Name: הדמיה לא פולשנית של פטרת מופצת הזחלים דג הזברה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-07-30T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 45 s
Description: למד שיטת הדמיה לא פולשנית של זיהום פטרייתי בזחלי דג הזברה באמצעות מיקרו-הזרקת Candida albicans לחדר המוח האחורי. טכניקה זו מאפשרת מעקב אחר אינטראקציות מארח-פתוגן בזמן אמת וחקר מנגנוני חסינות מולדת ביצורים חיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מבקשים להודות במעבדה של ד&quot;ר קרול קים לאימונים microinjection, קלריסה הנרי עצה האצת פיתוח העובר ושימוש בציוד, ונתן לוסון לתרום fli1: דגים EGFP. אנו מודים לחברי המעבדה וילר קירות שון לקריאה ביקורתית של כתב היד. אנו רוצים גם להודות מארק Nilan לטיפול דגים עצות, ריאן Phennicie וקריסטין גאבור עבור ייעוץ טכני על הפרויקט הזה. עבודה זו מומנה על ידי אסיסטנט מחקר MAFES את האחים ק &#39;, האץ&#39; MAFES מענק E08913-08, וכן בפרס NCRR NIH P20RR016463 ר&#39; וילר.

<ol><li>Trede, N. S., Langenau, D. M., Traver, D., Look, A. T., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+zebrafish+to+understand+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">The use of zebrafish to understand immunity.</a> Immunity. 20, 367-379 (2004).</li>
<li>Kanther, M., Rawls, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host-microbe+interactions+in+the+developing+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Host-microbe interactions in the developing zebrafish.</a> Curr. Opin. Immunol. 22, 10-19 (2010).</li>
<li>Meeker, N. D., Trede, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunology+and+zebrafish%3A+spawning+new+models+of+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Comp+Immunol%22%5BJournal%5D)">Immunology and zebrafish: spawning new models of human disease.</a> Dev Comp Immunol. 32, 745-757 (2008).</li>
<li>Tobin, D., May, R. C., Wheeler, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish%3A+a+see-through+host+and+fluorescent+toolbox+to+probe+host-pathogen+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Zebrafish: a see-through host and fluorescent toolbox to probe host-pathogen interaction.</a> PLoS Pathog. , (2011).</li>
<li>Brothers, K. M., Newman, Z. R., Wheeler, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+imaging+of+disseminated+candidiasis+in+zebrafish+reveals+role+of+phagocyte+oxidase+in+limiting+filamentous+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Eukaryot.+Cell%22%5BJournal%5D)">Live imaging of disseminated candidiasis in zebrafish reveals role of phagocyte oxidase in limiting filamentous growth.</a> Eukaryot. Cell. 10, 932-944 (2011).</li>
<li>Pfaller, M. A., Diekema, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+invasive+candidiasis%3A+a+persistent+public+health+problem%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Microbiol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of invasive candidiasis: a persistent public health problem.</a> Clin. Microbiol. Rev. 20, 133-163 (2007).</li>
<li>Ashman, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+versus+adaptive+immunity+in+Candida+albicans+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Immunol.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Innate versus adaptive immunity in Candida albicans infection.</a> Immunol. Cell Biol. 82, 196-204 (2004).</li>
<li>de Repentigny, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+the+analysis+of+Candida+host-pathogen+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Animal models in the analysis of Candida host-pathogen interactions.</a> Curr. Opin. Microbiol. 7, 324-329 (2004).</li>
<li>Rogers, T. J., Balish, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunity+to+Candida+albicans%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Immunity to Candida albicans.</a> Microbiol. Rev. 44, 660-682 (1980).</li>
<li>Calderone, R., Sturtevant, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+interactions+with+Candida%5BTitle%5D)+AND+%22Immunol.+Ser%22%5BJournal%5D)">Macrophage interactions with Candida.</a> Immunol. Ser. 60, 505-515 (1994).</li>
<li>Frohner, I. E., Bourgeois, C., Yatsyk, K., Majer, O., Kuchler, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Candida+albicans+cell+surface+superoxide+dismutases+degrade+host-derived+reactive+oxygen+species+to+escape+innate+immune+surveillance%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Candida albicans cell surface superoxide dismutases degrade host-derived reactive oxygen species to escape innate immune surveillance.</a> Mol. Microbiol. 71, 240-252 (2009).</li>
<li>Kumamoto, C. A., Vinces, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contributions+of+hyphae+and+hypha-co-regulated+genes+to+Candida+albicans+virulence%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Contributions of hyphae and hypha-co-regulated genes to Candida albicans virulence.</a> Cell Microbiol. 7, 1546-1554 (2005).</li>
<li>Lorenz, M. C., Bender, J. A., Fink, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+response+of+Candida+albicans+upon+internalization+by+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Eukaryot.+Cell%22%5BJournal%5D)">Transcriptional response of Candida albicans upon internalization by macrophages.</a> Eukaryot. Cell. 3, 1076-1087 (2004).</li>
<li>Rubin-Bejerano, I., Fraser, I., Grisafi, P., Fink, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phagocytosis+by+neutrophils+induces+an+amino+acid+deprivation+response+in+Saccharomyces+cerevisiae+and+Candida+albicans%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">Phagocytosis by neutrophils induces an amino acid deprivation response in Saccharomyces cerevisiae and Candida albicans.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 100, 11007-11012 (2003).</li>
<li>Behnsen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+dimensionality+controls+the+interaction+of+phagocytes+with+the+pathogenic+fungi+Aspergillus+fumigatus+and+Candida+albicans%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Environmental dimensionality controls the interaction of phagocytes with the pathogenic fungi Aspergillus fumigatus and Candida albicans.</a> PLoS Pathog. 3, e13(2007).</li>
<li>Lavigne, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrin+engagement+mediates+the+human+polymorphonuclear+leukocyte+response+to+a+fungal+pathogen-associated+molecular+pattern%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Integrin engagement mediates the human polymorphonuclear leukocyte response to a fungal pathogen-associated molecular pattern.</a> J. Immunol. 178, 7276-7282 (2007).</li>
<li>Newman, S. L., Bhugra, B., Holly, A., Morris, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+killing+of+Candida+albicans+by+human+macrophages+adherent+to+type+1+collagen+matrices+via+induction+of+phagolysosomal+fusion%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Enhanced killing of Candida albicans by human macrophages adherent to type 1 collagen matrices via induction of phagolysosomal fusion.</a> Infect. Immun. 73, 770-777 (2005).</li>
<li>Netea, M. G., Brown, G. D., Kullberg, B. J., Gow, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+integrated+model+of+the+recognition+of+Candida+albicans+by+the+innate+immune+system%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">An integrated model of the recognition of Candida albicans by the innate immune system.</a> Nat. Rev. Microbiol. 6, 67-78 (2008).</li>
<li>Lam, S. H., Chua, H. L., Gong, Z., Lam, T. J., Sin, Y. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+maturation+of+the+immune+system+in+zebrafish%2C+Danio+rerio%3A+a+gene+expression+profiling%2C+in+situ+hybridization+and+immunological+study%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Comp.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Development and maturation of the immune system in zebrafish, Danio rerio: a gene expression profiling, in situ hybridization and immunological study.</a> Dev. Comp. Immunol. 28, 9-28 (2004).</li>
<li>Magnadottir, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+immunity+of+fish+%28overview%29%5BTitle%5D)+AND+%22Fish+Shellfish+Immunol%22%5BJournal%5D)">Innate immunity of fish (overview).</a> Fish Shellfish Immunol. 20, 137-151 (2006).</li>
<li>Sullivan, C., Kim, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+as+a+model+for+infectious+disease+and+immune+function%5BTitle%5D)+AND+%22Fish+Shellfish+Immunol%22%5BJournal%5D)">Zebrafish as a model for infectious disease and immune function.</a> Fish Shellfish Immunol. 25, 341-350 (2008).</li>
<li>Lawson, N. D., Weinstein, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+imaging+of+embryonic+vascular+development+using+transgenic+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">In vivo imaging of embryonic vascular development using transgenic zebrafish.</a> Dev. Biol. 248, 307-318 (2002).</li>
<li>Ellett, F., Pase, L., Hayman, J. W., Andrianopoulos, A., Lieschke, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((mpeg1+promoter+transgenes+direct+macrophage-lineage+expression+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">mpeg1 promoter transgenes direct macrophage-lineage expression in zebrafish.</a> Blood. 117, e49-e56 (2011).</li>
<li>Renshaw, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+transgenic+zebrafish+model+of+neutrophilic+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">A transgenic zebrafish model of neutrophilic inflammation.</a> Blood. 108, 3976-3978 (2006).</li>
<li>Lesley, R., Ramakrishnan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+early+mycobacterial+pathogenesis+from+the+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Insights into early mycobacterial pathogenesis from the zebrafish.</a> Curr Opin. Microbiol. 11, 277-283 (2008).</li>
<li>Chao, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+as+a+model+host+for+Candida+albicans+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Zebrafish as a model host for Candida albicans infection.</a> Infect. Immun. 78, 2512-2521 (2010).</li>
<li>Kimmel, C. B., Ballard, W. W., Kimmel, S. R., Ullmann, B., Schilling, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stages+of+embryonic+development+of+the+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Stages of embryonic development of the zebrafish.</a> Dev Dyn. , 203-253 (1995).</li>
<li>Cianciolo Cosentino, C., Roman, B. L., Drummond, I. A., Hukriede, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravenous+Microinjections+of+Zebrafish+Larvae+to+Study+Acute+Kidney+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Intravenous Microinjections of Zebrafish Larvae to Study Acute Kidney Injury.</a> J. Vis. Exp. (42), e2079(2010).</li>
<li>Haddon, C., Lewis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+ear+development+in+the+embryo+of+the+zebrafish%2C+Danio+rerio%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Early ear development in the embryo of the zebrafish, Danio rerio.</a> J. Comp. Neurol. 365, 113-128 (1996).</li>
<li>Yuan, S., Sun, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microinjection+of+mRNA+and+Morpholino+Antisense+Oligonucleotides+in+Zebrafish+Embryos%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Microinjection of mRNA and Morpholino Antisense Oligonucleotides in Zebrafish Embryos.</a> J. Vis. Exp. (27), e1113(2009).</li>
<li>Rosen, J. N., Sweeney, M. F., Mably, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microinjection+of+Zebrafish+Embryos+to+Analyze+Gene+Function%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Microinjection of Zebrafish Embryos to Analyze Gene Function.</a> J. Vis. Exp. (25), e1115(2009).</li>
