Name: דגם Murine של עורק הירך חוט פגיעה בהשרשה של perivascular החדרת תרופות תיקון (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-02-10T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 5 s
Description: חקור מודל ניתוחי של פגיעה בעורק הירך בעכברים לחקר היפרפלזיה ניאואינטימלית. שיטה זו מאפשרת בדיקת תרופות פריווסקולריות להעכבת רסטנוזה ולשיפור הבנת מנגנוני תיקון כלי הדם.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מבקשים להודות לתמיכה באמצעות איגוד הלב האמריקאי (10SDG2630139), קרן וולש ובאמצעות מענק החדשנות החדש של מנהל ה-NIH (1DP2 OD008716-01). המחברים רוצים להודות לשירותים הניתנים על ידי מתקן הליבה של ICMB (המכון לביולוגיה תאית ומולקולרית) ו-TherapeUTex באוניברסיטת טקסס באוסטין.

הערה: כל השיטות שמוצגים בפרוטוקול זה אושרו על ידי ועדת הטיפול ושימוש בבעלי חיים המוסדיים. 1. הכנת שולחן ניתוחים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הגדר את כרית החימום עם הסירקולציה מחודשת מים חמים על שולחן הניתוחים, תחת מיקרוסקופ לנתיחה. מניחים את צלחת בסיס נירוסטה על כרית החימום. הנח כרית סופגת סטרילית על צלחת הבסיס וכרית חימום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לארגן כלים כירורגיים סטרילי על משטח סופג סטרילית סמוכה. לאסוף שני זוגות מלקחיים דקים שקצהו בזווית, שני זוגות מלקחיים זווית, שלושה מלקחיים עוצר דמום, שני חוטי מפשקים, מספריים כירורגיות קטנים, מיקרו מספריים, חוט אנגיופלסטיקה אחד (בקוטר 0.15 אינץ &#39;) ושלושה מגזרי 6 אינץ&#39; של תפר 6.0 משי . </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תכופף את הקצה העגול של חוט אנגיופלסטיקה כדי להתאים את העקמומיות של עורק הירך. זה יעשה את זה קל יותר לקדם את החוט במהלך הניתוח. </li></ol> 2. הכנתעכבר לכירורגיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדימי עכבר על ידי שאיפה מתמדת של isoflurane 2.5%. הקפד לעקוב אחר מצבו של בעל החיים לאורך כל ההליך. לבצע בדיקת קמצוץ של כף הרגל של העכבר כדי לוודא שהוא הוא בהרדמה מלאה. ודא בעלי החיים אינו זז בעת מבחן קמצוץ מנוהל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל משחה סיכה לעיניו של בעל החיים כדי למנוע התייבשות. אבטח את החיה במצב שכיבה לכרית סופגת באמצעות קלטת כירורגית. המשך מתן isoflurane 2.5% באמצעות חרטומו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש בקרם מקריח, להסיר פרווה מהרגל ובבטן לקו אמצע. יש לשטוף את העור ביסודיות עם מים. אפילציה יכולה להתבצע יום אחד מראש של ניתוח. שים לב שטיפול מוגזם עם הקרם עלול להוביל לגירוי בעור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מייד לפני הניתוח, חל povidone- יוד לאזור המקולף עם המוליך כותנה שקצה לעקר את העור. יש לשטוף את העור המקולף עם אתנול 70% ויבשיםעם המוליך כותנה שקצה סטרילי. חזור 3 פעמים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שלו מנה טרום ניתוחית של 5 מ&quot;ג / קילוגרם של carprofen באמצעות הזרקה תת עורית. </li></ol> 3. בידוד של עורק הירך <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מספריים כירורגיות קטנים, לעשות חתך מעוגל בעור מעל עורק הירך. בבוטות לנתח ולאבטח את רקמות סובבות באמצעות תופסנים מפשק מגנטי מפשקים כדי לאתר את עורק הירך. להרטיב את הרקמות מעת לעת באמצעות מי מלח להשקיה החל מלוח באמצעות המוליך כותנה שקצה סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבודד את עורק הירך באמצעות מלקחיים. בעדינות להפריד את העצב מחבילת כלי הדם באמצעות מלקחיים קנס שקצו. למנוע ניקוב הווריד, ולא לגרום נזק לעצב. לדחוף את העצב מהחבילה, כדי למנוע גירוי זה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעדינות להפריד את וריד הירך מעורק הירך, איתור הסתעפות הירך. האזור של הסתעפות קשה במיוחד לנתח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Posterior להסתעפות, לולאת תפר 6.0 משי תחת עורק הירך ומאובטח עם hemostat. תפר הפרוקסימלי זה ישמש ללהגביל את זרימת דם בעורק. הערה: קיימת שונות קלות בקשרים בעת ביצוע שיטת קשירה לעומת שיטת הצריבה (ראה איור 1 ואיור 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דיסטלי להסתעפות, לולאת 6.0 תפר משי תחת עורק הירך ומאובטח עם hemostat. עזרים זה דיסטלי תפר במיצוב של העורק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שני תפרי הלולאה תחת הענף השרירי של עורק הירך, מראש לקשור אותם ובטוחים עם hemostat. זכור כדי ללחלח את הרקמות עם מי מלח. אם ביצוע שיטת כויה של פגיעת חוט, רק אחד תפר כרך הוא הכרחי על הענף שרירי. </li></ol> 4. ביצועים של עורק הירך חוט פגיעה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להגביל את זרימת דם לעורק הירך על ידי משיכת התפר הפרוקסימלי. מעט למשוך את hemost דיסטליובhemostat הבטחת הסניף לחשוף את האתר לarteriotomy. ולקשור את סניף השרירים על ידי קשירת התפר סביבו. הערה: הרמת העורק כלפי מעלה יהיה יעילה יותר להגביל את זרימת דם מאשר מושך אופקי לבד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתק את הסניף הקטן עם כויה בין שני התפרים. באמצעות מיקרו מספריים, לבצע arteriotomy בענף הצד השני של הסתעפות. שימוש במלקחיים מאוזנת בגליל של סרט כירורגית כדי לייצב את מיקרו המספריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאשר את קיומו של arteriotomy באמצעות מלקחיים קנס שקצו. רם בעדינות את פתיחת arteriotomy עם המלקחיים. להציג את הסוף המעוגל של החוט לתוך arteriotomy באמצעות מלקחיים. כדי להקל על קידום התיל, להוסיף טיפה אחת או שתיים של לידוקאין לאזור באמצעות מזרק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר החוט מגיע התפר הפרוקסימלי, לשחרר את התפר ולהתאים אותו כך שהוא לא יכול לעכב את קידומו של החוט. הכנס את החוט עד שהוא לא יכול להתקדם עוד יותר. קצה החוט דואר צריך להפסיק באזור הרצועה מפשעתי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאפשר לחוט להישאר בעורק הירך לרגע אחד. אחרי דקה אחת, לחזור בו ולקדם את החוט בתנועת ניסור עשר פעמים לפגוע ולערטל האנדותל של עורק הירך. לפציעתם של חומרה פחותה, להקטין את מספר הפעמים שהחוט נמשך ויוצא מהעורק או להשאיר את החוט בעורק דקות 1 בלבד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחזור בו מהחוט לאט. כאשר בסופו של סיבוב החוט עבר את התפר הפרוקסימלי, להגביל את הזרימה לעורק על ידי משיכת התפר הפרוקסימלי. לחזור בו מהתיל לחלוטין. </li></ol> 5. ligating סניף השרירים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הדק את התפר שנותר על הענף שרירי. זה ימנע דימום מarteriotomy. חזור זרימה לסניף שרירי, ולאשר דם שלא דולף ממנו. חתוך את הקצוות מהתפרים בסניף שרירי. </li></ol> 6. אלטרנטיבי שיטה: המותאם למקום Cauterization של Arteriotomy הערה: ניתן לנקוט גישה חלופית כדי למנוע קשירה של סניף השרירים ולאפשר גישה של כלי דם דרך עורק הירך העיקרי הגדול יותר. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל מ 4.1, להגביל את הזרימה לעורק הירך על ידי משיכת התפר הפרוקסימלי. משוך את תפר דיסטלי ותפר הבטחת סניף השרירים מעט כדי לחשוף את האתר לarteriotomy (איור 1 ואיור 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות מיקרו מספריים, לבצע arteriotomy בנקודת עורק הירך ושרירי הסניף הסניף. אם מבצע החתך בדופן העורק, זה יכול להיות קל יותר לצרוב. שימוש במלקחיים מאוזנת בגליל של סרט כירורגית כדי לייצב את מיקרו המספריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לבדוק את ההצלחה של צריבה, לשחזר את הזרימה לעורק הירך על ידי שחרור התפר הפרוקסימלי. אם דימום מתרחש מarteriotomy, לחזור על כויה. אם כויה היא מוצלחת, זרימת דם תהיה מחדשמאוחסן דיסטלי arteriotomy. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להציג את החוט ולבצע פגיעת החוט כאמור בסעיף 4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המשך שמגביל את זרימת דם לעורק הירך. מחממים כויה דקה שקצהו לפחות 6 סנטימטרים מהעכבר. כעצת כויה מתקררת, להחיל אותו באורח קל בצד של arteriotomy כדי לסגור את החתך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לבדוק את ההצלחה של צריבה, לשחזר את הזרימה לעורק הירך על ידי שחרור התפר הפרוקסימלי. אם דימום מתרחש מarteriotomy, לחזור על כויה. אם כויה היא מוצלחת, זרימת דם תשוחזר דיסטלי arteriotomy. הסר את הפרוקסימלי הזמנית וקשרי דיסטלי. </li></ol> 7. השרשה של perivascular החדרת תרופות תיקון <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צור תיקון תרופת perivascular ניתן ליצור כפי שתואר במחקרים קודמים 11 או בשיטות דומות. להקהות את הפינות של אזור המחסום של תיקון משלוח סמים באמצעות מספריים סטרילי </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את טפיחת משלוח הסמיםch על עורק הירך הפצוע עם הצד משחרר תרופה מול העורק. במידת צורך, להשתמש במלקחיים כדי לשפר את מעמדו של התיקון. </li></ol> 8. פצע סגר ושחזור <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסגור את הפצע עם תפר שהופסק פשוט המורכב של קשרים מרובעים. תפר רציף מאריך סגירת פצעים במקרה של בעלי החיים מנסים להסיר את התפר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כבה את ההרדמה ולהסיר את החיה מלהגדיר. לאפשר לבעלי החיים להתאושש על כרית החימום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תמשיך לעקוב אחר ההתאוששות של העכבר. בדוק את אתר חתך בכל יום כדי לוודא שהוא נותר סגור. לטיפול בכאב לאחר ניתוח, לנהל הזרקה תת עורית של 5 מ&quot;ג / קילוגרם של carprofen כל 12 שעות לאחר ניתוח ולאחר מכן כל 12 שעות למשך 2 ימים. אם כאב ממשיך מעבר 2 ימים הראשונים, להתייעץ עם וטרינר לכיוונים במשככי כאבים נוספים. </li></ol> 9. עורקי קציר עצם הירך להיסטולוגיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בגיל 28 ימים שלאחר ניתוח, לבצע המתת חסד פחמן דו חמצני בעכבר. הערה: קצב הזרימה המתאים של פחמן דו חמצני צריך לעקור 10-30% של החדר לדקה וישתנה בהתאם לגודלו של התא בשימוש. חיתוך של הסרעפת ולנקב לב צריכה להתבצע כשיטת משנית של המתת חסד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאבטח את העכבר במצב שכיבה באמצעות קלטת כירורגית. עושה חתך לאורך עורק הירך, שבו החתך הניתוחי הראשוני נעשה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשניהם את העורק נפצע ועורק וללא כל הפגע מהרגל הנגדית, בבוטות לנתח ולהבטיח שמסביב רקמות באמצעות כלי כתיבה ותופסנים מפשק מגנטיים כדי לאתר את עורק הירך. להרטיב את הרקמות מעת לעת באמצעות מי מלח להשקיה. החל מלוח באמצעות המוליך כותנה שקצה סטרילי. הקפד שלא לפגוע בעורק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר עורק הירך כבר מבודד מהאתר של arteriotomy המקורי לאב העורקים בבטן, לקשור SEGment של תפר משי בסמוך לאתר המקורי של arteriotomy. תפר זה יעזור לזהות את הקצה הדיסטלי ביותר של עורק הירך ולהקל טיפול במדגם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת המספריים מיקרו לנתיחה שיחתוך את עורק הירך. לעשות חתך אחד דיסטלי לתפר. הפוך את החתך האחר בקצה השני של עורק הירך, ליד אב העורקים בבטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר את העורק נכרת לצלחת פטרי זכוכית המכילה תמיסת מלח. לנתח את העורק נוסף כדי להסיר את רקמת חיבור עודפת או שומן. להסיר בעדינות את דם מלומן על ידי שטיפה עם מי מלח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר את העורק לבקבוקון של 10% שנאגרו פורמלין. אחסן את הבקבוקון על 4 מעלות צלזיוס עם הנדנדה עדינה במשך 48 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העבר את העורק הקבוע עד 70% אתנול, לאחסן עד שהוא מעובד להיסטולוגיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להטביע את העורק בלוקים וסעיף בלוקים עבור מכתים פרפין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע צביעת histochemical וimmunochemical להעריך את מידת הפגיעה HYP וintimalerplasia. הערה: לקבלת תוצאות הנציג, השתמשנו Hematoxylin ו Eosin לדמיין את הגרעינים ומורפולוגיה כללית או כתם Pentachrome של Movat לדמיין lamellae אלסטי ורכיבי עורקים אחרים. </li></ol>

<ol><li>Hoffmann, R., Mintz, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+in-stent+restenosis+-+predictors%2C+treatment+and+prevention%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J%22%5BJournal%5D)">Coronary in-stent restenosis - predictors, treatment and prevention.</a> Eur Heart J. 21 (21), 1739-1749 (2000).</li>
<li>Erbel, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary-artery+stenting+compared+with+balloon+angioplasty+for+restenosis+after+initial+balloon+angioplasty.+Restenosis+Stent+Study+Group%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Coronary-artery stenting compared with balloon angioplasty for restenosis after initial balloon angioplasty. Restenosis Stent Study Group.</a> N Engl J Med. 339 (23), 1672-1678 (1998).</li>
<li>Farooq, V., Gogas, B. D., Serruys, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restenosis%3A+delineating+the+numerous+causes+of+drug-eluting+stent+restenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Cardiovasc+Interv%22%5BJournal%5D)">Restenosis: delineating the numerous causes of drug-eluting stent restenosis.</a> Circ Cardiovasc Interv. 4 (2), 195-205 (2011).</li>
<li>Iqbal, J., Gunn, J., Serruys, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+stents%3A+historical+development%2C+current+status+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Br+Med+Bull%22%5BJournal%5D)">Coronary stents: historical development, current status and future directions.</a> Br Med Bull. 106, 193-211 (2013).</li>
<li>Garg, S., Serruys, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+stents%3A+current+status%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Coronary stents: current status.</a> J Am Coll Cardiol. 56 (10 Suppl), S1-S42 (2010).</li>
<li>Park, S. J., Kim, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+status+of+percutaneous+coronary+intervention+with+drug-eluting+stents+in+Asia%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Current status of percutaneous coronary intervention with drug-eluting stents in Asia.</a> Circulation. 118 (25), 2730-2737 (2008).</li>
<li>Alfonso, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+drug-eluting+stent+restenosis+the+new+pilgrimage%3A+quo+vadis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Treatment of drug-eluting stent restenosis the new pilgrimage: quo vadis.</a> J Am Coll Cardiol. 55 (24), 2717-2720 (2010).</li>
<li>Dake, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paclitaxel-eluting+stents+show+superiority+to+balloon+angioplasty+and+bare+metal+stents+in+femoropopliteal+disease%3A+twelve-month+Zilver+PTX+randomized+study+results%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Cardiovasc+Interv%22%5BJournal%5D)">Paclitaxel-eluting stents show superiority to balloon angioplasty and bare metal stents in femoropopliteal disease: twelve-month Zilver PTX randomized study results.</a> Circ Cardiovasc Interv. 4 (5), 495-504 (2011).</li>
<li>Bosiers, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Results+of+the+Protege+EverFlex+200-mm-long+nitinol+stent+%28ev3%29+in+TASC+C+and+D+femoropopliteal+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Results of the Protege EverFlex 200-mm-long nitinol stent (ev3) in TASC C and D femoropopliteal lesions.</a> J Vasc Surg. 54 (4), 1042-1050 (2011).</li>
<li>Duda, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug-eluting+and+bare+nitinol+stents+for+the+treatment+of+atherosclerotic+lesions+in+the+superficial+femoral+artery%3A+long-term+results+from+the+SIROCCO+trial%5BTitle%5D)+AND+%22J+Endovasc+Ther%22%5BJournal%5D)">Drug-eluting and bare nitinol stents for the treatment of atherosclerotic lesions in the superficial femoral artery: long-term results from the SIROCCO trial.</a> J Endovasc Ther. 13 (6), 701-710 (2006).</li>
<li>Kumar, A., Lindner, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remodeling+with+neointima+formation+in+the+mouse+carotid+artery+after+cessation+of+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Remodeling with neointima formation in the mouse carotid artery after cessation of blood flow.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 17 (10), 2238-2244 (1997).</li>
<li>Sata, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+vascular+injury+that+induces+rapid+onset+of+medial+cell+apoptosis+followed+by+reproducible+neointimal+hyperplasia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">A mouse model of vascular injury that induces rapid onset of medial cell apoptosis followed by reproducible neointimal hyperplasia.</a> J Mol Cell Cardiol. 32 (11), 2097-2104 (2000).</li>
<li>Roque, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+femoral+artery+denudation+injury+associated+with+the+rapid+accumulation+of+adhesion+molecules+on+the+luminal+surface+and+recruitment+of+neutrophils%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Mouse model of femoral artery denudation injury associated with the rapid accumulation of adhesion molecules on the luminal surface and recruitment of neutrophils.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 20 (2), 335-342 (2000).</li>
<li>Lindner, V., Fingerle, J., Reidy, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+arterial+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse model of arterial injury.</a> Circ Res. 73 (5), 792-796 (1993).</li>
<li>Edelman, E. R., Adams, D. H., Karnovsky, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+controlled+adventitial+heparin+delivery+on+smooth+muscle+cell+proliferation+following+endothelial+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Effect of controlled adventitial heparin delivery on smooth muscle cell proliferation following endothelial injury.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 87 (10), 3773-3777 (1990).</li>
<li>Stemerman, M. B., Ross, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+arteriosclerosis.+I.+Fibrous+plaque+formation+in+primates%2C+an+electron+microscope+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Experimental arteriosclerosis. I. Fibrous plaque formation in primates, an electron microscope study.</a> J Exp Med. 136 (4), 769-789 (1972).</li>
<li>Brouchet, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estradiol+accelerates+reendothelialization+in+mouse+carotid+artery+through+estrogen+receptor-alpha+but+not+estrogen+receptor-beta%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Estradiol accelerates reendothelialization in mouse carotid artery through estrogen receptor-alpha but not estrogen receptor-beta.</a> Circulation. 103 (3), 423-428 (2001).</li>
<li>Filipe, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estradiol+accelerates+endothelial+healing+through+the+retrograde+commitment+of+uninjured+endothelium%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Estradiol accelerates endothelial healing through the retrograde commitment of uninjured endothelium.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 294 (6), H2822-H2830 (2008).</li>
<li>Feuls, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microvascular+denudation+of+the+femoral+artery+of+the+mouse+as+a+model+for+restenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Rofo%22%5BJournal%5D)">Microvascular denudation of the femoral artery of the mouse as a model for restenosis.</a> Rofo. 175 (7), 952-957 (2003).</li>
<li>Holt, A. W., Tulis, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+Rat+and+Mouse+Carotid+Artery+Surgery%3A+Injury+%26+Remodeling+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22ISRN+Minim+Invasive+Surg%22%5BJournal%5D)">Experimental Rat and Mouse Carotid Artery Surgery: Injury & Remodeling Studies.</a> ISRN Minim Invasive Surg. 2013, (2013).</li>
<li>Iafrati, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrogen+inhibits+the+vascular+injury+response+in+estrogen+receptor+alpha-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Estrogen inhibits the vascular injury response in estrogen receptor alpha-deficient mice.</a> Nat Med. 3 (5), 545-548 (1997).</li>
<li>Sullivan, T. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrogen+inhibits+the+response-to-injury+in+a+mouse+carotid+artery+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Estrogen inhibits the response-to-injury in a mouse carotid artery model.</a> J Clin Invest. 96 (5), 2482-2488 (1995).</li>
<li>Yin, Y., Zhao, X., Fang, Y., Huang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carotid+artery+wire+injury+mouse+model+with+a+nonmicrosurgical+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Vascular%22%5BJournal%5D)">Carotid artery wire injury mouse model with a nonmicrosurgical procedure.</a> Vascular. 18 (4), 221-226 (2010).</li>
<li>Nam, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Partial+carotid+ligation+is+a+model+of+acutely+induced+disturbed+flow%2C+leading+to+rapid+endothelial+dysfunction+and+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297 (4), H1535-H1543 (2009).</li>
<li>Nam, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+of+disturbed+flow-induced+atherosclerosis+in+mouse+carotid+artery+by+partial+ligation+and+a+simple+method+of+RNA+isolation+from+carotid+endothelium%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A model of disturbed flow-induced atherosclerosis in mouse carotid artery by partial ligation and a simple method of RNA isolation from carotid endothelium.</a> J Vis Exp. (40), (2010).</li>
<li>Kuhlmann, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implantation+of+a+carotid+cuff+for+triggering+shear-stress+induced+atherosclerosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Implantation of a carotid cuff for triggering shear-stress induced atherosclerosis in mice.</a> J Vis Exp. (59), (2012).</li>
<li>Carmeliet, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+wound+healing+and+neointima+formation+induced+by+perivascular+electric+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Vascular wound healing and neointima formation induced by perivascular electric injury in mice.</a> Am J Pathol. 150 (2), 761-776 (1997).</li>
</ol>

הצגנו שיטה לביצוע פגיעה בכלי הדם בעכברים והעברת תרכובות טיפוליות לאזור הפגוע דרך שרוול פרי-וסקולרי. שיטת הקשירה לעורקי הירך והצוואר תוארה במאמרים בשיטות קונבנציונליות ואופיינה בהרחבה11-14,19-23 ואנו מציגים שיטה חלופית להשגת אותה פגיעה בכלי הדם שהיא הליך פחות תובעני מבחינה טכנית שניתן להשתמש בו לעתים קרובות בעכברים צעירים יותר. אחד היתרונות העיקריים של השימוש במודל פגיעה בחוט עכבר עם מדבקה פריוסקולרית הוא שהוא מאפשר שימוש בעכברים מהונדסים גנטית או מודלים של עכברים של מחלות. המניפולציה האנדווסקולרית של עורקים קט...

פגיעה עורקית ודלקת הנגרמת על ידי אנגיופלסטיקה והשתלת סטנט עלולה לגרום להיפרפלזיה ניאו-אינטימית התורמת לעיבוי דופן העורק, תהליך המכונה רסטנוזיס. 1,2 היווצרות רסטנוזיס היא מצב כישלון עיקרי עבור התערבויות כגון אנגיופלסטיקה וסטנט עם סטנטים ממתכת חשופה. 3 בשל החששות האחרונים מעיכוב ריפוי כלי הדם בעורקים המטופלים בסטנטים מסירת תרופות, יש גם צורך למצוא תרכובות שיכולות לעכב רסטנוזיס תוך שמירה על ריפוי כלי הדם ואנדותליזציה מחדש. 4-7 בנוסף, בעוד שסטנטים זכו להצלחה בכלי הדם הכליליים, התערבויות מלעוריות מכל הסוגים בעורקים ההיקפיים ממשיכות להיכשל בשיעור גבוה יותר עקב רסטנוזיס. 8-10 מודלים של עכברים של התערבויות כירורגיות מאפשרים שימוש במניפולציות גנטיות חזקות שיכולות לספק תובנה מכניסטית לגבי המנגנונים העומדים בבסיס כישלון הטיפולים הקליניים ויכולות לספק מיטת בדיקה ראשונית לתרכובות לעיכוב היפרפלזיה אינטימית. 
כאן, אנו מתארים מודל עכברי של פגיעה בכלי הדם המאפשר בדיקה של תרכובות טיפוליות כדי לעכב היפרפלזיה ניאו-אינטימית ולהעריך אם השפעותיהן על אנדותליזציה מחדש לאחר דנודציה אנדותלית. אתגר מרכזי בביצוע פגיעה בכלי הדם בעכברים הוא המיומנות הטכנית הדרושה להשגת גישה לכלי הדם ולהחזרת הזרימה לעורק הפגוע לאחר פגיעת החוט. מסיבה זו, נעשה שימוש במודלים פשוטים של קשירת עורקים לחקר היפרפלזיה ניאו-אינטימית בעכברים שאינם דורשים מניפולציות אנדווסקולריות אך קלים יותר ליישום. 11 עם זאת, סוג זה של מודל כירורגי שונה באופן מהותי מההיבטים המכניים והביולוגיים של התערבות מלעורית, וחסר היבטים מרכזיים כולל מתיחת דופן העורק, דנודציה אנדותל וזרימת דם לומינלית לאחר פציעה. 
אנו מציגים שתי שיטות להשגה וסגירה של גישה לכלי הדם לפגיעה בחוט בעורק הירך בעכברים. הטכניקה הראשונה היא השיטה הקונבנציונלית שתוארה על ידי מספר קבוצות בעבר ומשתמשת בגישה לכלי הדם דרך ענף צדדי של עורק הירך. 12-14 שיטה זו דורשת עכברים מבוגרים וגדולים יותר ומיומנות כירורגית רבה יותר כדי ליישם את הגישה האנדולומינלית דרך העורק הקטן יותר. זה גם דורש קשירה של הענף השרירי של עורק הירך לאחר ההליך. השיטה השנייה שתיארנו משתמשת בכריתת עורקים בנקודת ההסתעפות של הענף הראשי והצדדי ובכך מאפשרת גישה גדולה יותר לעורק לביצוע פגיעה בחוט. בשיטה זו סוגרים את כריתת העורקים באמצעות צריבה מקומית מבוקרת המותירה את שני הענפים עם זרימת דם לאחר ההליך. השיטה הקונבנציונלית ישימה על עכברים בני 20 שבועות לפחות ואילו השיטה החלופית יכולה לשמש בעכברים בני 15 שבועות לפחות. בשתי השיטות, החוט יוצר מתיחה ושחיקה של העורקים המובילים לפציעה ולדנודציה של האנדותל. לאחר כל אחד מההליכים ניתן להשתיל מדבקת מתן תרופה פריוסקולרית המאפשרת העברת תרכובות כדי לשנות את התגובה לפציעה. השימוש במדבקת מתן התרופה מאפשר לעכברים לשמש כמצע בדיקה לתרכובות חדשות לעיכוב רסטנוזיס באמצעות טיפולים פרי-וסקולריים. 15,16

<table><tbody><tr><td>חוט קפיץ ישר, קוטר 0.15 אינץ'</td><td>קוק</td><td>G02426</td><td></td></tr><tr><td>צריבה בטמפרטורה גבוהה</td><td>Bovie Medical Corp.</td><td>HIT1</td><td></td></tr><tr><td>קצה עדין בטמפרטורה גבוהה לצריבה</td><td>Bovie Medical Corp.</td><td>H101</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו-מספריים</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>15000-13</td><td>לביצוע כריתת עורקים</td></tr><tr><td>מלקחיים עדינים בזווית</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>11251-35</td><td>לדיסקציה קהה של צרור כלי הדם</td></tr><tr><td>מלקחיים זוויתיים</td><td>Roboz</td><td>RS-5069</td><td>לניקוי רקמות</td></tr><tr><td>מספריים כירורגיים</td><td>Roboz</td><td>RS-5840</td><td>לחיתוך עור</td></tr><tr><td>מפסק</td><td>Fine Science Tools</td><td>18200-10</td><td></td></tr><tr><td>חוט מפסק</td><td>Fine Science Tools</td><td>18200-05</td><td>מחובר למחזיר</td></tr><tr><td>לוחית בסיס</td><td>Fine Science Tools</td><td>18200-03</td><td>לשימוש עם מפסק</td></tr><tr><td>מקבע מפסק מגנטי</td><td>Fine Science Tools</td><td>18200-01</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט</td><td>Roboz</td><td>RS-7822</td><td></td></tr><tr><td>המוסטטי מלקחיים</td><td>מכשירי מחקר ביו-רפואיים, בע"מ</td><td>34-1000</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ ניתוח</td><td>מייג'י טכנו</td><td>EMZ-5TR</td><td></td></tr><tr><td>מקור אור מיקרוסקופ</td><td>Meiji Techno</td><td>FT191</td><td></td></tr><tr><td>מחזור מים חמים</td><td>Gaymar</td><td>TP-500</td><td>לשמירה על טמפרטורת גוף העכבר</td></tr><tr><td>כרית חימום לשימוש חוזר</td><td>Gaymar</td><td>TP-R 22G</td><td>לשמירה על טמפרטורת גוף העכבר</td></tr><tr><td>לידוקאין</td><td>שונים</td><td></td><td></td></tr><tr><td>4.0 תפר ויקריל עם מחט חצי עיגול</td><td>Ethicon</td><td>J494G</td><td>לסגירת פצעים לאחר ניתוח</td></tr><tr><td>אפליקטורים סטריליים עם קצה כותנה</td><td>פוריטן</td><td>25-806-2WC</td><td>למריחת קרם אפילציה ונוזלי ספיגה</td></tr><tr><td>קרם אפילציה</td><td>Nair</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>שונים</td><td></td><td></td></tr><tr><td>בטדין</td><td>שונים</td><td></td><td></td></tr><tr><td>70% אתנול</td><td>שונים</td><td></td><td></td></tr><tr><td>6.0 תפר משי קלוע</td><td>טלפלקס רפואי</td><td>4-S</td><td>לבידוד עורק הירך במהלך ניתוח</td></tr><tr><td>0.9% נתרן כלורי</td><td>שונים</td><td></td><td>להשקיית רקמות</td></tr><tr><td>חומר סיכה לעיניים ג'ל</td><td></td> זכוכית שונים <td></td><td></td></tr><tr><td>צלחת פטרי</td><td>פיירקס</td><td>3160-60</td><td>לעורק הירך קציר</td></tr><tr><td>10% פורמלין חוצץ</td><td>שונים</td><td></td><td>לקיבוע עורק הירך</td></tr><tr><td>70% אתנול</td><td>שונים</td><td></td><td>לקיבוע עורק</td></tr> הירך <tr><td>הנוזל של בואין</td><td>מדעי</td><td></td> מיקרוסקופיה <td>אלקטרונית לצביעה של פנטכרום של מובט</td></tr><tr><td>כחול אלצ'יאני, 1%</td> <td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>26385-01</td><td>לצביעה של פנטכרום של מובט</td></tr><tr><td>אלכוהול אלקליין</td><td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>26385-02</td><td>לפנטכרום של מובט לצביעה</td></tr><tr><td>אורסיין, 0.2%</td> <td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>26385-03</td><td>לפנטכרום של מובט מכתים</td></tr><tr><td>המטוקסילין אלכוהולי, 5%</td> <td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>26385-04</td><td>לפנטכרום של מובט מכתים</td></tr><tr><td>כלוריד ברזל, 10%</td> <td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>26385-05</td><td>עבור הפנטכרום של מובט מכתים</td></tr> את <tr><td>מדעי מיקרוסקופיית האלקטרונים</td><td>יוד של לוגול</td><td>26385-06</td><td>עבור הפנטכרום של מובט מכתים</td></tr><tr><td>את תמיסת העבודה של חומצה ארגמנית-חומצה ארגמנית</td> מדעי <td>מיקרוסקופיה</td> אלקטרונית <td>26385-07</td><td>עבור הפנטכרום של מובט מכתים</td></tr><tr><td>חומצה אצטית, 0.5%</td> <td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונים</td><td>שונים</td><td>עבור מובטשל פנטכרום מכתים</td></tr><tr><td>חומצה פוספוטונגסטית, 5%</td> <td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>26385-09</td><td>לצביעת פנטכרום של מובט</td></tr><tr><td>זעפרן אלכוהולי, 6%</td> <td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>26385-10</td><td>לצביעה של פנטכרום של מובט</td></tr></tbody></table>

דגם murine של עורק הירך חוט פגיעה בהשרשה של perivascular החדרת תרופות תיקון

Murine Model of Femoral Artery Wire Injury with Implantation of a Perivascular Drug Delivery Patch

התערבויות מלעוריות כולל אנגיופלסטיקה בבלון וסטנט שימשו להחזרת זרימת הדם בכלי דם עם מחלת כלי דם חסימתית. בעוד שטיפולים אלה מובילים לשיקום מהיר של זרימת הדם, טכנולוגיות אלה נותרות מוגבלות על ידי רסטנוזיס במקרה של סטנטים ממתכת חשופה ואנגיופלסטיקה, או ריפוי מופחת ואולי סיכון מוגבר לפקקת במקרה של סטנטים מסירת תרופות. מנגנון פתופיזיולוגי מרכזי ביצירת רסטנוזיס הוא היפרפלזיה אינטימית הנגרמת על ידי הפעלת תאי שריר חלק בכלי הדם ודלקת עקב מתיחה ופציעה של העורקים. ניתוחים הגורמים לפגיעה בעורקים בעכברים מהונדסים גנטית שימושיים למחקר מכניסטי של תגובת כלי הדם לפציעה, אך לעתים קרובות הם מאתגרים מבחינה טכנית לביצוע במודלים של עכברים בשל גודלם הקטן והיעדר מכשירים בגודל מתאים. אנו מתארים שתי גישות לטכניקה כירורגית הגורמת לדהודלציה אנדותל ומתיחה עורקית בעורק הירך של עכברים כדי לייצר היפרפלזיה ניאו-אינטימית חזקה. הגישה הראשונה יוצרת כריתת עורקים בענף השרירי של עורק הירך כדי להשיג גישה לכלי הדם. לאחר פגיעה בחוט נקשר ענף עורקי זה לסגירת כריתת העורקים. גישה שנייה יוצרת כריתת עורקים בעורק הירך הראשי שנסגר מאוחר יותר באמצעות צריבה מקומית. שיטה זו מאפשרת גישה לכלי הדם דרך כלי גדול יותר וכתוצאה מכך מספקת הליך פחות תובעני מבחינה טכנית שניתן להשתמש בו בעכברים קטנים יותר. בעקבות כל אחת מהשיטות של פגיעה בעורקים, ניתן להניח מדבקת מתן תרופות מתכלה מעל או מסביב לעורק הפגוע כדי לספק חומרים טיפוליים.

בעקבות פציעת חוט, היפרפלזיה neointimal מתפתחת לאורך זמן ונבחנה בדרך כלל לאחר 14 עד 28 ימים. הטכניקות מתוארות בעבודה זו תוביל לדור חזק של היפרפלזיה intimal בעכברים, כפי שמוצגים תוצאות היסטולוגית באיור 3. עורק הירך וללא כל פגע ידגימו lamellae שלם אלסטי ועובי רגיל והיקף. עורק הירך נפצע יציג היפרפלזיה intimal, מושפל lamellae אלסטי ולהפגין מחדש endothelialization בנקודות זמן מאוחר יותר. Re-endothelialization הוא בדרך כלל מלא בסביבות 21 ימים, אבל זה תלוי בזן הרקע של העכ...

אנו מתארים טכניקה כירורגית המייצרת פגיעה בחוט בעורק הירך של עכברים כדי לגרום להיפרפלזיה ניאו-אינטימית לשמש כמערכת בדיקה מודל לאספקה פרי-וסקולרית של תרכובות טיפוליות לעיכוב רסטנוזיס.

דגם Murine של עורק הירך חוט פגיעה בהשרשה של perivascular החדרת תרופות תיקון

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לפגוע ולשלול את האנדותל של עורק הירך, בין אם תוך קשירת הענף השרירי של עורק הירך, או החזרת זרימה תקינה לשני כלי הדם. זה מושג על ידי בידוד תחילה של עורק הירך וענף השרירים על ידי דיסקציה קהה ותפרי משי. בשלב השני נוצר עורק בענף השרירי, ואז מוחדר חוט מפותל לפגיעה בעורק הירך.בשלב האחרון, הכלי נסגר וזרימת הדם מוחזרת לענף השרירי. בסופו של דבר, כתמים היסטולוגיים משמשים להמחשת ההיפרפלזיה האינטימית של העורק בתגובה לפגיעה בזמן הניסוי. נקודות עניין.היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני טכניקות קיימות הוא שבשיטה שלנו, הענף השרירי של עורק הירך אינו נקשר בסוף ההליך. אז עלה לנו לראשונה הרעיון להשתמש בצריבה חלקית כאשר ביצענו ניתוחים בעכברים שהיו קטנים מדי לטכניקות קונבנציונליות. זה באמת מה שהעניק לנו השראה ליצור את השיטה של שימוש בצריבה חלקית כדי לסגור את כלי הדם ולהשאיר את עורק הירך פתוח.התחל בשימוש במספריים כירורגיים קטנים כדי לבצע חתך מעוקל בעור מעל עורק הירך של עכבר בוגר מורדם. הנח מקבעים מגנטיים בחתך, ואז נתח בבוטות את הרקמה שמסביב כדי לאתר את עורק הירך. הרטיבו את הטישו עם אפליקטור סטרילי עם קצה כותנה טבול במי מלח, ולאחר מכן השתמשו במלקחיים כדי לבודד עוד יותר את העורק.לאחר מכן, השתמש במלקחיים עדינים כדי להפריד בעדינות את העצב מצרור כלי הדם, תוך הקפדה לא לפגוע בווריד או בעצב. דחף בזהירות את העצב הרחק מהצרור כדי להימנע מגירוי שלו. לאחר מכן הפרד בעדינות את וריד הירך מעורק הירך ואתר את התפצלות הירך.לולאה תפר משי 6.0 מתחת לעורק הירך בדיוק רחוק מההסתעפות, ואבטח אותו עם המוסטט כדי להגביל את זרימת הדם לעורק, ואז אחורי ללולאת ההסתעפות תפר משי שני 6.0 מתחת לעורק הירך, ואבטח אותו לתפר עם המוסטט כפי שהודגם זה עתה כדי לסייע במיקום לולאת העורק. שני תפרים נוספים מתחת לענף השרירי של עורק הירך. יפה אותם ואבטח אותם עם המוסטט נוסף.לאחר מכן הרטיבו את הרקמות במי מלח נוספים. לולאה תפר אחד מתחת לעורק הירך לאחר ההסתעפות ואבטח עם המוסטט כדי לבצע את הפגיעה בחוט עורק הירך. ראשית, משוך את התפר הפרוקסימלי כלפי מעלה כדי להגביל את זרימת הדם לעורק.לאחר מכן משוך מעט את ההמוסטטים הדיסטליים והענפים כדי לחשוף את האתר לאוטומיה של העורק, ולקשור את הענף השרירי עם קשירת תפר. לאחר מכן השתמש במספריים מיקרו מיוצבים עם מלקחיים מאוזנים על גליל סרט כירורגי כדי לבצע אוטומיה של העורקים בענף הצדדי של ההסתעפות. כעת השתמש במלקחיים עדינים כדי להרים בעדינות את פתח העורק ולהכניס את הקצה המעוגל של החוט לעורק באמצעות מזרק כדי להוסיף טיפה אחת או שתיים של לידוקאין לאזור כדי להקל על התקדמות החוט.כאשר החוט מגיע לתפר הפרוקסימלי, שחרר את התפר והתאם אותו כך שהתקדמות החוט לא תפגע. ואז הכנס את החוט עד שהוא לא יכול להתקדם. יתר על כן, אפשר לחוט להישאר בעורק הירך למשך דקה אחת.לאחר מכן נסוג וקדם את החוט בתנועת ניסור 10 פעמים כדי לפצוע ולהוציא את האנדותל של העורק כאשר הפציעה הושלמה, משוך את החוט לאט עד שהקצה העגול עבר את התפר הפרוקסימלי. לאחר מכן משוך את התפר כדי להגביל את זרימת הדם לעורק וסיים למשוך את החוט כדי לקשור את ענף השריר. הדק את התפר שנותר על הענף כדי למנוע דימום מאוטומיה של העורקים.לאחר מכן, השתמש במספריים מיקרו חתך כדי לחתוך את הענף הקטן בין שני התפרים. לאחר מכן החזר את זרימת הדם לעורק הירך המאשר שהדם אינו דולף, וחתוך את הקצוות מהתפרים. לחלופין, כדי למנוע קשירה של ענף השריר ולאפשר גישה לכלי הדם דרך עורק הירך הראשי הגדול יותר, יש לפגוע בעורק עם החוט כפי שהודגם זה עתה ולסגור את החתך על ידי מריחה קלה של קצה צריבה מחוממת עם קצה דק לצד האוטומיה של העורק כשהוא מתקרר.בעת ביצוע שיטת הצריבה החלקית, הפיכת העורק בצד הכלי מגדילה את הסיכוי לצריבה מוצלחת כדי לבדוק את הצלחת הצריבה יש לשחרר את התפר הפרוקסימלי ולהחזיר את הזרימה לעורק הירך. אם הצריבה תצליח, זרימת הדם תשוחזר דיסטלית לעורק. הסר את הקשרים הפרוקסימליים והדיסטליים הזמניים.לבסוף, השתמש במספריים סטריליים כדי להקהות את פינות אזור המחסום של מדבקת מתן תרופות. לאחר מכן הנח את המדבקה על עורק הירך הפגוע כשצד משחרר תרופה פונה לכלי הדם באמצעות מלקחיים כדי להתאים את מיקום המדבקה לפי הצורך. בעקבות פגיעה בחוט, היפרפלזיה ניאו-אינטימית מתפתחת לאורך תקופה של 14 עד 28 יום.כפי שמוצג באיור, עורק ירך לא פגוע יפגין אלסטיות שלמות בצליעה ועובי והיקף תקינים. עורק עצם הירך הפגוע, לעומת זאת, יציג היפרפלזיה אינטימית וגומי צליעה, כמו גם אנדותליזציה בנקודות זמן מאוחרות יותר. בעת ביצוע הליך זה, חשוב להגביל את גודל האוטומיה.מכיוון שעורק גדול אוטומיה תגרום לעורק הירך להתנתק במהלך החדרת החוט. בנוסף, יהיה קשה לסגור אוטומיה גדולה של העורקים בשיטת הצריבה ללא קשירה. אנו מקווים ששיטה זו תסיר חלק מהחסמים הטכניים לביצוע טכניקה זו ותסייע לאנשים למצוא שיטות חדשות לטיפול במחלות לב וכלי דם.

murine-model-femoral-artery-wire-injury-with-implantation

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

משלוח סמים האוסמוטי לhindlimbs איסכמי וטפטוף של כלי דם עם Microfil למייקרו-טומוגרפיה ממוחשבת הדמיה

אנו מציגים פרוטוקול לשימוש במערכת רדיו telemetric להקליט פרמטרים לב וכלי דם בחולדות חוט השדרה T4 transected שמונה שבועות לאחר תאי גזע עצביים בגזע מוח העוברי השתלה לאתר הנגע. טלמטריה היא טכניקה מתקדמת לאבחון תפקוד לב וכלי דם אצל חולדות שנפגעו נעו בחופשיות מודעת חוט השדרה באופן מדויק.

מערכת רדיו-telemetric לפקח פונקצית לב וכלי דם אצל חולדות עם חוט השדרה חיתוך רוחב ועוברי גזע עצבי שתלי סלולארי

מודל פציעת חוט עורק הירך העכבר של היצרות הוא מאתגר מבחינה טכנית. בפרוטוקול זה אנו מציגים את הפרטים הטכניים מפתח חיוניים לביצוע בהצלחה פציעת חוט כדי לגרום neointima העקבי למחקרים של היצרות.

דגם Murine של עורקי היצרות: היבטים טכניים של עצם הירך חוט פגיעה

פרוטוקול זה נועד להקל על המגבלה של השתלת תאים לקויה לטיפול בתאי גזע באוטם שריר הלב באמצעות שימוש במערכת הידרוג'ל ודבק מבוסס פיברין. בגישה זו, ניתן לשמור על מגע בין תא לרקמה לאחר אוטם, מה שמגדיל את הפוטנציאל הטיפולי של גורמים מועילים באתר הפציעה.

Hydrogel לבנות והפיברין מבוסס גישת דבק כדי לספק Therapeutics באוטם שריר הלב דגם Murine.

מחקר זה מתאר הליך פולשני עבור אינדוקציה של טרשת עורקים מואצת בעכברים. בהשוואה לשיטות אחרות באמצעות פגיעה חשמלית או הקפאה, פציעה כתוצאה מכני מחקה את המצב האנושי של restenosis לאחר טיפולים revascularization והוא אידיאלי לחקר המנגנונים המולקולריים המעורבים.

אינדוקציה של טרשת עורקים מואצת בעכברים: מודל "פגיעת חוט"

הקמנו מודל של אנגיופלסטיקה של טלאי קרום הלב שניתן להשתמש בו בוורידים או בעורקים בקוטר קטן. ניתן להשתמש במודל זה להשוואת היווצרות היפרפלזיה ניאו-אינטימית ורידית ועורקית.

תיקון אנגיופלסטיקה בחולדת אב העורקים או נחות Vena Cava

פרוטוקול זה נועד להשתיל תיקון ביו-מודפס בתלת-ממד על האפיקארדיום של עכברים אוטמים המדגמים אי ספיקת לב. הוא כולל פרטים לגבי הרדמה, פתיחת החזה הכירורגית, קשירה קבועה של העורק הקדמי השמאלי (LAD) העורק הכלילי ויישום של תיקון bioprinted על האזור האוטם של הלב.

השתלה של תיקון ביו-מודפס בתלת מיתד במודל מורין של אוטם שריר הלב

גיוס לויקוציטים וטסיות דם מהווה מרכיב חיוני הדרוש לצמיחה יעילה של עורקי בטחונות במהלך העורקים. מיקרוסקופ מולטיפוטון הוא כלי יעיל למעקב אחר דינמיקה של תאים עם רזולוציה מרחבית-טמפורלית גבוהה in vivo ופחות רעילות לאור לחקר גיוס לויקוציטים ואקסטרווסציה במהלך העורקים.

הדמיה תוך-חיונית מולטיפוטון לניטור גיוס לויקוציטים במהלך דלקת עורקים במודל מורין גפיים אחוריות

זהו פרוטוקול להשתלה כירורגית ותפעול של ממשק אלחוטי לעצבים היקפיים. אנו מדגימים את התועלת של גישה זו באמצעות דוגמאות מממריצים עצביים הממוקמים על עצב הסיאטי או הפרני של החולדה.

השתלה ובקרה של מערכות אלחוטיות, נטולות סוללה להתממשקות עצבית היקפית

כאן אנו מציגים מודל עכברי לאנסטומוזיס של עורק הירך, המציע לחוקרים מודל בעל ערך לבעלי חיים לחקר והדמיה של היצרות אנסטומוטית של כלי הדם. התפתחות זו חיונית לקידום הבנתנו את הפתופיזיולוגיה העומדת בבסיס מצב זה ולהקלה על מחקר מדויק ויעיל יותר במחלות כלי דם.

פיתוח מודל עכברי להיצרות אנסטומטית בעורק הירך

מאמר זה מציג פרוטוקול שלב אחר שלב למיקום שתל טלמטרי in vivo באאורטה היורדת של חולדות, המאפשר ניטור רציף וארוך טווח של פרמטרים קרדיווסקולריים, טמפרטורת ליבת הגוף ופעילות בעלי חיים לפני ואחרי פגיעה חמורה בחוט השדרה הגבוה בחזה.

In Vivo טלמטריה לתיעוד פרמטרים קרדיווסקולריים ארוכי טווח, טמפרטורה ופעילות במודלים של חולדות פציעות חוט שדרה

חקור מודל ניתוחי של פגיעה בעורק הירך בעכברים לחקר היפרפלזיה ניאואינטימלית. שיטה זו מאפשרת בדיקת תרופות פריווסקולריות להעכבת רסטנוזה ולשיפור הבנת מנגנוני תיקון כלי הדם.

דגם Murine של עורק הירך חוט פגיעה בהשרשה של perivascular החדרת תרופות תיקון

גלה סרטונים נוספים