דגם Murine הדמיה בלתי פולשנית לזיהוי ומעקב סרטן השחלות הישנות

המטרה הכוללת של הליך זה היא לבסס מודל קסנוגרפט לסרטן שחלות תוך-צפקי המחקה את הפרופיל הקליני שנצפה בחולים עם סרטן השחלות. זה מושג על ידי הזרקה תוך רחמית של תאי גזע של סרטן השחלות בעכברים עירומים. לאחר מכן, קביעת התקדמות הגידול והתגובה לטיפול נקבעים על ידי מדידת הקרינה כתחליף לעומס הגידול.

זה מאפשר ניטור בזמן אמת של התקדמות הגידול או התגובה לטיפול ללא צורך להקריב את העכברים. המודל שאנו מראים כאן. B מסכם את הפרופיל הקליני שנצפה בחולים בסרטן השחלות, ולכן הוא מאפשר לנו לא רק לחקור את הביולוגיה של המחלה, אלא גם לזהות טיפולים חדשים, במיוחד לסרטן שחלות חוזר.

המודל מאפשר לנו לעקוב אחר התקדמות הגידול כדי לקבוע בזמן אמת אם הם מגיבים לכימותרפיה, וגם לקבוע אם המחלה תחזור אם הכימותרפיה תופסק. כדי להתחיל בהליך זה, יש להרדים עכבר עירום בן שבעה עד שמונה שבועות עם תיאור עם 2% פלואור. לאחר מכן ודא שהוא מורדם לחלוטין על ידי צביטה של כרית כף הרגל שלו.

לאחר מכן, הניחו את החיה על צדה הימני עליה, כרית גזה סטרילית כשראשה רחוק מהנסיין. יש למרוח משחה על שתי העיניים כדי למנוע יובש בזמן ההרדמה לאחר מכן. הכנס במהירות את ראש החיה למערכת חרוט אף המחוברת למכשיר אידוי איזופלורן.

יש לחטא את הצד הימני של הבטן באמצעות רפידות אלכוהול, ואחריו יוד. לאחר מכן הניחו עליו את וילון הניתוח הסטרילי באמצעות מספריים ומלקחיים כירורגיים סטריליים. בצע חתך עור של סנטימטר עד שניים ברבע השמאלי התחתון של העכבר.

לאחר מכן, הרם את השריר ובצע חתך על מנת להגיע לצפק. לאחר מכן, נתחו את השריר האלכסוני כדי לחשוף את חלל הבטן. לאחר מכן אתר את קרן הרחם השמאלית באמצעות מהדק המוסטט סטרילי, הן בצד הקדמי והן בצד האחורי של הקרן.

הנח את המהדק הקדמי ממש מתחת לחצוצרה ואת המהדק האחורי ממש מעל צוואר הרחם. בשלב זה, יש את הנסיין השני. הזרקו את תרחיף התאים על ידי הנחת התאים המכילים מחט בזווית של 45 מעלות בניצב לקרן.

לאחר מכן הזרקו לאט 50 מיקרוליטר של תרחיף תאים ללומן קרן הרחם. לאחר מכן, שחרר את המהדק הקדמי ואחריו את המהדק האחורי. לאחר מכן, הנח את קרן הרחם בחזרה בחלל הבטן.

סגור את הצפק באמצעות תפר נספג סינטטי. לאחר מכן סגור את העור באמצעות דבק רקמות. בסיום, הסר את העכבר מחרוט האף והחזר אותו לכלוב שלו.

ודא שהחיה ערה ופעילה לפני שתשאיר אותה ללא השגחה. לספק איבופרופן במי השתייה במשך 48 השעות הראשונות לאחר הניתוח. כעת פתח את תוכנת ההדמיה המולקולרית, ולאחר מכן פתח את תוכנת לכידת מאדים.

מודול זה מספק בקרה מתואמת של הגדרות הלכידה של מאדים תוך מינוף יכולות הלכידה והניתוח של מערכות ההדמיה. לאחר מכן, הזן את ערכי הלכידה שנקבעו מראש. לאחר מכן שמור את הפרמטרים כקבצי הפעלה בודדים.

לאחר מכן צור פרוטוקול רצף סיבוב על ידי בחירה בלחצן צור עריכת פרוטוקולים מחלון הרכישה של ממשק המערכת, בחר את קובץ ההפעלה הפלואורסצנטי שנשמר בעבר ושמור כשלב ראשון. לאחר מכן, בחר את קובץ הפעלת הרנטגן המתאים ושמור כשלב שני. עם השלב הראשון שנבחר.

השתמש בסדרת הסיבוב Set מהתפריט הנפתח לפני לכידת תמונה כדי להגדיר את טווח זווית ההתחלה וההפרש הרצוי. כדי להבטיח הדמיה חלקה של תכונות, הערכים הספציפיים כוללים זווית התחלה של מינוס 180 מעלות, טווח של 375 מעלות ותוספת של 15 מעלות. שמור את הפרוטוקול ולחץ על כפתור הסיום כדי לאתחל את המאדים.

לאחר מכן התחל את היישור על ידי בחירה בתצוגה מקדימה כפתור בתפריט הרכישה כדי להעלות את לשונית המסובב, השתמש בהגדרת לכידת הקרינה כפי שצוין עבור הדמיית דובדבן M. השאר את הדלת פתוחה במהלך התצוגה המקדימה כדי להאיץ את המיקום, מה שמאפשר גם בדיקה ויזואלית של מיקום העכבר במהלך הליך היישור. לאחר מכן, בחר באפשרות טען עכבר והמשך בסדרת תפריטי המיקום.

ודא שהקצה הצינור של חרוט האף המתקפל נמצא בשקע חרוט האף. לאחר מכן הנח את העכבר המורדם בכיוון הנוטה כשראשו בקונוס האף. התחל את הכיול במצב אפס מעלות כשהצד הגחוני של החיה פונה כלפי מטה.

השתמשו בשני הכפתורים במערכת הסיבוב כדי למקם את החיה כך שהיא תופיע במרכז בחלון התצוגה המקדימה. חזור על התהליך כפי שהתבקש עבור מיקומים של מינוס 180, מינוס 90 פלוס 90 ופלוס 180 מעלות ולחץ על סיום. הנה דוגמה לסרט שנוצר מהתמונות שנרכשו.

איור זה מציג את המתאם בין עומס הגידול התוך-צפקי לבין תמונת שכבת הרנטגן הקרינה. כ-32 יום לאחר ההזרקה של תאי סרטן השחלות הדובדבן F 2M בוצעה הדמיה דו-ממדית והעכברים הוקרבו כדי לתאם את התמונה הנרכשת עם עומס הגידול בפועל. ומוצגים כאן מערכי נתוני הסיבוב המאפשרים הדמיה מרובת זוויות וזיהוי גידולים בבקרה, טיפול בפקליטקסל והעכברים החוזרים.

התמונה של עכבר בודד לכל לוח מוצגת כשהוא מסובב באמצעות מערכת Mars. שימו לב שאפילו בעכברי ביקורת עם עומס גידול משמעותי, ניתן להמעיט בגודל הגידול בהתאם לזווית ממנה צולמה התמונה. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להיות מסוגל להקים מודל קסנוגרפט של סרטן שחלות תוך צפקי באמצעות המסלול התוך רחמי, כמו גם להיות מסוגל לבצע הדמיה חיה של בעלי חיים באמצעות מערכת סיבוב רב-מודאלית.