<li>Ariga, J., Walker, S. L., Mumm, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multicolor+Time-lapse+Imaging+of+Transgenic+Zebrafish%3A+Visualizing+Retinal+Stem+Cells+Activated+by+Targeted+Neuronal+Cell+Ablation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Multicolor Time-lapse Imaging of Transgenic Zebrafish: Visualizing Retinal Stem Cells Activated by Targeted Neuronal Cell Ablation.</a> J. Vis. Exp. (43), e2093(2010).</li>
<li>Redd, M. J., Kelly, G., Dunn, G., Way, M., Martin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+macrophage+chemotaxis+in+vivo%3A+studies+of+microtubule+function+in+zebrafish+wound+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Motil.+Cytoskeleton%22%5BJournal%5D)">Imaging macrophage chemotaxis in vivo: studies of microtubule function in zebrafish wound inflammation.</a> Cell Motil. Cytoskeleton. 63, 415-422 (2006).</li>
<li>Gutzman, J. H., Sive, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+Brain+Ventricle+Injection%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Zebrafish Brain Ventricle Injection.</a> J. Vis. Exp. (26), e1218(2009).</li>
<li>Davis, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+visualization+of+mycobacterium-macrophage+interactions+leading+to+initiation+of+granuloma+formation+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Real-time visualization of mycobacterium-macrophage interactions leading to initiation of granuloma formation in zebrafish embryos.</a> Immunity. 17, 693-702 (2002).</li>
<li>Meijer, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+real-time+imaging+of+a+myc-expressing+neutrophil+population+involved+in+inflammation+and+mycobacterial+granuloma+formation+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Comp.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Identification and real-time imaging of a myc-expressing neutrophil population involved in inflammation and mycobacterial granuloma formation in zebrafish.</a> Dev. Comp. Immunol. 32, 36-49 (2008).</li>
<li>Mathias, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+imaging+of+chronic+inflammation+caused+by+mutation+of+zebrafish+Hai1%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Live imaging of chronic inflammation caused by mutation of zebrafish Hai1.</a> J. Cell Sci. 120, 3372-3383 (2007).</li>
<li>Hall, C., Flores, M. V., Storm, T., Crosier, K., Crosier, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+lysozyme+C+promoter+drives+myeloid-specific+expression+in+transgenic+fish%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">The zebrafish lysozyme C promoter drives myeloid-specific expression in transgenic fish.</a> BMC Dev. Biol. 7, 42(2007).</li>
<li>Vergunst, A. C., Meijer, A. H., Renshaw, S. A., O'Callaghan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Burkholderia+cenocepacia+creates+an+intramacrophage+replication+niche+in+zebrafish+embryos%2C+followed+by+bacterial+dissemination+and+establishment+of+systemic+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Burkholderia cenocepacia creates an intramacrophage replication niche in zebrafish embryos, followed by bacterial dissemination and establishment of systemic infection.</a> Infect Immun. 78, 1495-1508 (2010).</li>
<li>Le Guyader, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Origins+and+unconventional+behavior+of+neutrophils+in+developing+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Origins and unconventional behavior of neutrophils in developing zebrafish.</a> Blood. 111, 132-141 (2008).</li>
<li>Clatworthy, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pseudomonas+aeruginosa+infection+of+zebrafish+involves+both+host+and+pathogen+determinants%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Pseudomonas aeruginosa infection of zebrafish involves both host and pathogen determinants.</a> Infect. Immun. 77, 1293-1303 (2009).</li>
<li>Brannon, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pseudomonas+aeruginosa+Type+III+secretion+system+interacts+with+phagocytes+to+modulate+systemic+infection+of+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Pseudomonas aeruginosa Type III secretion system interacts with phagocytes to modulate systemic infection of zebrafish embryos.</a> Cell Microbiol. 11, 755-768 (2009).</li>
<li>Levraud, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+observation+of+listeria+monocytogenes-phagocyte+interactions+in+living+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Real-time observation of listeria monocytogenes-phagocyte interactions in living zebrafish larvae.</a> Infect. Immun. 77, 3651-3660 (2009).</li>
<li>van der Sar, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+embryos+as+a+model+host+for+the+real+time+analysis+of+Salmonella+typhimurium+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Zebrafish embryos as a model host for the real time analysis of Salmonella typhimurium infections.</a> Cell Microbiol. 5, 601-611 (2003).</li>
<li>Phennicie, R. T., Sullivan, M. J., Singer, J. T., Yoder, J. A., Kim, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+resistance+to+Pseudomonas+aeruginosa+infection+in+zebrafish+is+mediated+by+the+cystic+fibrosis+transmembrane+conductance+regulator%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Specific resistance to Pseudomonas aeruginosa infection in zebrafish is mediated by the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator.</a> Infect Immun. 78, 4542-4550 (2010).</li>
<li>Prajsnar, T. K., Cunliffe, V. T., Foster, S. J., Renshaw, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+vertebrate+model+of+Staphylococcus+aureus+infection+reveals+phagocyte-dependent+resistance+of+zebrafish+to+non-host+specialized+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Microbiol%22%5BJournal%5D)">A novel vertebrate model of Staphylococcus aureus infection reveals phagocyte-dependent resistance of zebrafish to non-host specialized pathogens.</a> Cell Microbiol. 10, 2312-2325 (2008).</li>
</ol>

אין ניגוד עניינים הצהיר.

שיטת microinjection דג הזברה המוצג כאן שונה Gutzman et al. 34 ב שכאן אנחנו מדגימים הזרקת דרך שלפוחית ​​otic לתוך החדר למוח האחורי של הזחלים hpf 36-48. השיטה מאפשרת לנו לתאר להזרקה קבועה של 10-15 שמרים לתוך החדר למוח האחורי עם נזק לרקמות מופחת. פרוטוקול זה מייצר זיהום מקומי בתחילה שמתפשט בכל הגוף על ידי 24 HPI (איור 1) ואת התוצאות הקטלניות משמעותי / תחלואה 5. החדר למוח האחורי לא אטום לגמרי עד 48 hpf 27, 29. בשלב מוקדם זה של...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם מגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td><td> הערות (לא חובה) </td></tr><tr><td> הרבייה טנקים </td><td> בתי גידול מימיים </td><td> 2L </td><td></td></tr><tr><td> 1.7 מ&quot;ל צינורות </td><td> Axygen </td><td> MCT-175-C </td><td></td></tr><tr><td> מיידית האוקיינוס </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> S17957C </td><td></td></tr><tr><td> מנות נוספות עמוקים פטרי </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 08-757-11z </td><td></td></tr><tr><td> סטנדרט פטרי מנות </td><td> VWR מדעי </td><td> 25384-302 </td><td></td></tr><tr><td> העברת בטפי להחדרת נוזלים </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> 13-711-7M </td><td></td></tr><tr><td> תמצית שמרים </td><td> VWR ScientiFIC </td><td> 90000-726 </td><td></td></tr><tr><td> Peptone </td><td> VWR מדעי </td><td> 90000-264 </td><td></td></tr><tr><td> דקסטרוז </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> D16-1 </td><td></td></tr><tr><td> אגר </td><td> VWR מדעי </td><td> 90000-760 </td><td></td></tr><tr><td> פנויה Hemocytometer </td><td> VWR מדעי </td><td> 82030-468 </td><td></td></tr><tr><td> פוספט שנאגרו מלוחים </td><td> VWR מדעי </td><td> 12001-986 </td><td></td></tr><tr><td> דומון Dumoxel מלקטת </td><td> VWR מדעי </td><td> 100501-806 </td><td></td></tr><tr><td> עץ פינים </td><td> VWR מדעי </td><td> 10805-018 </td><td></td></tr><tr><td> KimWipes </td><td> VWR מדעי </td><td> 300053-964 </td><td></td></tr><tr><td> נמוכה ממיסיםAgarose </td><td> VWR מדעי </td><td> 12001-722 </td><td></td></tr><tr><td> Agarose מנות הזרקה </td><td> VWR מדעי </td><td> 12002-102 </td><td></td></tr><tr><td> בראון הלוהט micropipette פולר </td><td> סאטר מכשירים </td><td> P-97 </td><td></td></tr><tr><td> מוטות זכוכית חלולים </td><td> סאטר מכשירים </td><td> BF120-69-10 </td><td> על מוטות זכוכית זכוכית חלקה על ידי חימום מעל בונזן מבער </td></tr><tr><td> פיפטה תיבת אחסון </td><td> סאטר מכשירים </td><td> BX10 </td><td></td></tr><tr><td> MPPI-3 הזרקת מערכת </td><td> מכשור מדעי יישומי </td><td> MPPI-3 </td><td></td></tr><tr><td> לחץ בגב היחידה </td><td> מכשור מדעי יישומי </td><td> BPU </td><td></td></tr><tr><td> Micropipette ערכת מחזיק </td><td> Appliאד מכשור מדעי </td><td> MPIP </td><td></td></tr><tr><td> רגל החלף </td><td> מכשור מדעי יישומי </td><td> FSW </td><td></td></tr><tr><td> Micromanipulator </td><td> מכשור מדעי יישומי </td><td> MM33 </td><td></td></tr><tr><td> בסיס מגנטי </td><td> מכשור מדעי יישומי </td><td> בסיס מגנטי </td><td></td></tr><tr><td> Tricaine sulfonate מתאן </td><td> המערבי כימיים בע&quot;מ </td><td> MS-222 </td><td></td></tr><tr><td> לנתח את היקף </td><td> אולימפוס </td><td> SZ61 בסיס העליון SZX-ILLB2-100 </td><td></td></tr><tr><td> Confocal מיקרוסקופ </td><td> אולימפוס </td><td> IX-81 עם מערכת FV-1000 סריקת לייזר confocal </td><td></td></tr><tr><td> TC-7 תרבות רקמות רולר תוף עם גלגל 14 אינץ בדיקה צינור </td><td> ניו ברונסוויק מדעי </td><td> TC-7 </td><td></td></tr><tr><td> הדמיה מנות </td><td> MatTek Corporation </td><td> P24G-1.0-10-F </td><td></td></tr><tr><td> פיפטה טיפים טוען מחטים </td><td> Eppendorf </td><td> 930001007 </td><td></td></tr><tr><td> צלחת רשתות יציקה </td><td> מסתגלת מדע כלים </td><td> TU-1 </td><td></td></tr><tr><td> מחוממת שלב </td><td> Bioptechs בע&quot;מ </td><td> דלתא T-5 </td><td></td></tr><tr><td> שטוחה מרית </td><td> VWR מדעי </td><td> 82027-486 </td><td></td></tr><tr><td> נפות פלסטיק </td><td> מרכולתם של Knutsford מחובר </td><td> 12 ס&quot;מ </td><td></td></tr><tr><td> Parafilm </td><td> VWR מדעי </td><td> 52858-000 </td><td></td></tr><tr><td> מערבולת Genie </td><td> VWR מדעי </td><td> 14216-184 </td><td></td></tr><tr><td> 150 x 16 מ&quot;מ צינורות תרבות </td><td> VWR מדעי </td><td> 60825-435 </td><td></td></tr><tr><td> Nanodrop </td><td> Thermo Scientific </td><td> ND 2000 </td><td></td></tr><tr><td> פנול אדום </td><td> VWR מדעי </td><td> 97062-478 </td><td></td></tr><tr><td> HCl </td><td> VWR מדעי </td><td> 87003-216 </td><td></td></tr><tr><td> NaCl </td><td> VWR מדעי </td><td> BDH4534-500GP </td><td></td></tr><tr><td> KCl </td><td> VWR מדעי </td><td> BDH4532-500GP </td><td></td></tr><tr><td> MgSO 4 </td><td> VWR מדעי </td><td> BDH0246-500GP </td><td></td></tr><tr><td> Ca (NO 3) 2 </td><td> VWR מדעי </td><td> BDH0226-500GP </td><td></td></tr><tr><td> HEPES </td><td> VWR מדעי </td><td> BDH4520-500GP </td><td></td></tR&gt; <tr><td> Morpholinos </td><td> GeneTools, LLC </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

הדמיה לא פולשנית של פטרת מופצת הזחלים דג הזברה

Non-invasive Imaging of Disseminated Candidiasis in Zebrafish Larvae

קנדידה להפיץ נגרמת על ידי פתוגן קנדידה אלביקנס היא בעיה חשיבות קלינית אצל אנשים מאושפזים והיא קשורה עם תמותה המיוחס 30 עד 40% 6. קנדידה מערכתית נשלטת בדרך כלל על ידי חיסון מולדת, אנשים עם פגמים גנטיים מולדים רכיבי תא החיסון כגון NADPH אוקסידאז תא בלען רגישים יותר candidemia 7-9. מעט מאוד ידוע על הדינמיקה של C. אלביקנס אינטראקציה עם תאים חיסוניים מולדים in vivo. נרחב במבחנה קבעו כי מחוץ המארח ג אלביקנס germinates בתוך מקרופאגים, והוא נהרס במהירות על ידי נויטרופילים 10-14. במבחנה, אך שימושי, לא יכול לשחזר מורכבים בסביבה vivo, הכולל זמן תלויי הדינמיקה של רמות ציטוקינים, קבצים מצורפים תאי מטריקס ואנשי קשר אינטר 10, 15-18 </sup&gt;. כדי לבחון את התרומה של גורמים אלה באינטראקציה בין מאכסן לפתוגן, חשוב למצוא אורגניזם המודל לחזות היבטים אלה של זיהום הלא פולשני שורה שלמה חי. הזחל דג הזברה מציע שורה חוליות ייחודי צדדי לחקר זיהום. במשך 30 הימים הראשונים של התפתחות הזחלים דג הזברה יש רק הגנה החיסון המולדת 2, 19-21, לפשט את חקר מחלות כמו קנדידה שהפיצו, כי הם תלויים במידה רבה חסינות מולדת. גודל שקיפות קטנה של דג הזברה הזחלים לאפשר הדמיה של הדינמיקה זיהום ברמה התאית עבור המארחת והן הפתוגן. הזחלים מהונדס עם קורנים תאים חיסוניים מולדים יכול לשמש כדי לזהות סוגים מסוימים תאים המעורבים זיהום 22-24. שונה נגד תחושת oligonucleotides (Morpholinos) ניתן להשתמש כדי להפיל רכיבים חיסוניים שונים כגון NADPH אוקסידאז תא בלען וללמוד את השינויים בתגובה fungaאני זיהום 5. בנוסף על היתרונות האתיים והמעשיים של השימוש חוליות נמוך קטן, הזחלים דג הזברה מציעה אפשרות ייחודית תמונת הקרב ודק בין הפתוגן ומארח הן intravitally וגם בצבע. דג הזברה נעשה שימוש לזיהום מודל עבור מספר של חיידקים פתוגניים האדם, כבר סייעה התקדמות גדולה בהבנה שלנו של זיהום mycobacterial 3, 25. עם זאת, רק לאחרונה יש פתוגנים הרבה יותר גדול כמו פטריות השתמשו כדי להדביק את הזחל 5, 23, 26, ועד כה לא היתה תיאור ויזואלי מפורט של המתודולוגיה זיהום. כאן אנו מציגים טכניקות שלנו microinjection למוח האחורי החדר של דג הזברה 25 דקדקנית, כולל שינויים שלנו על הפרוטוקולים הקודמים. הממצאים שלנו תוך שימוש במודל דג הזברה הזחל על זיהום פטרייתי לסטות במבחנה ולחזק את הצורך לבחון בין מאכסן לפתוגן interaction בסביבה מורכבת של המארח ולא מערכת פשוטה של צלחת פטרי 5.

ההתפתחות המהירה, גודל קטן השקיפות של דג הזברה הם יתרונות עצומים למחקר שליטה החיסון המולדת של זיהום<sup&gt; 1-4</sup&gt;. כאן אנו מדגימים טכניקות הדבקה הזחלים דג הזברה באמצעות הפתוגן פטרייתי<em&gt; קנדידה אלביקנס</em&gt; על ידי microinjection, המתודולוגיה בשימוש לאחרונה לערב פעילות תא בלען NADPH אוקסידאז שולט dimorphism פטרייתי<sup&gt; 5</sup&gt;.

קנדידזיס מופץ (Disseminated candidiasis) הנגרם על ידי הפתוגן Candida albicans הוא בעיה קלינית משמעותית בקרב אנשים המאושפזים בבית חולים, והוא קשור לשיעור תמותה של 30...

המטרה הכללית של פרוצדורה זו היא להדגים טכניקות להדבקת זחלי דגי זברפיש באמצעות הפטרייה הפתוגנית candida albicans. ראשית, מכינים תרבית פטרייתית פלואורסצנטית ומצפים את עוברי הדגים. לאחר מכן, מסדרים את הדגים בשורה על גבי צלחת הזרקה מסוג aros.מזריקים במיקרו-הזרקה *Candida albicans* דרך האוזן של כל דג אל תוך הפתח של חדרי המוח האחורי, לאחר מכן מטמיעים בג'ל agarose בנקודת התכה נמוכה ומדמים באמצעות מיקרוסקופיית פלואורסצנציה אפיפלוורסצנטית. בסופו של דבר, ניתן להשתמש בשיטה זו כדי לדגם באופן לא פולשני את האינטראקציה בין המאחס לפתוגן בסביבה המורכבת של המאחס, במקום במערכת המפושטת של צלחית פטרי. היתרון המרכזי של טכניקה זו על פני שיטות קיימות, כגון הזרקה לווריד הזנב, הוא היצירה של זיהום מקומי שאינו מוביל למחלה מפושטת קטלנית.בנוסף, טכניקה זו מאפשרת הזרקה יעילה של תאי C bucan הגדולים מטבעם לתוך זחלי דגים-זבב (zebrafish) קטנים. התחילו בריסוס של מאגר candida albican על מצע דקסטרוז אגר עבור שמרים (yeast pone dextrose agar plate). הדגרירו את הצלחת למשך לילה בטמפרטורה של 37 °C כדי לאפשר לגליונות לצמוח.ברגע שהמושבות נראות לעין, השתמש במקל עץ סטרילי כדי לדגום מושבה מבודדת והמס את השמרים ב-5 mL של מצע תרבית טרי מסוג yeast Extract Pepto dextrose בתוך מבחנות תרבית של 16x150 mm. הנח את התרבית על תוף גלגול לתרביות רקמה, המצויד בגלגל למבחנות, והדגר למשך לילה ב-37 °C. למחרת, העבר 1 mL מהתרבית למבחנת מיקרוצנטריפוגה של 1.5 mL וסבב אותה בצנטריפוגה ב-14,000 ×g למשך דקה אחת כדי להשקיע את התאים, לאחר מכן השלך את הנוזל העליון (supernatant) וערבב את המשקע באמצעות וורטקס כדי לשחרר אותו.ששעוב את התאים ב-1 mL של PBS, בצע ערבול ב-vortex וסבב אותם שוב במ centriuge. לאחר מכן, השלך את העילוי (supinate) וחזור על שטיפה זו. בצע את השלב שלוש פעמים כדי להסיר שאריות של מצע גידול.לאחר שטיפת התאים, ספרו אותם באמצעות המוציטומטר (hemo cytometer) בדילול של 1:100 ב-PBS. עבור תרבית של 12 שעות, ניתן לצפות לכמות של 3 עד 4 כפול 10⁸ תאים למיליליטר. השתמשו בשמרים בריכוז סופי של 10⁷ תאים למיליליטר.השתמשו במסננת כדי לאסוף עוברים של דגי זברה (zebra fish) ממיכל השבייה ביום שלפני ההזרקה, ואחסנו אותם בתמיסת מי ביצים המכילה 60 mg/mL של מלחים מסוג instant ocean במים דה-יוניים סטריליים. לאחר מכן, מקמו את העוברים בטמפרטורה של 33 °C למשך 24 שעות במחזור של 12 שעות אור וחושך. הדבר מאפשר את התפתחות העובר לשלב הלרבה prim 25, השלב המיטבי להדבקה ביום ההדבקה.העבירו את העוברים באמצעות פיפטית העברה ב-60 milliliters של מי ביצים לפטרי דלילה במיוחד. לאחר מכן, השתמשו במיקרוסקופ דיסקציה ובפינצטות dumont כדי להסיר את המעטפת מהעוברים. ניתן לבצע זאת על ידי משיכה עדינה של ה-Corian לצדדים, בדומה לפתיחת שקית צ'יפס, עד שהדג פולט החוצה.לאחר שכל העוברים עברו הסרת מעטפת (dec coated). בזמן שהצלחת פטרי מטה כדי להסיט את הדגים לכיוון המרכז, העבירו את הדגים למכסה של הצלחת, הסירו את המצע והחליפו אותו במי ביצים טריים. הוסיפו את הדגים למי הביצים הטריים.הכינו תמיסה של 200 µg/mL של tricaine methane sulfonate להרדמת הדגים באמצעות פיפטת העברה. אספו 20 עד 50 עוברים והעבירו אותם לתמיסות ההרדמה למשך דקה עד שתי דקות, או עד להפסקת התנועה. במקביל, הפעילו את יחידת ההזרקה, וודאו שמתג הלחץ במצב pulse, וכי משך הפולס (pulse duration) מוגדר ל-9, עם 3 PSI עבור יחידת לחץ הגיבוי (back pressure unit).פתח בהדרגה את השסתום של מיכל החנקן עד שלחץ ההזרקה יגיע ל-30 PSI. לאחר מכן, טען מיקרופיפט עם 5 µL של תמיסת *Candida albicans* שעברה וורטקס, והנח אותו במחזיק המיקרופיפט. הנח צלחת פטרי עמוקה המכילה מים על משטח מיקרוסקופ ההשחלה, וכוון את מיקומו של המיקרופיפט עד שיהיה בטווח הראייה וקצהו יהיה טבול חלקית בלבד במים.לאחר מכן, באמצעות פינצטה, גזרו את מחט הפיפטה המאוחדת במרחק של כ-שלושה מילימטרים מהקצה. אם המחט נגזרה בהצלחה, לחיצה על מתג הרגל של יחידת ההזרקה תאפשר את הוצאת הנוזל. באמצעות זכוכית מדורגת, מדדו את הנפח שהוצא, ולאחר מכן כוון את הלחץ כך שנפח הנוזל שהוצא יהיה בקוטר של 0.21 מילימטרים, או מעט פחות מגודל האישון של עובר דג זברה.לאחר הגדרת המיקרוסקופ והרדמת הדגים, הגדילו את נפח הנוזל בצלחת כדי למשוך את הדגים למרכז ושאבו אותם לתוך פיפטת העברה. הקשו בזהירות על דופן הפיפטה כדי שהדגים ישקעו אל הקצה. לאחר מכן, תוך שימוש בנפח קטן ככל האפשר, העבירו בעדינות את הדגים לצלחת הזרקה של זחליים שחוממה מראש ל-28 °C.בעזרת מוט זכוכית חלק, יישרו בזהירות את הדגים. לאחר מכן, הסִירו בעזרת נייר סופג כמה שיותר נוזל מהצלחית. הניחו את צלחית ה-aros עם הדגים תחת המיקרוסקופ עד שהמחט והדג הראשון נראים בבירור.ודאו שכל דג עדיין חי על ידי תצפית על פעימות לב נראות לעין. אם הדג מת, השליכו אותו ועברו לדג הבא. הזיזו את מחט הזכוכית לכיוון הדג תוך ביצוע זום פנימה.בעודכם עושים זאת, הכניסו בזהירות את המחט למבנה המעגלי של אוזן הדג, שבו שתי אבני אוזן הממוקמות ממש מאחורי העין. ברגע שהמחט נמצאת במיקומה, מזריקו את השמרים באמצעות מתג הרגל. אם המחט הוכנסה נכונה, תויה נרחב מעט בחדר המוח האחורי של הדג לאחר ההזרקה; הוציאו את המחט וחזרו על הפעולה עם הדג הבא.כל התהליך לא אמור להימשך יותר מ-15 או 20 דקות, אחרת הדגים יתייבשו וימותו לאחר זמן זה. השמרים ישקעו גם הם לתחתית המיקרופיפט ויביאו להדבקה לא אחידה, למינונים שגויים ו/או לסתימה של המיקרופיפט המשותף. לאחר שכל הדגים הוזרקו, השתמשו במי ביצים כדי לשטוף אותם מה-aros אל תוך צלחת פטרי נקייה המכילה 60 milliliters של מי ביצים.לאחר מכן, מקם את הצלחית בטמפרטורה של 28 °C. סגור את שסתום החנקן, והעבר את מתג ההזרקה למצב רציף (continuous) כדי לשחרר את הלחץ בקו המיכל. כאשר הלחץ יירד לאפס, החזר את המתג למצב פולס (pulse) וכבה את יחידת ההזרקה.התחילו בהרדמה של הדגים המודבקים ב-tricaine methane sulfate כפי שמתואר קודם לכן. לאחר הרדמת הדגים, השתמשו בפיפט כדי להעביר דג אחד בכל פעם לצלחית פטרי המכילה 0.4% low melt agar. לאחר מכן, השתמשו בפיפט העברה תוך העברת כמות מזערית ככל האפשר של agar.העבירו כל דג מכלי הפטרי למערכת בורות של צלחת דימיג עם תחתית זכוכית, כאשר בערך 0.2 milliliters של 0.4% Low melt agarose המועשרו ב-200 micrograms per milliliter של חומר הרדמה מתווספים מעל הדג, כך שהמעגלים הפנימיים יתמלאו ושכבה דקה של agarose תתפשט על תחתית הבור. כעת ניתן לדגם את הדגים למשך עד 24 שעות באמצעות מיקרוסקופ הפוך עם מערכת קונפוקלית לסריקת לייזר. חמש שעות לאחר הדבקת דגי זברה ב-candida albicans פלואורסצנטי אדום.השמרים נראים במוח האחורי של הדג בדגי FL I one EGFP, כגון אלה, כאשר האנדותל כלי הדם ותאים דמויי מקרופאגים בכל רחבי גופו של הדג פלואורסצנטיים. הם מוצגים כאן בירוק, חמש שעות לאחר ההדבקה. ניתן לראות את השמרים בתוך תאים דמויי מקרופאגים לאחר 24 שעות.הזיהום התפשט לאורך רקמת הזנב הגבית, שם ניתן לזהות שוב את השמרים בתוך תאי FTIC. לאחר צפייה בסרטון זה, תרכשו הבנה טובה לגבי אופן ההזרקה המיקרוסקופית של candida albicans לתוך חדרי המוח האחורי של דגי זברא בשלב Prim 25, כולל: אחד, הכנת תרבית הפטריות; שניים, הרדמת זחלי דגי זברא; ושלוש, הזרקה מיקרוסקופית לתוך חדרי המוח האחורי.ורבע, הכנת זחלים נגועים לדימות קונפוקאלי.

non-invasive-imaging-of-disseminated-candidiasis-in-zebrafish-larvae

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

עוברי דג הזברה שקוף הוכיחו המארחים מודל שימושי כדי לחזות אינטראקציות למידה תפקודית בין תאים חיסוניים מולדים פתוגנים חיידקיים תאיים,...

זיהום של עוברים דג הזברה עם פתוגנים חיידקיים תאיים

מקור: Zhang, X., et al. מודל עובר דג זברה להדמיה in vivo וניתוח תוך-חיוני של זיהום סטפילוקוקוס זהוב הקשור לביו-חומר. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים הדמיה פלואורסצנטית של עוברי דג זברה שהוזרקו עם Staphylococcus aureus, המאפשר כימות של התקדמות הזיהום והתפלגות החיידקים כדי להעריך את ההשפעה של מיקרוספירות ביו-חומר על אינטראקציות מארח-פתוגן in vivo.

 הדמיה פלואורסצנטית של זיהום חיידקי הקשור לביו-חומר בעוברי דג זברה

סרטון זה מדגים שיטה לכימות זיהום פטרייתי בזחלי דגי זברה. נבגי פטריות מוזרקים במיקרו לחדר המוח האחורי של הזחל, והזחלים מודגרים כדי לאפשר התפתחות זיהום. הזחלים הנגועים נקצרים בפרקי זמן מוגדרים, והתקדמות ההדבקה מוערכת על ידי ספירת יחידות יוצרות מושבות.

טכניקה לכימות זיהום פטרייתי בזחלי דגי זברה

הסרטון מדגים טכניקת פציעה ולכידה של דגי זברה לצפייה בזיהום פתוגן פטרייתי המסומן באופן פלואורסצנטי בזחלי דגי זברה. זיהום ראשוני מושך מקרופאגים, וככל שהזיהום נמשך, גיוס נויטרופילים מתקדם באתר ההזרקה.

טכניקת zWEDGI להמחשת זחלי זברה נגועים בפתוגן פטרייתי

in vivo אינטראקציות מרחביות-זמניות של פתוגן והגנות חיסוניות ברמת הרירית אינן ניתנות להדמיה בקלות במארחים קיימים של בעלי חוליות. השיטה המוצגת כאן מתארת פלטפורמה רב-תכליתית לחקר קנדידה רירית בבעלי חוליות חיים תוך שימוש בכיס השחייה של דג הזברה הצעיר כאתר זיהום.

דוגמנות רירית פטרת בזחל דג הזברה על ידי הזרקת Swimbladder

כאן, אנו מציגים פרוטוקול ליצירה והדמיה של זיהום חיידקי מקומי בשלפוחית האוטית של דג הזברה.

הדמיה לא פולשנית של התגובה החיסונית המולדת בדגם דג הזברה הזחל של<em&gt; Streptococcus iniae</em&gt; זיהום

כאן, אנו מתארים דגמים דג הזברה xenograft באמצעות שני אתרים הזרקה שונים, כלומר, חלל צינור perivitelline של קיביה, כדי לחקור את התנהגות פולשנית ולהעריך את הפוטנציאל intravasation ו extravasation של תאי סרטן שד אנושיים, בהתאמה.

התנהגות פולשנית של תאים סרטניים בשד אדם עוברי הזברה

ב פרוטוקול זה, שכותרתו fluorescently ט cruzi הוזרקו לזחלים דג זברה שקוף, טפיל תנועתיות נצפתה ויוו באמצעות מיקרוסקופ אור גיליון זריחה.

הקמתה של הזחל דג זברה כמודל חיה כדי Investigate Trypanosoma cruzi תנועתיות Vivo ב

מוצג כאן הוא שיטה יעילה ובטוחה כדי להדביק הזחלים דג זברה עם התווית fluorescently באופן אנאירובי C. הקושי על ידי הזרקת microinjection ו פולשני.

פיתוח מודל לזיהום של זחל בדג במשך שינוי קושי

כתב יד זה מתאר שיטה לסינון ספריות מוטנטיות בגודל בינוני של קנדידה אלביקנס עבור פנוטיפים של מורפוגנזה במהלך זיהום פעיל בפונדקאי של יונקים באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית לא פולשנית.

שימוש בהדמיית in vivo לבדיקת פנוטיפים של מורפוגנזה בזנים מוטנטיים של קנדידה אלביקנס במהלך זיהום פעיל בפונדקאי של יונקים

פרוטוקול זה משתמש בהדמיה של יריעות אור כדי לחקור את תפקוד התכווצות הלב בזחלי דגי זברה ולקבל תובנות על מכניקת הלב באמצעות מעקב אחר תאים וניתוח אינטראקטיבי.

הדמיית גיליון אור 4D של התכווצות הלב של דגי זברה

למד שיטת הדמיה לא פולשנית של זיהום פטרייתי בזחלי דג הזברה באמצעות מיקרו-הזרקת Candida albicans לחדר המוח האחורי. טכניקה זו מאפשרת מעקב אחר אינטראקציות מארח-פתוגן בזמן אמת וחקר מנגנוני חסינות מולדת ביצורים חיים.

הדמיה לא פולשנית של פטרת מופצת הזחלים דג הזברה

גלה סרטונים נוספים