזי, מראה רירי והצטברות נוזלים תוך בטניים.
   2. הערכת אולטרסאונד: השתמש באולטרסאונד כדי להעריך את תפקוד הלב המושתל באופן הטרוטופי ולזהות כל תפליט מסביב אם קיימות חריגות. איור 2 מציג תמונות אקו לב של הקסנוגרפט במהלך דיאסטולה וסיסטולה ביום שלאחר הניתוח (POD) 1, לצד כישלון השתל שנצפה בניסוי M3. הקו האדום מציין היפרטרופיה ניכרת של דופן החדר השמאלי בקסנוגרפט הכושל.

בהתבסס על השלבים הפרוצדורליים המוצגים באיור 1, הוקם בהצלחה מודל השתלת לב הטרוטופי מחזיר לקוק הניתן לשחזור. התהליך הכירורגי כלל לפרוטומיה בקו האמצע בקוף המקבל כדי לגשת לחלל הבטן וסטרנוטומיה חציונית בחזיר התורם לרכישת לב. לאחר פריקרדיוטומיה, לב התורם נעצר באמצעות תמיסת HTK ונשמר עוד יותר עם תמיסת UW תחת היפותרמיה מקומית. אנסטומוזה של כלי הדם בוצעה באופן מקצה לצד בין עורק הריאה התורם לבין הווריד הנבוב התחתון המקבל, ובין אבי העורקים התורם לאבי העורקים הבטני המקבל. הערכה אקו לב לאחר הניתוח אישרה כי לב התורם חזר לפעילות התכווצות עם תפקוד סיסטולי ודיאסטולי שמור, מה שמעיד על רפרפוזיה מוצלחת וכדאיות של השתל. תוצאות אלו מדגימות את ההיתכנות הטכנית של המודל ואת הפוטנציאל שלו לניטור תפקודי ארוך טווח של קסנוגרפטים בפרימטים שאינם אנושיים.

איור 1: השתלת לב הטרוטופי מחזיר לקוק: שלבים כירורגיים ואולטרסאונד לאחר הניתוח. (A) חלל הבטן של מקוק הוכנס דרך לפרוטומיה בקו האמצע עם דיסקציה שכבתית. (B) בוצעה סטרנוטומיה חציונית כדי לגשת לחלל בית החזה של תורם החזיר, ואחריה פריקרדיוטומיה. (C) צינורית זלוף הוחדרה לשורש אבי העורקים של לב התורם. (D) בעקבות דום לב שנגרם על ידי זלוף תמיסת HTK, לב התורם מקורר באופן מקומי עם רפש קרח מלוח. (E) בוצע זלוף לאחר מכן עם תמיסת שימור של אוניברסיטת ויסקונסין (UW). (F) אנסטומוזה מקצה לצד נוצרה בין עורק הריאה החזירי לבין הווריד הנבוב התחתון של המקבל. (G) אנסטומוזה מקצה לצד נבנתה בין אבי העורקים החזירי לבין אבי העורקים הבטני של המקבל. (H) אקו לב לאחר הניתוח נערך כדי להעריך את התפקוד הסיסטולי והדיאסטולי של לב התורם. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

איור 2: תמונות אקו לב מסדרות זמן של M3. (A) תמונות אקו לב של הקסנוגרפט במהלך דיאסטולה וסיסטולה ביום שלאחר הניתוח (POD) 1. (B) תמונות אקו לב של הקסנוגרפט במהלך דיאסטולה וסיסטולה ב-POD 3. (C) תמונות אקו לב של הקסנוגרפט במהלך דיאסטולה וסיסטולה ב-POD 10. (D) תמונות אקו לב של הקסנוגרפט במהלך דיאסטולה וסיסטולה בעת כישלון השתל. הקו האדום מצביע על עלייה משמעותית בעובי דופן החדר השמאלי במהלך הדיאסטולה. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

טבלה 1: סה"כ הזמן האיסכמי של לב התורם.

המחברים מצהירים שאין ניגודי אינטרסים.