טיפול בסטרפטוזוצין: מודל דג זברה של סוכרת מסוג 1

- סוכרת מסוג 1 היא מחלה אנושית שבה מערכת החיסון הורסת אינסולין ומייצרת תאי בטא בלבלב. סטרפטוזוצין יכול לגרום לסוכרת מסוג 1 בדגי זברה. ראשית, להרדים דג בתמיסה של 2-פנוקסיאתנול במי דגים. קחו את הדג והניחו אותו על צלחת פטרי, כשהצד הגחוני פונה כלפי מעלה. חישוב מינון סטרפטוזוצין על בסיס 0.35 מיליגרם לגרם ממשקל הדג ודילול בתמיסת מלח.

מתן סטרפטוזוצין על ידי הזרקה intraperitoneal מתחת לחגורת האגן בצד הגחוני של דג הזברה. סטרפטוזוצין דומה מבחינה מבנית ל-N-אצטילגלוקוזאמין, ליגנד הקושר את קולטן GLUT2 על תאי בטא בלבלב, מה שמוביל להפרשת אינסולין. לפיכך, סטרפטוזוצין נקשר לקולטני GLUT2 הנמצאים על תאי בטא בלבלב אשר מובילים אותו בתוך התאים.

עם הכניסה לתאי הבטא, סטרפטוזוצין מעורר תגובה חיסונית המובילה לשחרור של אנטיגנים עצמיים. האנטיגנים העצמיים גורמים למערכת החיסון לזהות תאי בטא כזרים ולהשמיד אותם, מה שמוביל לרמות נמוכות יותר של אינסולין. מתן מנות חוזרות ונשנות של סטרפטוזוצין בימים השלישי והחמישי, ולאחר מכן מנות שבועיות, אחת כל שבעה ימים כדי לשמור על התגובה החיסונית.

בדוגמה הבאה, ניצור מודל דג זברה של סוכרת מסוג 1. כדי לייצר דגי זברה עם סוכרת, הכינו מיכל התאוששות עם מי דגים רגילים ומיכל הרדמה של מי דגים עם דילול של 1 עד 1,000 של 2-פנוקסיאתנול. מתחת למכסה אדים, הכינו תמיסה של 0.3% סטרפטוזוצין או STZ על ידי הוספת 6 מיליגרם של STZ ל -2 מיליליטר של 0.09% נתרן כלורי ומיד הניחו את התמיסה על קרח.

בצינור נפרד, aliquot מספיק מלוחים עבור דגי בקרה. מלא מזרק חצי CC מצויד במחט מד 27 ו 1/2 עם STZ, או פתרונות בקרה, להבטיח כי לא בועות אוויר לכודים. מרדימים דג בודד על ידי הכנסתו למי הרדמה והמתנה עד להפסקת תנועת השחייה, כדקה עד שתי דקות.

לאחר ההרדמה, הניחו את הדג לזמן קצר על מגבת נייר כדי לספוג את עודפי המים. לאחר מכן, הניחו את הדג בסירת שקילה ושקלו אותו. לאחר מכן, מניחים את הדג על משטח יציב. לאחר מכן הכנס את המחט מעבר לשיפוע לתוך האספקט האחורי של הצפק הגחוני והזריק 0.35 מיליגרם לגרם STZ או נפח שווה ערך של תמיסת בקרה לתוך חלל הצפק של הדג.

לאחר ההזרקה, הניחו את הדג במיכל מי ההתאוששות ועקבו אחריו לפעילות שחייה רגילה. לאחר הזרקת מספיק דגים לניסוי, מעבירים אותם למכלים חיים רגילים ושומרים על טמפרטורה של 22 עד 24 מעלות צלזיוס. הטמפרטורה המופחתת היא קריטית להשראת היפרגליקמיה יעילה. כדי לגרום למצב ממושך של היפרגליקמיה גבוהה מאוד, בצע לוח זמנים של זריקות תכופות בשלב האינדוקציה ואחריו זריקות תחזוקה שבועיות כפי שמוצג כאן.