הדמיה in vivo של כלי מוח ופלאק עמילואיד במודל עכבר של מחלת אלצהיימר
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 2:46 דק׳ • June 17th, 2025
התחל עם דגם עכבר של מחלת אלצהיימר המאובטח על במת הרכבה על הראש. המוח החשוף מכוסה בנוזל מוחי מלאכותי, או aCSF, כדי לשמור על שלמות הרקמות.
ברקמת המוח, פלאק עמילואיד מסומן בפלואורופור כחול, בעוד שכלי המוח מסומנים בפלואורופור ירוק.
מקם את העכבר מתחת למיקרוסקופ לייזר דו-פוטוני להדמיית רקמות עמוקות.
באמצעות מטרת הטבילה במים, אתר את המוח החשוף.
לאחר מכן, האירו את המוח בלייזר באורך גל של 750 ננומטר, המעורר בו זמנית מולקולות פלואורסצנטיות כחולות וירוקות.
שימוש במסננים ספציפיים לפלואורסצנטיות מזהה את האותות של פלאק עמילואיד וכלי מוח, ומאפשר הדמיה של שני המבנים.
צלם תמונות בהגדלה נמוכה של כל אזור העניין או החזר ההשקעה בעומקים שונים כדי ליצור מפה תלת-ממדית.
לאחר מכן, עבור להגדלה גבוהה יותר להדמיה מפורטת של החזר ההשקעה.
זה יוצר תמונה ברזולוציה גבוהה המתארת רשתות כלי דם במוח עם פלאק עמילואיד, המאפשר ניתוח של שינויים בכלי הדם במוח במהלך התקדמות המחלה.
בשלב זה, העבירו את העכבר עם שלב הרכבה של הראש מתחת למיקרוסקופ הלייזר הדו-פוטוני. באמצעות מטרת טבילה במים פי 20 עם צמצם מספרי של 1.0, אתר את חלון הגולגולת הדק במרכז השדה האופטי באמצעות המנורה האפיפלואורסצנטית. ודא שהמטרה תמיד שקועה ב-ACSF.
לאחר מכן, התחל סריקת לייזר עם לייזר פועם נעול מצב. הגדר את אורך גל העירור ל-750 ננומטר כדי לזהות את הקרינה הנפלטת של Meth
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים