August 14th, 2016
מודל גידול ראשוני orthotopic סרטן השד סר כירורגית של גידול ראשוני כדי להאריך את חיי עכבר כדי ליצור גרורות ספונטניות מתוארים. גידול הגידול ולהתפתחותו מנוטר לכמת ידי דימות פלואורסצנטי בלוציפראז.
המטרה הכוללת של הליך זה היא לבסס מודל סרטן שד גרורתי ספונטני של עכבר המאפשר כימות של גידול ראשוני של סרטן השד וכן הדמיה ומדידה של קינטיקה של גרורות סרטן השד. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום גרורות סרטן ספונטניות, כגון כיצד שינוי גנים הקשורים לגידול יכול להשפיע על צמיחת סרטן וגרורות? היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שמודל זה מחקה את התפתחות סרטן השד האנושי, מה שהופך אותו לאידיאלי לבדיקת יעילותם של חומרים טיפוליים. ביום הניסוי, קצרו תרבית לילה של תאי גידול לוציפראז 4T1, וגלולה את התאים על ידי צנטריפוגה. הסר את הסופרנטנט בוואקום, ואז שטוף את התאים ב-10 מ"ל PBS, והשהה מחדש את הגלולה ב-10 מ"ל PBS טרי לספירה. לאחר מכן, יש לדלל את התאים לריכוז של 2x10^5 תאים/מ"ל ב-HBSS, ולהוציא את התרחיף לצינורות מיקרו-צנטריפוגה סטריליים של 1.5 מ"ל על קרח. לאחר מכן, כבלו את העכבר ביד, סמנו את בלוטות החלב של עכבר BALB/c נקבה בת 6-8 שבועות בטוש שחור, והשתמשו בגוזם שיער אלקטרוני כדי לגלח את השערות המקיפות את הפטמה מספר 3. המשך להשעות מחדש את התאים על ידי 2-3 היפוכים של צינור המיקרופוגה, ואז שאב בזהירות 50
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
מחקר זה מציג מודל גידול ראשוני של סרטן השד באותו מיקום (orthotopic), המאפשר הסרת הגידול הניתוחית כדי להאריך את תוחלת החיים של עכברים. המודל מאפשר יצירת גרורות ספונטניות, כאשר צמיחת הגידול והתקדמותו נצפות באמצעות הדמיית פלואורסצנציה של לוקיפרז.