הדמיית סידן in vivo של הרכבים עצביים בגרעיני השורש הגבי השלמים של עכבר
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 7:09 דק׳ • May 29th, 2025
קחו עכבר טרנסגני מורדם עם גנגליון שורש גבי חשוף, או DRG, מקבץ של גופי תאי עצב חושיים המקבלים קלט מהגפיים האחוריות.
הנוירונים ב-DRG מבטאים אינדיקטור סידן ציטופלזמי.
באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי, דמיין את ה-DRG כדי לדמות את הפעילות הקולקטיבית של מספר רב של נוירונים.
ללא גירוי חיצוני, רמת הסידן התוך תאית הנמוכה שומרת על האינדיקטורים בקונפורמציה הטבעית שלהם, וכתוצאה מכך פלואורסצנטיות בסיסית קלושה.
הפעל גירוי מכני או תרמי על כפה אחורית, ויוצר פוטנציאל פעולה בנוירונים החושיים.
האות מתפשט ל-DRG, שם נפתחות תעלות סידן מגודרות מתח בתאי העצב, ומאפשרות זרימת סידן.
יוני הסידן הנוספים נקשרים לאינדיקטורים, וגורמים לשינוי קונפורמציה המגביר את עוצמת הקרינה.
התבונן בפלואורסצנטיות בהירה ב-DRG, כאשר העוצמה תואמת למספר הנוירונים המגורים המציגים זרם סידן.
הנח את העכבר על כרית מחוממת כדי לשמור על טמפרטורת הגוף על 37 מעלות צלזיוס. אתר את הגדלת המותניים על ידי מישוש עצם האגן של העכבר. לאחר מכן גלח את גב העכבר מעל אזור ההגדלה המותנית. בעזרת מספריים, בצע חתך מלבני תלת צדדי מעל ההגדלה המותנית, וקפל את העור בעזרת מלקחיים.
השתמש במספריים לחיתוך קפיץ 13 מילימטר כדי לבצע חתכים של 3 עד 4 מילימטרים בצד ימין של עמוד השדרה. השתמש במספריים כדי לחתוך את העור והשרירים לצדדים כדי לחשוף את עמוד השדרה. לאחר מכן, בעזרת מספריים של 8
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים